Autolog fetthärledd vuxen stamcellstransplantation för hornhinnesjukdomar (A-ADAS-CT-CD)

Olika typer av stamceller har använts på olika sätt i flera forskningsprojekt för att hitta den optimala proceduren för att regenerera det mänskliga hornhinnans stroma. Det inkluderade flera tillvägagångssätt som kan klassificeras som intrastromal implantation av stamceller (1) enbart, (2) tillsammans med en biologiskt nedbrytbar ställning, (3) med en icke-biologiskt nedbrytbar ställning, eller (4) med en decellulariserad hornhinnestromal ställning. I själva verket har den komplexa strukturen av hornhinnans stroma ännu inte replikerats, och det finns välkända nackdelar med användningen av syntetiska ställningsbaserade konstruktioner. Nyligen har flera hornhinnedecellulariseringstekniker beskrivits, vilka tillhandahåller en acellulär hornhinne extracellulär matris (ECM). Dessa byggnadsställningar har fått uppmärksamhet under de senaste åren eftersom de ger en mer naturlig miljö för tillväxt och differentiering av celler jämfört med syntetiska ställningar. Dessutom är komponenter i ECM i allmänhet konserverade bland arter och tolereras väl även av xenogena mottagare. Keratocyter är väsentliga för ombyggnad av hornhinnans stroma och för normal epitelfysiologi. Detta understryker vikten av att transplantera ett cellulärt substitut tillsammans med det strukturella stödet (acellulär ECM) för att utföra dessa kritiska funktioner i hornhinnehomeostas. Så vitt utredarna vet har alla försök att återbefolka decellulariserade hornhinnans ställningar använt hornhinneceller, men dessa celler har stora nackdelar som utesluter deras autologa användning i klinisk praxis (skada på donatorvävnaden, brist på celler och ineffektiva cellsubkulturer). således ansträngningarna att hitta en extraokulär källa för autologa celler. En nyligen genomförd studie av utredarna har visat en perfekt biointegration av mänskliga decellulariserade hornhinnans stromala ark (100 µm tjocklek) med och utan h-ADASC-kolonisering inuti kaninhornhinnan in vivo, utan att observera något avstötningssvar trots att transplantatet är xenogent. Utredarna visade också differentieringen av h-ADASC till funktionella keratocyter inuti dessa implantat in vivo, som sedan uppnådde sin korrekta biofunktionalisering. Enligt utredarens åsikt skulle transplantation av stamceller tillsammans med decellulariserad corneal ECM vara den bästa tekniken för att effektivt återställa tjockleken på en sjuk mänsklig hornhinna, som i keratokonus. Genom denna teknik, och med hjälp av extraokulära mesenkymala stamceller från patienter, är det möjligt att omvandla allergiframkallande transplantat till funktionella autologa transplantat, vilket teoretiskt undviker risken för avstötning.

Processflödet definieras som följande: (1) filstudien: som börjar med att ta emot patientjournalen, filen kommer att vidarebefordras till utsedda läkarkoordinatorer för granskning och inlämning av medicinsk rapport, sedan kommer den medicinska rapporten att utvärderas inom cellterapikommittén och patienten kommer att tillfrågas för klinisk undersökning, och efter samråd kommer ett svar till patienten med medicinskt beslut att följa med ett godkännande eller att inte rekryteras och om ja, en kort rapport om ingreppet kommer att lämnas och förklaras i detalj till patienten, ett samtyckesformulär måste undertecknas om patienten samtycker till att inkluderas i studien, (2) patientinläggningen: vilket kan börja med att fylla i procedurformulären och göra den preoperativa utvärderingen (första arbetet definieras som en klinisk och biologisk bedömning på C.A.S som kan inkludera utan hjälp och bästa glasögonkorrigerade synskärpa, refraktion, spaltlampsundersökning, intraokulärt tryck, fundoskopi, hornhinnetopografi, aberrometri, endotelcellantal (spekulär mikroskopi) samt blodprover) en ögonläkare, följt av lipoaspiration av den subkutana fettvävnaden som ska utföras av en plastikkirurg, sedan provbearbetning vid en cGMP-anläggning för isolering och karakterisering av den stromala vaskulära fraktionen berikad med ADAS samt förberedelser av laminas (kvalitetskontrollbedömningen kommer att vara realiserat före och efter alla steg i proceduren från ADAS-insamling till transplantation inklusive cellodling, cellvila, decellularisering av mänsklig hornhinnas lamina, återcellularisering av laminas med ADAS och transplantation; bedömningen kommer att inkludera cellviabilitet, cellantal, cellapoptos, immunfenotypning, infektion, inflammation genom att analysera de utsöndrade cytokinerna från ADAS, lamina cutting, lamina tjocklek, immunfärgning, konfokalmikroskopi, etc.); (3) förlossningen (transplantationen) som startar med en peribulbar eller retrobulbar anestesi där patienten placeras under operationsmikroskop, följt av en femtosekund laserassisterad midstromal lamellär dissektion, därefter kommer ADAS eller laminas eller recellulariserade laminas att placeras inom ficka och slutligen stängd med en överlägsen snittförslutning. Patienten kommer att sättas under antibiotika/steroider under en bestämd period och följs av teamet efter 1 vecka, 2 veckor, 1 månad, 3 månader, 6 månader och 1 år.

Detta protokoll för cellterapi kommer att tillämpas uteslutande på Laser Vision (Hazmieh-Libanon) och utarbetas vid Reviva Regenerative Medicine Center i anslutning till VISSUM (Alicante-Spanien) och Optica General (Saida-Libanon).

Patientens rekrytering kommer att äga rum: för lipoaspiration, bearbetning, förberedelse av celluriserade laminat och kvalitetskontrollbedömningar, vid Middle East Institute of Health Reviva Center (Bsalim-Libanon) enligt bestämmelserna för sjukhuset och Reviva Center; för injektion, vid laserseende (Hazmieh-Libanon); och för uppföljning, på Laser vision & optica general. Alla dessa steg hanteras av VISSUM (Prof. J. ALIO).