Metabolismo de gordura e açúcar durante o exercício em pacientes com miopatia metabólica

Os pacientes serão comparados a um grupo de indivíduos de controle saudáveis ​​pareados (pareados por idade, sexo, nível de atividade física e IMC) para comparação das medidas de resultados primários e secundários.

Métodos:

Cada sujeito passará por 3 dias de teste.

Teste dia 1:

• Questionário Internacional de Atividade Física (IPAQ). Os resultados serão usados ​​para combinar os pacientes com os controles.
• DEXA-scan. Isso é usado para estimar o volume de distribuição para marcadores de isótopos estáveis.
• Teste de capacidade oxidativa máxima (max-test). Em um cicloergômetro, os sujeitos se exercitarão por aproximadamente 15 minutos com resistência crescente até a exaustão. As capacidades oxidativas de pico e carga de trabalho serão comparadas com os controles saudáveis ​​e serão usadas para encontrar a carga de trabalho que corresponde a 55-65% do VO2max usado nos testes de exercício a seguir.
• Amostras de sangue. Amostras serão coletadas antes do exercício e na exaustão e serão analisadas as concentrações plasmáticas de glicose, lactato, amônia, creatina quinase e mioglobina.

Teste dia 2:

•Teste de exercício longo #1. O objetivo deste teste é medir as taxas totais de oxidação de gordura e açúcar durante o exercício, usando marcadores de isótopos estáveis.

Os indivíduos chegam ao laboratório após 3-9 horas de jejum. Um cateter IV é inserido na veia cubital em um braço e outro em uma veia periférica na outra mão. Os marcadores de isótopos estáveis ​​serão administrados na veia cubital como uma infusão constante de soluções de:

• [U-13C]-palmitato (0,0026 mg x kg-1 x min-1, após um bolus de priming de 0,085 mg x kg-1 NaH13CO3)
• [1,1,2,3,3-2H5]-glicerol (0,0049 mg x kg-1 x min-1)
• [6,6-2H2]-glicose (0,0728 mg x kg-1 x min-1 ) Durante duas horas, os indivíduos descansam enquanto recebem as infusões até que os traçadores se distribuam no corpo e atinjam um estado estacionário. Após o descanso, os sujeitos exercitam-se no cicloergômetro até a exaustão ou por no máximo 1 hora em uma intensidade que corresponde a 55-65% do VO2max.

A frequência cardíaca é medida continuamente durante o exercício, e a cada dois minutos o sujeito avalia seu grau de esforço (Rate of Perceived Esertion, RPE) em uma escala de Borg.

•Amostras de sangue e respiração De 20 minutos antes do exercício e a cada dez minutos até o final do exercício, amostras de sangue são coletadas e amostras da respiração expirada são coletadas.A respiração é analisada quanto ao enriquecimento de 13CO2. O sangue é analisado quanto às concentrações plasmáticas de glicose, lactato, amônia, creatina quinase e mioglobina.

Teste dia 3:

•Teste de exercício longo #2. O objetivo deste teste é investigar a capacidade de exercício e o desempenho medido como FC, VO2 e RPE durante o exercício prolongado. Para imitar as condições para os músculos em atividade em pessoas saudáveis ​​que têm um metabolismo intacto, os pacientes recebem uma infusão de uma solução de glicose a 10% para manter o açúcar no sangue durante o exercício.

Os indivíduos chegam ao laboratório após 3-9 horas de jejum. Após 2 horas de descanso, os sujeitos se exercitam no cicloergômetro até a exaustão ou por no máximo 1 hora em uma intensidade que corresponde a 60-65% do VO2max, como fizeram no dia 2 do teste. Desta vez, os sujeitos não recebem rastreadores de isótopos estáveis. 10 minutos antes do exercício, os sujeitos recebem um bolus de solução de glicose 0,2 g/kg em um cateter na veia cubital e inicia-se uma infusão constante de solução de glicose a 10% (100ml/h). A infusão continua durante todo o período de exercício.

As avaliações de frequência cardíaca, frequência percebida de esforço e coleta de sangue seguem o mesmo protocolo do dia 1 do teste, exceto que nenhuma amostra de respiração é coletada e nenhuma análise de isótopos estáveis ​​é feita, uma vez que os traçadores não são usados ​​no dia 3 do teste.

• Amostras de sangue. A partir de 20 minutos antes do exercício e a cada dez minutos até o final do exercício, são coletadas amostras de sangue. O sangue é analisado quanto às concentrações plasmáticas de glicose, lactato, amônia, creatina quinase e mioglobina.
• Biópsia muscular No final do dia 1 do teste, os investigadores realizarão uma biópsia muscular voluntária.

Métodos estatísticos:

Os investigadores usarão um teste t pareado, teste bicaudal (ou o teste não paramétrico correspondente, se a suposição de normalidade não for atendida). Um valor de p < 0,05 será considerado significativo. Os resultados serão relatados com intervalos de confiança da diferença nas médias. SigmaPlot versão 11.0 (ou um programa estatístico similar) será usado para análise estatística.

Nenhuma análise intermediária será feita durante o período experimental de 4 dias. No caso de um paciente desistir/ser retirado, os dados obtidos dos testes concluídos serão incluídos nas análises. Não serão incluídos dados brutos que resultem clara e indiscutivelmente de um erro de medição (avaliados pelo investigador). Dados ausentes ou perdidos serão, se possível, reavaliados.