Autológ zsírból származó felnőtt őssejt-transzplantáció szaruhártya-betegségek esetén (A-ADAS-CT-CD)

Különböző típusú őssejteket használtak különböző módon számos kutatási projektben annak érdekében, hogy megtalálják az optimális eljárást az emberi szaruhártya-sztróma regenerálására. Számos megközelítést tartalmazott, amelyek besorolhatók az őssejtek intrastromális beültetéseként (1) önmagában, (2) biológiailag lebomló vázzal együtt, (3) nem biológiailag lebontható vázzal vagy (4) decelluláris szaruhártya stroma vázzal. Valójában a szaruhártya stróma összetett szerkezetét még nem sikerült megismételni, és a szintetikus állvány alapú minták használatának jól ismert hátrányai vannak. A közelmúltban számos szaruhártya decellularizációs technikát írtak le, amelyek acelluláris szaruhártya extracelluláris mátrixot (ECM) biztosítanak. Ezek az állványok az elmúlt néhány évben felkeltették a figyelmet, mivel természetesebb környezetet biztosítanak a sejtek növekedéséhez és differenciálódásához, mint a szintetikus állványokhoz. Ezenkívül az ECM összetevői általában konzerváltak a fajok között, és még a xenogén recipiensek is jól tolerálják őket. A keratociták nélkülözhetetlenek a szaruhártya-sztróma átalakításához és a normál hámfiziológiához. Ez rávilágít a sejtpótló átültetésének fontosságára a strukturális támasztékkal (acelluláris ECM) együtt a szaruhártya homeosztázisának e kritikus funkcióinak betöltéséhez. A kutatók legjobb tudása szerint a decelluláris szaruhártya állványok újratelepítésére tett kísérletek során szaruhártyasejteket használtak, de ezeknek a sejteknek vannak jelentős hátrányai, amelyek kizárják autológ felhasználásukat a klinikai gyakorlatban (a donorszövet károsodása, sejthiány és nem hatékony sejtszubkultúrák), így az autológ sejtek extraokuláris forrásának megtalálására irányuló erőfeszítések. A kutatók nemrégiben végzett tanulmánya kimutatta az emberi decelluláris szaruhártya stromalemezek (100 µm vastagság) tökéletes biointegrációját a nyúl szaruhártya belsejében h-ADASC kolonizációval és anélkül, anélkül, hogy bármilyen kilökődési reakciót észleltek volna annak ellenére, hogy a graft xenogén. A kutatók azt is kimutatták, hogy a h-ADASC-k funkcionális keratocitákká differenciálódtak ezekben az implantátumokban in vivo, amelyek azután elérték a megfelelő biofunkcionalizálást. A kutató véleménye szerint az őssejtek átültetése a decelluláris cornea ECM-mel együtt a legjobb technika a beteg emberi szaruhártya vastagságának hatékony helyreállítására, mint például a keratoconus esetében. Ezzel a technikával és a betegekből származó extraocularis mesenchymális őssejtek felhasználásával lehetséges az allergén graftok funkcionális autológ graftokká alakítani, elméletileg elkerülve a kilökődés kockázatát.

A folyamat menete a következőképpen definiálható: (1) a fájlvizsgálat: amely a páciens aktájának átvételével kezdődik, az aktát a kijelölt orvosi koordinátorokhoz továbbítják áttekintésre és az orvosi jelentés benyújtására, majd az orvosi jelentés értékelésére a sejtterápiás bizottságot és a pácienst klinikai kivizsgálásra kérik, majd a konzultációt követően a betegnek orvosi döntést hozó válasz érkezik jóváhagyással vagy nem felvétellel, és ha igen, akkor rövid jelentést nyújtanak be az eljárásról és ismertetik. részletesen a betegnek, beleegyező nyilatkozatot kell aláírni, ha a beteg beleegyezik a vizsgálatba, (2) a betegfelvétel: amely kezdődhet az eljárási lapok kitöltésével és a műtét előtti értékeléssel (kezdeti kidolgozás) C.A.S klinikai és biológiai értékeléseként definiálható, amely magában foglalhatja a látásélességet, fénytörést, réslámpás vizsgálatot, intraokuláris nyomást, szemfenéki vizsgálatot, szaruhártya topográfiát, aberrometriát, endoteliális sejtszámot (spekuláris mikroszkópos vizsgálatot), valamint vérvizsgálatokat a C.A.S. szemész, majd a bőr alatti zsírszövet lipoaspirációja plasztikai sebész által, majd mintafeldolgozás cGMP létesítményben az ADAS-szal dúsított stromális vaszkuláris frakció izolálására és jellemzésére, valamint laminák előkészítése (a minőség-ellenőrzés értékelése az eljárás minden lépése előtt és után valósult meg az ADAS gyűjtéstől a transzplantációig, beleértve a sejttenyésztést, a sejtnyugalmat, a humán szaruhártya lamina decellularizációját, a laminák ADAS-szal történő újracellulizációját és a transzplantációt; az értékelés magában foglalja a sejt életképességét, sejtszámát, sejt apoptózisát, immunfenotipizálást, fertőzést, gyulladást az ADAS-ból szekretált citokinek elemzésével, lamina levágást, lamina vastagságot, immunfestést, konfokális mikroszkópot stb.); (3) a szülés (transzplantáció), amely peribulbar vagy retrobulbar érzéstelenítéssel kezdődik, ahol a beteget műtőmikroszkóp alá helyezik, majd femtoszekundumos lézerrel segített stroma középső lamelláris disszekció következik, majd az ADAS vagy a laminák vagy a recelluláris laminák kerülnek a zsebben, végül egy kiváló bemetszéssel zárható. A pácienst meghatározott ideig antibiotikum/szteroid kezelés alá helyezik, majd a csapat követi 1 hét, 2 hét, 1 hónap, 3 hónap, 6 hónap és 1 év múlva.

Ezt a sejtterápiás protokollt kizárólag a Laser Vision (Hazmieh-Libanon) alkalmazzák, és a Reviva Regenerative Medicine Centerben készítik el a VISSUM (Alicante-Spanyolország) és az Optica General (Saida-Libanon) partnerségében.

A páciens toborzása: lipoaspiráció, feldolgozás, cellurizált laminák elkészítése és minőség-ellenőrzési vizsgálata a Közel-Kelet Egészségügyi Intézetében a Reviva Központban (Bsalim-Libanon) a kórház és a Reviva Center előírásai szerint történik; injekcióhoz, lézeres látásnál (Hazmieh-Libanon); nyomon követésre pedig a Laser vision & optica generalnál. Mindezeket a lépéseket a VISSUM (Prof. J. ALIO).