Обмен жиров и сахаров при физических нагрузках у пациентов с метаболической миопатией

Пациентов будут сравнивать с группой здоровых контрольных субъектов (подходящих по возрасту, полу, уровню физической активности и ИМТ) для сравнения первичных и вторичных показателей исхода.

Методы:

Каждый предмет будет проходить через 3 тестовых дня.

Тестовый день 1:

• Международный вопросник физической активности (IPAQ). Результаты будут использованы для сопоставления пациентов с контрольными субъектами.
• DEXA-скан. Это используется для оценки объема распределения индикаторов стабильных изотопов.
• Тест на максимальную окислительную способность (max-test). На велоэргометре испытуемые будут тренироваться примерно 15 минут с возрастающим сопротивлением до полного изнеможения. Пиковые окислительные способности и возможности рабочей нагрузки будут сравниваться со здоровым контролем и будут использоваться для определения рабочей нагрузки, которая соответствует 55-65% VO2max, используемой в следующих нагрузочных тестах.
• Образцы крови. Образцы будут взяты перед тренировкой и при истощении и будут проанализированы на концентрацию в плазме глюкозы, лактата, аммиака, креатинкиназы и миоглобина.

Тестовый день 2:

• Длинный тест с физической нагрузкой №1. Целью этого теста является измерение общей скорости окисления жиров и сахаров во время тренировки с использованием индикаторов стабильных изотопов.

Субъекты прибывают в лабораторию после 3-9 часов голодания. Один внутривенный катетер вводят в локтевую вену одной руки, а другой — в периферическую вену другой руки. Индикаторы стабильных изотопов будут вводиться в локтевую вену в виде постоянной инфузии растворов:

• [U-13C]-пальмитат (0,0026 мг x кг-1 x мин-1, после первичного болюса 0,085 мг x кг-1 NaH13CO3)
• [1,1,2,3,3-2H5]-глицерин (0,0049 мг x кг-1 x мин-1)
• [6,6-2H2]-глюкоза (0,0728 мг x кг-1 x мин-1) В течение двух часов субъекты отдыхают, получая инфузии, пока индикаторы не распределятся в организме и не достигнут стабильного состояния. После отдыха испытуемые выполняют упражнения на велоэргометре до изнеможения или максимум 1 час с интенсивностью, соответствующей 55-65% VO2max.

Частота сердечных сокращений непрерывно измеряется во время упражнений, и каждую минуту субъект оценивает степень своей нагрузки (скорость воспринимаемой нагрузки, RPE) по шкале Борга.

• Образцы крови и дыхания. За 20 минут до тренировки и каждые десять минут до окончания тренировки берутся образцы крови и образцы выдыхаемого воздуха. Выдыхаемый воздух анализируется на обогащение 13CO2. Кровь анализируют на концентрацию в плазме глюкозы, лактата, аммиака, креатинкиназы и миоглобина.

Тестовый день 3:

•Длинный тренировочный тест №2. Целью этого теста является исследование способности к физической нагрузке и производительности, измеряемой как ЧСС, VO2 и RPE во время длительных упражнений. Чтобы имитировать условия для работающих мышц у здоровых людей с нормальным обменом веществ, пациентам вводят 10% раствор глюкозы для поддержания уровня сахара в крови во время физических упражнений.

Субъекты прибывают в лабораторию после 3-9 часов голодания. После 2-часового отдыха испытуемые тренируются на велоэргометре до изнеможения или максимум 1 час с интенсивностью, соответствующей 60-65% VO2max, как и во 2-й день теста. На этот раз испытуемым не дают индикаторы стабильных изотопов. За 10 мин до тренировки испытуемым в катетер локтевой вены болюсно вводят 0,2 г/кг раствора глюкозы и начинают постоянную инфузию 10% раствора глюкозы (100 мл/ч). Инфузию продолжают в течение всего периода тренировки.

Оценка частоты сердечных сокращений, частоты воспринимаемой нагрузки и забор крови проводятся по тому же протоколу, что и в день тестирования 1, за исключением того, что пробы дыхания не берутся и анализы стабильных изотопов не проводятся, поскольку индикаторы не используются в день тестирования 3.

• Образцы крови. За 20 минут до тренировки и каждые десять минут до окончания тренировки берутся образцы крови. Кровь анализируют на концентрацию в плазме глюкозы, лактата, аммиака, креатинкиназы и миоглобина.
• Мышечная биопсия В конце 1-го дня исследования исследователи проводят добровольную мышечную биопсию.

Статистические методы:

Исследователи будут использовать парный t-тест, двустороннее тестирование (или соответствующий непараметрический тест, если предположение о нормальности не выполняется). Значение p <0,05 будет считаться значимым. Результаты будут представлены с доверительными интервалами разницы в средних значениях. SigmaPlot версии 11.0 (или аналогичная статистическая программа) будет использоваться для статистического анализа.

В течение 4-дневного пробного периода промежуточные анализы проводиться не будут. В случае, если пациент выбывает/выводится, в анализы будут включены полученные данные из выполненных тестов. Необработанные данные, которые явно и бесспорно являются результатом ошибки измерения, не включаются (оцениваются исследователем). Отсутствующие или потерянные данные будут, по возможности, переоценены.