Fonction artérielle et athérosclérose dans la thrombocytémie essentielle

1. Patients et sujets témoins

   Les patients sont sélectionnés à partir de la base de données du département d'hématologie du centre médical universitaire de Ljubljana, en Slovénie, qui ont reçu un diagnostic d'ET positif au JAK2 V617F entre 2011 et 2014. Il y avait 124 patients ET JAK2 positifs, parmi lesquels 61 n'avaient pas d'antécédents personnels de maladie vasculaire athéroscléreuse cliniquement manifeste (infarctus du myocarde, angine de poitrine, maladie artérielle périphérique, maladie aortique, accident ischémique transitoire ou accident vasculaire cérébral ischémique). 40 patients (14 hommes et 26 femmes) avec JAK2 V617F positif ET sans maladie cardiovasculaire cliniquement apparente ont signé le consentement éclairé et ont été inclus dans l'étude en 2014 - 2015 pour le premier examen et 36 (12 hommes et 24 femmes) d'entre eux sont attendus participer également en 2018-19.

   Le groupe témoin est sélectionné parmi les employés en bonne santé du centre médical universitaire de Ljubljana et leurs proches. Il est apparié au groupe de patients pour la répartition par âge et sexe et les facteurs de risque classiques de maladies cardiovasculaires. 42 personnes (16 hommes et 26 femmes) ont participé au premier examen et au moins 38 sujets (14 hommes et 24 femmes) devraient participer au deuxième examen.

2. Mesures de base

   Chaque participant remplira un questionnaire sur les antécédents familiaux de maladies cardiovasculaires, les antécédents médicaux personnels, le tabagisme et les médicaments. Un examen physique sera effectué, comprenant des mesures de la taille, du poids, du tour de taille, de la pression artérielle systolique et diastolique. Le sang sera prélevé pour analyse en laboratoire de la numération globulaire complète, des électrolytes, des lipides sériques, des tests de la fonction hépatique, de l'urée, de la créatinine et des marqueurs inflammatoires.

   Le risque sur 10 ans de maladie coronarienne (MC) et de maladie cardiovasculaire générale (MCV) sera calculé à l'aide de l'équation de risque de Framingham.

3. Charge allélique JAK2 V617F/G1849T

   Le kit ipsogen JAK2 MutaQuant, Qiagen (ZDA) (Réf : n° 673523) sera utilisé pour la détection et la quantification de l'allèle JAK2 V617F/G1849T dans l'ADN génomique extrait du sang périphérique des patients et également des sujets témoins. Une amorce spécifique SNP amplifie sélectivement l'allèle JAK2 V617F qui est détecté avec un instrument qPCR en temps réel qui quantifie les produits PCR. La charge d'allèles JAK2 V617F sera calculée et exprimée en pourcentage d'allèles mutés JAK2 V617F dans l'ensemble de l'enregistrement JAK2. L'analyse sera effectuée dans le laboratoire du département d'hématologie du centre médical universitaire de Ljubljana pour tous les échantillons.

4. Examen échographique de l'artère carotide

   Pour l'examen des artères carotides extracrâniennes, un échographe Aloka Prosound α7 (Hitachi Aloka Medical, Ltd., Japon) sera utilisé avec une sonde vasculaire linéaire fonctionnant à une fréquence de 5 à 13 MHz. Les artères carotides communes, internes et externes des deux côtés seront examinées. A chaque examen, les mesures seront faites deux fois et leurs valeurs moyennes seront calculées. L'examen échographique sera effectué par le même échographiste lors des deux visites de tous les participants.

   L'épaisseur de l'intima-média sera mesurée à 2 cm en amont du bulbe de l'artère carotide commune des deux côtés. Le dépistage des artères carotides extracrâniennes pour les plaques d'athérosclérose sera effectué, avec une définition de plaque d'une lésion focale, dépassant l'épaisseur intima-média d'au moins 50 % ou atteignant une épaisseur absolue d'au moins 1,5 mm dans deux projections orthogonales. La notation des plaques d'athérosclérose est effectuée selon la méthodologie de l'étude de Rotterdam. La présence d'au moins une plaque dans chaque segment du lit artériel carotidien extracrânien (divisé en artère carotide commune et bulbe, artère carotide interne et artère carotide externe) de chaque côté est notée 1 point. Ainsi, le score de plaque carotidienne varie de 0 (absence de plaques) à 6 (plaques présentes dans tous les segments des deux côtés).

