Metabolikus myopathiában szenvedő betegek zsír- és cukoranyagcseréje edzés közben

Az elsődleges és másodlagos kimenetel összehasonlítása érdekében a betegeket egy egészséges kontrollalanyok egy csoportjával hasonlítják össze (kor, nem, fizikai aktivitási szint és BMI alapján).

Mód:

Minden alany 3 tesztnapon megy keresztül.

1. tesztnap:

• Nemzetközi Fizikai aktivitás Kérdőív (IPAQ). Az eredményeket a betegek és a kontroll alanyok összehasonlítására használják fel.
• DEXA-szkennelés. Ezt a stabil izotóp nyomjelzők eloszlási térfogatának becslésére használják.
• Maximális oxidációs kapacitás teszt (max-teszt). A kerékpár-ergométeren az alanyok körülbelül 15 percig gyakorolnak, növekvő ellenállással a kimerülésig. A csúcs oxidatív és terhelési kapacitásokat az egészséges kontrollokhoz hasonlítják, és a következő terhelési tesztekben használt VO2max 55-65%-ának megfelelő munkaterhelés meghatározására használják.
• Vérminták. Edzés előtt és kimerültségkor mintákat vesznek, és elemzik a glükóz, laktát, ammónia, kreatin-kináz és mioglobin plazmakoncentrációját.

2. tesztnap:

•1. hosszú gyakorlati teszt. Ennek a tesztnek a célja a teljes zsír- és cukoroxidációs ráta mérése edzés közben stabil izotóp nyomjelzők segítségével.

Az alanyok 3-9 órás koplalás után érkeznek a laboratóriumba. Egy IV-katétert helyeznek be az egyik kar cubitalis vénájába, egy másikat pedig a másik kéz perifériás vénájába. A stabil izotóp nyomjelzőket a cubitalis vénába a következő oldatok állandó infúziójaként adják be:

• [U-13C]-palmitát (0,0026 mg x kg-1 x min-1, 0,085 mg x kg-1 NaH13CO3 beindító bólus után)
• [1,1,2,3,3-2H5]-glicerin (0,0049 mg x kg-1 x min-1)
• [6,6-2H2]-glükóz (0,0728 mg x kg-1 x perc-1 ) Az alanyok két órán át pihennek az infúziók beadása közben, amíg a nyomjelzők el nem oszlanak a szervezetben és el nem érik az egyensúlyi állapotot. A pihenés után az alanyok a ciklusergométeren edzenek kimerültségig, vagy maximum 1 órán keresztül a VO2max 55-65%-ának megfelelő intenzitással.

Edzés közben folyamatosan mérik a pulzusszámot, és minden második percben az alany egy Borg-skálán értékeli a megerőltetés mértékét (Rate of Perceived Exertion, RPE).

• Vér- és légvételi minták Az edzés előtt 20 perccel és tízpercenként az edzés végéig vérmintákat vesznek és mintákat vesznek a kilélegzett leheletből. A leheletet elemzik a 13CO2-dúsítás szempontjából. A vérben elemzik a glükóz, laktát, ammónia, kreatin-kináz és mioglobin plazmakoncentrációját.

3. tesztnap:

•2. hosszú gyakorlati teszt. Ennek a tesztnek az a célja, hogy megvizsgálja az edzéskapacitást és a teljesítményt HR, VO2 és RPE értékekkel mérve hosszan tartó edzés során. Egészséges, sértetlen anyagcserével rendelkező emberek izomműködési körülményeinek utánzása érdekében a betegek 10%-os glükózoldatot kapnak infúzióban a vércukorszint fenntartása érdekében edzés közben.

Az alanyok 3-9 órás koplalás után érkeznek a laboratóriumba. 2 óra pihenés után az alanyok a ciklusergométeren edzenek kimerültségig, vagy maximum 1 órán keresztül a VO2max 60-65%-ának megfelelő intenzitással, mint a 2. tesztnapon. Ezúttal az alanyok nem kapnak stabil izotóp nyomjelzőt. 10 perccel az edzés előtt az alanyoknak 0,2 g/ttkg glükózoldatot adnak be egy cubitális véna katéterben, és megkezdik a 10%-os glükózoldat állandó infúzióját (100 ml/óra). Az infúzió az edzési időszak alatt folytatódik.

A pulzusszám, az észlelt megerőltetés mértéke és a vérmintavétel ugyanazt a protokollt követi, mint az 1. vizsgálati napon, kivéve, hogy nem vesznek levegőmintát, és nem végeznek stabil izotópok elemzését, mivel a nyomjelzőket a 3. vizsgálati napon nem használják.

• Vérminták. Edzés előtt 20 perccel és tízpercenként az edzés végéig vérmintát vesznek. A vérben elemzik a glükóz, laktát, ammónia, kreatin-kináz és mioglobin plazmakoncentrációját.
• Izombiopszia Az 1. vizsgálati nap végén a vizsgálók önkéntes izombiopsziát végeznek.

Statisztikai módszerek:

A vizsgálók páros t-próbát, kétvégű tesztelést alkalmaznak (vagy a megfelelő nem paraméteres tesztet, ha a normalitás feltételezése nem teljesül). A <0,05 p-érték szignifikánsnak minősül. Az eredményeket az átlagok közötti különbség bizalmi intervallumával együtt jelentik. A statisztikai elemzéshez a SigmaPlot 11.0-s verzióját (vagy egy hasonló statisztikai programot) használjuk.

A 4 napos próbaidőszak alatt nem készülnek közbenső elemzések. Abban az esetben, ha a beteg visszavonul/kivonásra kerül, az elvégzett vizsgálatokból nyert adatok bekerülnek az elemzésekbe. A nyers adatok, amelyek egyértelműen és vitathatatlanul mérési hibából származnak, nem kerülnek bele (a vizsgáló által értékelve). A hiányzó vagy elveszett adatokat lehetőség szerint újra kell értékelni.