Metabolismo de grasas y azúcares durante el ejercicio en pacientes con miopatía metabólica

Los pacientes se compararán con un grupo de sujetos de control sanos emparejados (emparejados por edad, sexo, nivel de actividad física e IMC) para comparar las medidas de resultado primarias y secundarias.

Métodos:

Cada asignatura pasará por 3 días de prueba.

Día de prueba 1:

• Cuestionario Internacional de Actividad Física (IPAQ). Los resultados se utilizarán para emparejar a los pacientes con los sujetos de control.
• Escáner DEXA. Esto se utiliza para estimar el volumen de distribución de los trazadores de isótopos estables.
• Prueba de capacidad oxidativa máxima (max-test). En un cicloergómetro, los sujetos se ejercitarán durante aproximadamente 15 minutos aumentando la resistencia hasta el agotamiento. Las capacidades oxidativas y de carga de trabajo máximas se compararán con los controles sanos y se utilizarán para encontrar la carga de trabajo que corresponde al 55-65 % del VO2max utilizado en las siguientes pruebas de ejercicio.
• Muestras de sangre. Se extraerán muestras antes del ejercicio y al agotamiento y se analizarán las concentraciones plasmáticas de glucosa, lactato, amoníaco, creatina quinasa y mioglobina.

Día de prueba 2:

•Prueba de ejercicio largo #1. El propósito de esta prueba es medir las tasas de oxidación de grasas y azúcares totales durante el ejercicio mediante el uso de trazadores de isótopos estables.

Los sujetos llegan al laboratorio después de 3-9 horas de ayuno. Se inserta un catéter intravenoso en la vena cubital de un brazo y otro en una vena periférica de la otra mano. Los trazadores de isótopos estables se administrarán en la vena cubital como una infusión constante de soluciones de:

• [U-13C]-palmitato (0,0026 mg x kg-1 x min-1, después de un bolo de cebado de 0,085 mg x kg-1 NaH13CO3)
• [1,1,2,3,3-2H5]-glicerol (0,0049 mg x kg-1 x min-1)
• [6,6-2H2]-glucosa (0,0728 mg x kg-1 x min-1) Durante dos horas, los sujetos descansan mientras reciben las infusiones hasta que los trazadores se hayan distribuido en el cuerpo y alcanzado un estado estable. Después del descanso, los sujetos se ejercitan en el cicloergómetro hasta el agotamiento o por un máximo de 1 hora a una intensidad que corresponde al 55-65% del VO2max.

La frecuencia cardíaca se mide continuamente durante el ejercicio, y cada dos minutos el sujeto evalúa su grado de esfuerzo (tasa de esfuerzo percibido, RPE) en una escala de Borg.

•Muestras de sangre y aliento Desde 20 minutos antes del ejercicio y cada diez minutos hasta el final del ejercicio, se extraen muestras de sangre y se recolectan muestras del aliento espirado. El aliento se analiza para determinar si está enriquecido con 13CO2. La sangre se analiza para determinar las concentraciones plasmáticas de glucosa, lactato, amoníaco, creatina quinasa y mioglobina.

Día de prueba 3:

•Prueba de ejercicio larga #2. El propósito de esta prueba es investigar la capacidad y el rendimiento del ejercicio medidos como HR, VO2 y RPE durante el ejercicio prolongado. Para imitar las condiciones de trabajo de los músculos en personas sanas que tienen un metabolismo intacto, los pacientes reciben una infusión de una solución de glucosa al 10% para mantener el azúcar en la sangre mientras hacen ejercicio.

Los sujetos llegan al laboratorio después de un ayuno de 3 a 9 horas. Después de 2 horas de descanso, los sujetos se ejercitan en el cicloergómetro hasta el agotamiento o por un máximo de 1 hora a una intensidad que corresponde al 60-65% del VO2max, como lo hicieron el día 2 de la prueba. Esta vez, los sujetos no reciben trazadores de isótopos estables. 10 minutos antes del ejercicio, los sujetos reciben un bolo de solución de glucosa 0,2 g/kg en un catéter en vena cubital y se inicia una infusión constante de solución de glucosa al 10% (100 ml/h). La infusión continúa durante todo el período de ejercicio.

Las evaluaciones de la frecuencia cardíaca, la tasa de esfuerzo percibido y las muestras de sangre siguen el mismo protocolo que el día 1 de la prueba, excepto que no se toman muestras de aliento ni se realizan análisis de isótopos estables, ya que los marcadores no se usan el día 3 de la prueba.

• Muestras de sangre. Desde 20 minutos antes del ejercicio y cada diez minutos hasta el final del ejercicio, se extraen muestras de sangre. La sangre se analiza para determinar las concentraciones plasmáticas de glucosa, lactato, amoníaco, creatina quinasa y mioglobina.
• Biopsia muscular Al final del día 1 de la prueba, los investigadores realizarán una biopsia muscular voluntaria.

Métodos de estadística:

Los investigadores utilizarán una prueba t pareada, dos colas (o la prueba no paramétrica correspondiente, si no se cumple el supuesto de normalidad). Se considerará significativo un valor de p < 0,05. Los resultados se informarán con intervalos de confianza de la diferencia de medias. Se utilizará SigmaPlot versión 11.0 (o un programa estadístico similar) para el análisis estadístico.

No se realizarán análisis intermedios durante el período de prueba de 4 días. En el caso de que un paciente se retire/sea retirado, los datos obtenidos de las pruebas completadas se incluirán en los análisis. No se incluirán los datos sin procesar que sean clara e indiscutiblemente el resultado de un error en la medición (evaluados por el investigador). Si es posible, se volverán a evaluar los datos faltantes o perdidos.