Autologinen rasvaperäinen aikuisen kantasolusiirto sarveiskalvon sairauksiin (A-ADAS-CT-CD)

Erityyppisiä kantasoluja on käytetty eri tavoin useissa tutkimusprojekteissa optimaalisen menetelmän löytämiseksi ihmisen sarveiskalvon strooman regeneroimiseksi. Se sisälsi useita lähestymistapoja, jotka voidaan luokitella kantasolujen intrastromaaliseen implantointiin (1) yksin, (2) yhdessä biologisesti hajoavan tukikehyksen kanssa, (3) ei-biohajoavan tukikehyksen kanssa tai (4) soluista poistetun sarveiskalvon stroomarakenteen kanssa. Itse asiassa sarveiskalvon strooman monimutkaista rakennetta ei ole vielä kopioitu, ja synteettisiin rakennustelinepohjaisten mallien käytöllä on hyvin tunnettuja haittoja. Viime aikoina on kuvattu useita sarveiskalvon solunpoistotekniikoita, jotka tarjoavat soluttoman sarveiskalvon ekstrasellulaarisen matriisin (ECM). Nämä telineet ovat saaneet huomiota viime vuosina, koska ne tarjoavat luonnollisemman ympäristön solujen kasvulle ja erilaistumiselle verrattuna synteettisiin telineisiin. Lisäksi ECM:n komponentit ovat yleensä säilyneitä lajien keskuudessa, ja jopa ksenogeeniset vastaanottajat sietävät niitä hyvin. Keratosyytit ovat välttämättömiä sarveiskalvon strooman uudelleenmuodostumiselle ja normaalille epiteelin fysiologialle. Tämä korostaa solun korvikkeen siirtämisen tärkeyttä yhdessä rakenteellisen tuen (asellulaarisen ECM) kanssa näiden kriittisten toimintojen suorittamiseksi sarveiskalvon homeostaasissa. Tutkijoiden parhaan tietämyksen mukaan kaikissa yrityksissä sarveiskalvon solujen uudelleenpopuloimiseksi on käytetty sarveiskalvon soluja, mutta näillä soluilla on suuria haittoja, jotka estävät niiden autologisen käytön kliinisessä käytännössä (luovuttajakudoksen vaurioituminen, solujen puute ja tehottomat solualaviljelmät), näin ollen pyrkimykset löytää autologisten solujen silmänulkoinen lähde. Tutkijoiden äskettäinen tutkimus on osoittanut ihmisen soluttomien sarveiskalvon stroomalevyjen (100 µm paksuus) täydellisen biointegraation h-ADASC-kolonisaatiolla kanin sarveiskalvon sisällä ja ilman sitä in vivo ilman, että havaitaan mitään hyljintävastetta, vaikka siirre on ksenogeeninen. Tutkijat osoittivat myös h-ADASC:iden erilaistumisen toiminnallisiksi keratosyyteiksi näiden implanttien sisällä in vivo, jotka sitten saavuttivat oikean biofunktionalisoinnin. Tutkijan näkemyksen mukaan kantasolujen siirto yhdessä desellularisoidun sarveiskalvon ECM:n kanssa olisi paras tekniikka sairaan ihmisen sarveiskalvon paksuuden palauttamiseksi tehokkaasti, kuten keratoconuksessa. Tämän tekniikan avulla ja käyttämällä potilaiden ekstraokulaarisia mesenkymaalisia kantasoluja on mahdollista muuttaa allergeeniset siirteet toiminnallisiksi autologisiksi siirteiksi, jolloin teoriassa vältetään hylkimisriski.

Prosessin kulku määritellään seuraavasti: (1) tiedostotutkimus: joka alkaa vastaanottamalla potilastiedosto, tiedosto välitetään nimetyille lääkäreiden koordinaattoreille tarkistettavaksi ja lääkärinlausunnon toimittamista varten, jonka jälkeen lääketieteellinen raportti arvioidaan soluterapiatoimikuntaa ja potilasta pyydetään kliiniseen tutkimukseen, ja kuulemisen jälkeen potilaalle lähetetään vastaus lääketieteellisellä päätöksellä, jossa hyväksytään tai ei rekrytoida, ja jos kyllä, toimitetaan lyhyt raportti toimenpiteestä ja selitetään yksityiskohtaisesti potilaalle, suostumuslomake on allekirjoitettava, jos potilas suostuu tutkimukseen, (2) potilasvastaanotto: joka voi alkaa täyttämällä toimenpidelomakkeita ja tekemällä pre-op-arviointi (alkutyöstö). määritellään C.A.S:n kliiniseksi ja biologiseksi arvioinniksi, joka voi sisältää ilman apua ja parhaan silmälasikorjatun näöntarkkuuden, refraktion, rakolampun tutkimuksen, silmänpaineen, fundoskopian, sarveiskalvon topografian, aberrometrian, endoteelisolujen määrän (spekulaarimikroskopia) sekä verikokeet silmälääkäri, jonka jälkeen plastiikkakirurgin suorittaa ihonalaisen rasvakudoksen lipoaspiraatio, sitten näytteen käsittely cGMP-laitoksessa ADAS:lla rikastetun stroman verisuonifraktion eristämiseksi ja karakterisoimiseksi sekä laminaattien valmistelu (laadunvalvontaarviointi on toteutettu ennen ja jälkeen kaikki toimenpiteen vaiheet ADAS-keräyksestä siirtoon, mukaan lukien soluviljelmä, solun levottomuus, ihmisen sarveiskalvon solujen poisto, laminoiden uudelleensellularointi ADAS:lla ja transplantaatio; arviointi sisältää solujen elinkelpoisuuden, solujen lukumäärän, solujen apoptoosin, immunofenotyypin määrityksen, infektion, tulehduksen analysoimalla ADAS:sta erittyneitä sytokiineja, kalvon leikkaamisen, kalvon paksuuden, immunovärjäyksen, konfokaalimikroskopian jne.); (3) synnytys (transplantaatio), joka alkaa peribulbaarisella tai retrobulbaarisella anestesialla, jossa potilas asetetaan leikkausmikroskoopin alle, jonka jälkeen suoritetaan femtosekunnin laseravusteinen stroomalamellilevyn dissektio, minkä jälkeen ADAS tai laminaat tai solukalvot asetetaan tasku, ja lopuksi suljetaan erinomaisella viillolla. Potilaalle annetaan antibiootti/steroidi määrätyksi ajaksi, ja ryhmä seuraa häntä 1 viikon, 2 viikon, 1 kuukauden, 3 kuukauden, 6 kuukauden ja 1 vuoden kuluttua.

Tätä soluterapiaprotokollaa sovelletaan yksinomaan Laser Visionissa (Hazmieh-Libanon) ja se valmistetaan Reviva Regenerative Medicine Centerissä, joka on sidoksissa VISSUMiin (Alicante-Espanja) ja Optica Generaliin (Saida-Libanon).

Potilaan rekrytointi tapahtuu: lipoaspiraatiota, prosessointia, selluroitujen laminaattien valmistelua ja laadunvalvontaarviointia varten Lähi-idän terveysinstituutissa Reviva Centerissä (Bsalim-Libanon) sairaalan ja Reviva Centerin määräysten mukaisesti; injektiota varten Lasernäkö (Hazmieh-Libanon); ja seurantaa varten Laser vision & optica generalissa. Kaikkia näitä vaiheita hallinnoi VISSUM (Prof. J. ALIO).