Vet- en suikermetabolisme tijdens inspanning bij patiënten met metabole myopathie

Patiënten zullen worden vergeleken met een groep van gematchte gezonde controlepersonen (gematcht voor leeftijd, geslacht, fysieke activiteitsniveau en BMI) voor vergelijking van de primaire en secundaire uitkomstmaten.

methoden:

Elke proefpersoon doorloopt 3 testdagen.

Testdag 1:

• Internationale vragenlijst voor lichaamsbeweging (IPAQ). De resultaten zullen worden gebruikt om de patiënten te matchen met controlepersonen.
• DEXA-scan. Dit wordt gebruikt om het distributievolume voor stabiele isotooptracers te schatten.
• Maximale oxidatieve capaciteitstest (max-test). Op een fietsergometer oefenen proefpersonen gedurende ongeveer 15 minuten met toenemende weerstand totdat ze uitgeput zijn. De maximale oxidatieve en werkbelastingscapaciteiten zullen worden vergeleken met de gezonde controles en zullen worden gebruikt om de werkbelasting te vinden die overeenkomt met 55-65 % van de VO2max die wordt gebruikt in de volgende inspanningstests.
• Bloedstalen. Voor inspanning en bij uitputting worden monsters genomen en geanalyseerd op de plasmaconcentraties van glucose, lactaat, ammoniak, creatinekinase en myoglobine.

Testdag 2:

•Lange inspanningstest #1. Het doel van deze test is het meten van de totale vet- en suikeroxidatiesnelheden tijdens inspanning met behulp van stabiele isotooptracers.

Proefpersonen komen na 3-9 uur vasten aan in het laboratorium. Eén IV-katheter wordt ingebracht in de cubitale ader in de ene arm en een andere in een perifere ader in de andere hand. De stabiele isotoop-tracers worden in de cubitale ader toegediend als een constant infuus van oplossingen van:

• [U-13C]-palmitaat (0,0026 mg x kg-1 x min-1, na een priming bolus van 0,085 mg x kg-1 NaH13CO3)
• [1,1,2,3,3-2H5]-glycerol (0,0049 mg x kg-1 x min-1 )
• [6.6-2H2]-glucose (0.0728 mg x kg-1 x min-1 ) Gedurende twee uur rusten de proefpersonen terwijl ze de infusies krijgen totdat de tracers zich in het lichaam hebben verspreid en een stabiele toestand hebben bereikt. Na de rust oefenen de proefpersonen tot uitputting of maximaal 1 uur op de fietsergometer met een intensiteit die overeenkomt met 55-65% van VO2max.

De hartslag wordt continu gemeten tijdens het sporten en om de minuut evalueert de proefpersoon zijn/haar mate van inspanning (Rate of Perceived Exertion, RPE) op een Borg-schaal.

•Bloed- en ademmonsters Vanaf 20 minuten voor de training en elke tien minuten tot het einde van de training worden bloedmonsters genomen en monsters van de uitgeademde adem verzameld. De adem wordt geanalyseerd op 13CO2-verrijking. Het bloed wordt geanalyseerd op de plasmaconcentraties van glucose, lactaat, ammoniak, creatinekinase en myoglobine.

Testdag 3:

•Lange inspanningstest #2. Het doel van deze test is om het inspanningsvermogen en de prestaties gemeten als HR, VO2 en RPE tijdens langdurige inspanning te onderzoeken. Om de condities voor de werkende spieren na te bootsen bij gezonde personen met een intacte stofwisseling, krijgen de patiënten een infuus van een 10% glucose-oplossing om de bloedsuikerspiegel tijdens het sporten op peil te houden.

Proefpersonen komen na 3-9 uur vasten aan in het laboratorium. Na 2 uur rust oefenen de proefpersonen tot uitputting op de fietsergometer of maximaal 1 uur met een intensiteit die overeenkomt met 60-65% van VO2max, net als op testdag 2. Deze keer krijgen de proefpersonen geen stabiele isotooptracers. 10 minuten voor de training krijgen de proefpersonen een bolus glucose-oplossing van 0,2 g/kg in een cubitale aderkatheter en wordt een constant infuus van 10% glucose-oplossing gestart (100 ml/uur). De infusie gaat door tijdens de trainingsperiode.

Beoordeling van hartslag, snelheid van waargenomen inspanning en bloedafname volgen hetzelfde protocol als op testdag 1, behalve dat er geen ademmonsters worden genomen en geen analyses van stabiele isotopen worden gemaakt, aangezien de tracers niet worden gebruikt op testdag 3.

• Bloedstalen. Vanaf 20 minuten voor de inspanning en elke tien minuten tot het einde van de inspanning wordt er bloed afgenomen. Het bloed wordt geanalyseerd op de plasmaconcentraties van glucose, lactaat, ammoniak, creatinekinase en myoglobine.
• Spierbiopsie Aan het einde van testdag 1 voeren de onderzoekers een vrijwillige spierbiopsie uit.

Statistische methoden:

De onderzoekers gebruiken een gepaarde t-toets, tweezijdige toetsing (of de overeenkomstige niet-parametrische toets, als niet aan de aanname van normaliteit wordt voldaan). Een p-waarde van < 0,05 wordt als significant beschouwd. Resultaten worden gerapporteerd met betrouwbaarheidsintervallen van het verschil in gemiddelden. SigmaPlot versie 11.0 (of een soortgelijk statistisch programma) wordt gebruikt voor statistische analyse.

Tijdens de proefperiode van 4 dagen worden geen tussentijdse analyses gemaakt. In het geval dat een patiënt zich terugtrekt/wordt teruggetrokken, worden de verkregen gegevens van de voltooide testen meegenomen in de analyses. Ruwe data die duidelijk en onbetwistbaar het gevolg zijn van een meetfout worden niet meegenomen (geëvalueerd door de onderzoeker). Ontbrekende of verloren gegane gegevens worden indien mogelijk opnieuw beoordeeld.