Аутологичная трансплантация взрослых стволовых клеток, полученных из жировой ткани, при заболеваниях роговицы (A-ADAS-CT-CD)

Различные типы стволовых клеток по-разному использовались в нескольких исследовательских проектах, чтобы найти оптимальную процедуру регенерации стромы роговицы человека. Он включал несколько подходов, которые можно классифицировать как интрастромальную имплантацию стволовых клеток (1) отдельно, (2) вместе с биоразлагаемым каркасом, (3) с небиоразлагаемым каркасом или (4) с децеллюляризованным стромальным каркасом роговицы. Фактически, сложная структура стромы роговицы еще не воспроизведена, и существуют хорошо известные недостатки использования конструкций на основе синтетических каркасов. Недавно было описано несколько методов децеллюляризации роговицы, которые обеспечивают бесклеточный внеклеточный матрикс роговицы (ECM). Эти каркасы привлекли внимание в последние несколько лет, поскольку они обеспечивают более естественную среду для роста и дифференцировки клеток по сравнению с синтетическими каркасами. Кроме того, компоненты ECM, как правило, сохраняются среди видов и хорошо переносятся даже ксеногенными реципиентами. Кератоциты необходимы для ремоделирования стромы роговицы и для нормальной физиологии эпителия. Это подчеркивает важность трансплантации клеточного заменителя вместе со структурной поддержкой (бесклеточный ВКМ) для выполнения этих критических функций в гомеостазе роговицы. Насколько известно исследователям, во всех попытках репопуляции децеллюляризованных каркасов роговицы использовались клетки роговицы, но эти клетки имеют серьезные недостатки, препятствующие их аутологичному использованию в клинической практике (повреждение донорской ткани, отсутствие клеток и неэффективные клеточные субкультуры). таким образом, усилия найти экстраокулярный источник аутологичных клеток. Недавнее исследование, проведенное исследователями, показало идеальную биоинтеграцию децеллюляризованных стромальных листов роговицы человека (толщиной 100 мкм) с колонизацией h-ADASC и без нее внутри роговицы кролика in vivo, без наблюдения какой-либо реакции отторжения, несмотря на то, что трансплантат является ксеногенным. Исследователи также продемонстрировали дифференцировку h-ADASC в функциональные кератоциты внутри этих имплантатов in vivo, которые затем достигли своей надлежащей биофункционализации. По мнению исследователей, трансплантация стволовых клеток вместе с децеллюляризированным ВКМ роговицы была бы лучшим методом эффективного восстановления толщины больной роговицы человека, как при кератоконусе. Благодаря этому методу и использованию экстраокулярных мезенхимальных стволовых клеток пациентов можно трансформировать аллергенные трансплантаты в функциональные аутологичные трансплантаты, теоретически избегая риска отторжения.

Поток процесса определяется следующим образом: (1) изучение файла: которое начинается с получения файла пациента, файл будет отправлен назначенным врачам-координаторам для рассмотрения и представления медицинского отчета, затем медицинский отчет будет оценен в течение комитет по клеточной терапии и пациенту будет предложено пройти клиническое обследование, и после консультации последует ответ пациенту с медицинским решением с одобрением или отказом от набора, и если да, будет представлен и объяснен краткий отчет о процедуре. подробно сообщается пациенту, форма согласия должна быть подписана, если пациент согласен быть включенным в исследование, (2) госпитализация пациента: которая может начаться с заполнения форм процедуры и проведения предоперационной оценки (первоначальная обработка определяется как клиническая и биологическая оценка при CAS, которая может включать в себя остроту зрения без посторонней помощи и с наилучшей коррекцией очков, рефракцию, исследование с помощью щелевой лампы, внутриглазное давление, глазное дно, топографию роговицы, аберрометрию, количество эндотелиальных клеток (зеркальная микроскопия), а также анализы крови) офтальмолог, после чего пластическим хирургом будет проведена липоаспирация подкожной жировой ткани, затем обработка образцов в центре cGMP для выделения и характеристики стромально-сосудистой фракции, обогащенной ADAS, а также подготовка пластинок (оценка контроля качества будет реализованы до и после всех этапов процедуры, начиная от сбора ADAS до трансплантации, включая культивирование клеток, покой клеток, децеллюляризацию пластинки роговицы человека, рецеллюляризацию пластинок с помощью ADAS и трансплантацию; оценка будет включать жизнеспособность клеток, количество клеток, клеточный апоптоз, иммунофенотипирование, инфекцию, воспаление путем анализа секретируемых цитокинов из ADAS, разрезание пластинок, толщину пластинок, иммуноокрашивание, конфокальную микроскопию и т. д.); (3) родоразрешение (трансплантация), которое начинается с перибульбарной или ретробульбарной анестезии, когда пациента помещают под операционный микроскоп, за которым следует фемтосекундная лазерная диссекция срединной стромальной пластинки, затем ADAS или пластинки или рецеллюляризированные пластинки будут помещены в пределах карман, и, наконец, закрыт верхней крышкой разреза. Пациенту будут назначены антибиотики/стероиды на определенный период, а затем команда будет наблюдать за ним через 1 неделю, 2 недели, 1 месяц, 3 месяца, 6 месяцев и 1 год.

Этот протокол клеточной терапии будет применяться исключительно в Laser Vision (Hazmieh-Ливан) и подготовлен в Центре регенеративной медицины Reviva совместно с VISSUM (Аликанте-Испания) и Optica General (Сайда-Ливан).

Набор пациентов будет проходить: для липоаспирации, обработки, подготовки целлюлярных пластинок и оценки контроля качества в Центре Reviva Ближневосточного института здравоохранения (Бсалим-Ливан) в соответствии с правилами больницы и Центра Reviva; для инъекций, в Laservision (Hazmieh-Lebanon); и для последующего наблюдения в Laservision & optica general. Все эти этапы управляются VISSUM (проф. Дж. АЛИО).