Transplantation von autologen adipösen adulten Stammzellen bei Hornhauterkrankungen (A-ADAS-CT-CD)

Verschiedene Arten von Stammzellen wurden in mehreren Forschungsprojekten auf unterschiedliche Weise eingesetzt, um das optimale Verfahren zur Regeneration des menschlichen Hornhautstromas zu finden. Es umfasste mehrere Ansätze, die als intrastromale Implantation von Stammzellen (1) allein, (2) zusammen mit einem biologisch abbaubaren Gerüst, (3) mit einem nicht biologisch abbaubaren Gerüst oder (4) mit einem dezellularisierten Hornhautstroma-Gerüst klassifiziert werden können. Tatsächlich wurde die komplexe Struktur des Hornhautstromas noch nicht repliziert, und es gibt wohlbekannte Nachteile bei der Verwendung von Konstruktionen auf der Basis von synthetischen Gerüsten. Kürzlich wurden mehrere Hornhautdezellularisierungstechniken beschrieben, die eine azelluläre extrazelluläre Hornhautmatrix (ECM) bereitstellen. Diese Gerüste haben in den letzten Jahren an Aufmerksamkeit gewonnen, da sie im Vergleich zu synthetischen Gerüsten eine natürlichere Umgebung für das Wachstum und die Differenzierung von Zellen bieten. Darüber hinaus sind Komponenten der ECM im Allgemeinen artübergreifend konserviert und werden sogar von xenogenen Empfängern gut vertragen. Keratozyten sind für die Umgestaltung des Hornhautstromas und für die normale Epithelphysiologie unerlässlich. Dies unterstreicht die Bedeutung der Transplantation eines zellulären Ersatzes zusammen mit der strukturellen Unterstützung (azelluläre ECM), um diese kritischen Funktionen in der Homöostase der Hornhaut zu übernehmen. Nach bestem Wissen der Forscher wurden bei allen Versuchen, dezellularisierte Hornhautgerüste zu repopulieren, Hornhautzellen verwendet, aber diese Zellen haben große Nachteile, die ihre autologe Verwendung in der klinischen Praxis ausschließen (Schädigung des Spendergewebes, Mangel an Zellen und ineffiziente Zellsubkulturen). daher die Bemühungen, eine extraokulare Quelle für autologe Zellen zu finden. Eine kürzlich von den Forschern durchgeführte Studie hat eine perfekte Biointegration menschlicher dezellularisierter Hornhautstromaschichten (100 µm Dicke) mit und ohne h-ADASC-Kolonisierung in der Kaninchenhornhaut in vivo gezeigt, ohne dass eine Abstoßungsreaktion beobachtet wurde, obwohl das Transplantat xenogen ist. Die Forscher demonstrierten auch die Differenzierung von h-ADASCs in funktionelle Keratozyten innerhalb dieser Implantate in vivo, die dann ihre richtige Biofunktionalisierung erreichten. Nach Ansicht des Forschers wäre die Transplantation von Stammzellen zusammen mit dezellularisierter Hornhaut-ECM die beste Technik, um die Dicke einer erkrankten menschlichen Hornhaut wie bei Keratokonus effektiv wiederherzustellen. Durch diese Technik und die Verwendung von extraokularen mesenchymalen Stammzellen von Patienten ist es möglich, allergene Transplantate in funktionelle autologe Transplantate umzuwandeln, wobei theoretisch das Risiko einer Abstoßung vermieden wird.

Der Prozessablauf ist wie folgt definiert: (1) Aktenprüfung: Beginnend mit Erhalt der Akte des Patienten, wird die Akte zur Überprüfung und Einreichung des medizinischen Berichts an die bestellten Arztkoordinatoren weitergeleitet, anschließend wird der medizinische Bericht ausgewertet Das Zelltherapie-Komitee und der Patient werden zur klinischen Untersuchung aufgefordert, und nach Rücksprache folgt eine Antwort an den Patienten mit medizinischer Entscheidung mit Zustimmung oder Nichtrekrutierung, und wenn ja, wird ein kurzer Bericht über das Verfahren vorgelegt und erläutert im Detail an den Patienten, eine Einverständniserklärung muss unterzeichnet werden, wenn der Patient einverstanden ist, in die Studie aufgenommen zu werden, (2) die Patientenaufnahme: die mit dem Ausfüllen der Verfahrensformulare und der Durchführung der präoperativen Bewertung (Erstaufarbeitung) beginnen kann definiert als eine klinische und biologische Beurteilung nach C.A.S, die die Sehschärfe ohne Hilfsmittel und die beste brillenkorrigierte Sehschärfe, Refraktion, Spaltlampenuntersuchung, Augeninnendruck, Fundoskopie, Hornhauttopographie, Aberrometrie, Endothelzellzahl (Spiegelmikroskopie) sowie Blutuntersuchungen umfassen kann). einem Augenarzt, gefolgt von einer Lipoaspiration des subkutanen Fettgewebes, die von einem plastischen Chirurgen durchgeführt wird, dann einer Probenverarbeitung in einer cGMP-Einrichtung zur Isolierung und Charakterisierung der mit ADAS angereicherten Stroma-Gefäßfraktion sowie zur Vorbereitung der Laminas (die Qualitätskontrollbewertung wird sein vor und nach allen Schritten des Verfahrens von der ADAS-Sammlung bis zur Transplantation durchgeführt, einschließlich Zellkultur, Zellruhe, Dezellularisierung der menschlichen Hornhautschicht, Rezellularisierung der Lamina mit ADAS und Transplantation; die Bewertung umfasst Zelllebensfähigkeit, Zellzahl, Zellapoptose, Immunphänotypisierung, Infektion, Entzündung durch Analyse der sezernierten Zytokine von ADAS, Laminaschnitt, Laminadicke, Immunfärbung, konfokale Mikroskopie usw.); (3) die Entbindung (Transplantation), die mit einer peribulbären oder retrobulbären Anästhesie beginnt, bei der der Patient unter ein Operationsmikroskop gelegt wird, gefolgt von einer Femtosekundenlaser-unterstützten Mittelstroma-Lamellen-Dissektion, dann werden die ADAS oder Laminas oder rezellularisierten Laminas innerhalb des platziert Tasche, und schließlich durch einen oberen Einschnittverschluss verschlossen. Der Patient wird für einen definierten Zeitraum mit Antibiotika/Steroiden behandelt und vom Team nach 1 Woche, 2 Wochen, 1 Monat, 3 Monaten, 6 Monaten und 1 Jahr weiterverfolgt.

Dieses Protokoll der Zelltherapie wird ausschließlich bei Laser Vision (Hazmieh-Libanon) angewendet und im Reviva Regenerative Medicine Center in Zusammenarbeit mit VISSUM (Alicante-Spanien) und Optica General (Saida-Libanon) erstellt.

Die Rekrutierung des Patienten erfolgt: für die Lipoaspiration, Verarbeitung, Vorbereitung der zellurierten Laminas und Qualitätskontrollbewertungen am Middle East Institute of Health, dem Reviva Center (Bsalim-Libanon) unter den Vorschriften des Krankenhauses und des Reviva Centers; zur Injektion bei Laser Vision (Hazmieh-Libanon); und für Follow-up, bei Laser vision & optica general. All diese Schritte werden von VISSUM (Prof. J. ALIO).