   L'écho-suivi de l'artère carotide commune sera utilisé pour évaluer la rigidité artérielle exprimée par l'indice de rigidité β et la vitesse de l'onde de pouls. Les mesures seront effectuées au niveau de l'artère carotide commune à 2 cm en amont du bulbe des deux côtés. L'indice de rigidité β sera calculé comme suit : β = ln (P_max / P_min) / [(D_max - D_min / D_min)], où P_max = la pression artérielle systolique, P_min = la pression diastolique ; D_max = le diamètre artériel maximal et D_min = le diamètre artériel minimal. La vitesse de l'onde de pouls (PWV) sera calculée comme suit : PWV = √ ((β x P_min) / 2ρ) ); ρ = 1050 kg/m³.

5. Évaluation de la fonction endothéliale des artères digitales

   La fonction endothéliale des artères digitales sera mesurée par pléthymographie numérique avec EndoPat 2000, Itamar Medical REF, Caesarea, Israel, Software Version 3.3.x et exprimée sous forme d'indice d'hyperémie réactive (RHI) et d'indice d'augmentation (AI). Les modifications du tonus artériel sont provoquées en créant une réponse hyperémique en aval induite par une occlusion standard de 5 minutes de l'artère brachiale (à l'aide d'un brassard de tension artérielle, gonflé à 60 mmHg au-dessus de la pression artérielle). Lorsque le brassard est relâché, la poussée du flux sanguin provoque une dilatation médiée par le flux (FMD) dépendante de l'endothélium qui se manifeste par une hyperémie réactive. Un rapport post-occlusion à pré-occlusion est calculé par le logiciel EndoPAT et les et A) sont déterminés. Les résultats sont normalisés à une fréquence cardiaque de 75/min.

6. Mesure de la charge calcique de l'artère coronaire

   La charge calcique des artères coronaires est mesurée avec un scanner PET-CT Biograph M 128 rangées (Siemens, Erlangen, Allemagne). La numérisation se fait de la base au sommet du cœur. Un protocole sans contraste avec déclenchement séquentiel prospectif de l'ECG est utilisé. Le temps de rotation est de 0,33 sec, avec une tension de tube de 120 kV, CARE Dose 4D et une épaisseur de tranche de 3 mm, sans chevauchement de tranche. Le post-traitement est effectué sur le poste de travail Syngo Leonardo. La charge calcique coronaire est exprimée par le score d'Agatston. L'évaluation de l'ensemble de données de chaque sujet d'étude est effectuée trois fois et la valeur moyenne est utilisée pour une analyse plus approfondie.

7. analyses statistiques

Tous les ensembles de données seront testés pour la normalité de la distribution à l'aide du graphique du quintile normal, en calculant le coefficient de corrélation et en le vérifiant pour la valeur critique qui justifierait le rejet de la distribution normale avec une probabilité d'erreur α de 0,05.

Les données normalement distribuées seront présentées sous forme de moyenne et d'écart type, tandis que les données non normalement distribuées seront présentées sous forme de médiane et d'intervalle entre le 1er et le 3e quartile.

Les différences entre les sujets atteints d'ET et les sujets témoins au premier et au deuxième examen seront testées par le test du chi carré pour les variables discrètes, pour les variables continues normalement distribuées par le test t de Student apparié pour les échantillons indépendants et pour les variables continues non normalement distribuées. variables par le test de Mann-Whitney pour des échantillons indépendants. Les valeurs P < 0,05 seront considérées comme significatives avec une correction pour les comparaisons multiples.

Les modifications de la fonction vasculaire et de la morphologie au cours de la période d'observation de 4 ans seront comparées entre les deux groupes par le test du log rank. Les valeurs P < 0,05 seront considérées comme significatives.

L'association entre les paramètres de fonction/morphologie vasculaire et la charge allélique JAK2 V617F sera évaluée par le coefficient de corrélation de Pearson.