A kávé és kakaó bioaktív vegyületek biológiai hozzáférhetősége és előnyös tulajdonságai (P4L)

A fent leírt célok elérése érdekében humán biológiai hozzáférhetőségi vizsgálatot végeznek. A humán beavatkozási vizsgálat egy rövid távú, randomizált keresztezett vizsgálatból áll, amelynek célja az egyes kávé/kakaóból származó keringő metabolitok (CCDCM) napi átlagos koncentrációjának mérése a kávé/kakaó fitokemikáliák négy fő csoportjában (metilxantinok, trigonellin). , fenolok, diterpének). A különböző fogyasztási minták alapján ez a szabadon élő tanulmány (bár két nappal a mintavételi időpontok előtt bizonyos minimális étkezési korlátozásokat fog biztosítani) figyelembe veszi az ismételt adagok hatását a kávé/kakaó bioaktív anyagok biológiai hozzáférhetőségére.

A vizsgálat ismételt adagolású, 3 karból álló, keresztezett elrendezést követ. Ezt a kialakítást az ILSI diétás termékekkel végzett beavatkozási kísérletekre vonatkozó irányelveinek megfelelően választották ki.

Az alanyok a következő kezeléseket kapták véletlenszerű sorrendben 1 hónapig:

1. 1 csésze eszpresszó kávé/nap ("alacsony fogyasztók") reggel 9.00-kor.
2. 3 csésze eszpresszó kávé naponta ("nagy fogyasztók") reggel 9.00-kor, 12.00-kor délben és 15.00-kor.
3. 1 csésze eszpresszó kávé reggelinél 9:00 és 2 kávét tartalmazó kakaó alapú termék naponta kétszer (12:00-kor és 15:00-kor). A csoport a "közepes fogyasztók" nevet kapja, tekintettel a kávét tartalmazó kakaó alapú termékek koffeintartalmára.

Minden mintavételi napot megelőző két napra és a mintavételi napon minimális ajánlásokat adunk a kijelölt kezelésen kívüli egyéb kávé/kakaó fitokemikáliák elkerülésére, valamint a kávéfogyasztás időpontjának egységesítésére. A vacsora időpontját és összetételét is szabványosítják a mintavételi napot megelőző napon. Éjszaka csak vizet lehetett inni. A mintavétel napján (azaz az egyes beavatkozási időszakok utolsó napján) az alanyok reggel az ambuláns kórházba utalnak, ahol éhgyomri vér- és vizeletmintákat vesznek. Ezután a kis- és nagyfogyasztók rendre egy vagy három csésze eszpresszókávét isznak (az első kávéhoz cukor, édesítőszerek és tej nélkül, az utolsó két kávéhoz 5 g cukorral), míg a közepes fogyasztók egy csésze kávét. espresso kávé és 2 kakaó alapú kávét tartalmazó termék a nap folyamán kétszer, a fent leírt időzítést követve. Az első kávé elfogyasztása és a fitokemikális mentes reggeli (tészta) után a következő 24 órában meghatározott időpontokban vér- és vizeletmintákat vesznek. Öt órával az első kávé elfogyasztása után a résztvevők szabványos vegyes étkezést kapnak (sonkás-sajtos szendvics), amely mentes a kávé/kakaó fitokémiai összetevőitől. Víz ad libitum lesz elérhető. Huszonnégy órával a kezelés után vér- és vizeletmintákat is vesznek, hogy értékeljék a kiindulási állapothoz való visszatérést. Ezenkívül megmérik az antropometriai jellemzőket és a vérnyomást (BP).

A társadalmi-demográfiai változókat a felvételkor kitöltött általános kérdőív segítségével értékelik. A kérdőív a lehetséges kizárási kritériumok azonosításához hasznos kérdéseket is tartalmaz (pl. betegségek diagnosztizálása, rendszeres gyógyszerfogyasztás, ételallergia). A beiratkozás során az önkéntesek étkezési szokásait is értékelni fogják egy félkvantitatív táplálékgyakorisági kérdőív (FFQ) segítségével az étrend teljes antioxidáns kapacitásának felmérésére. Ezen túlmenően a résztvevők táplálékfelvételét és a vizsgálati követelményeknek való megfelelését háromnapos étrendi feljegyzések segítségével értékelik, amelyeket az egyes beavatkozási időszakokban két időpontban adnak be: i) minden beavatkozási időszak közepén két hétköznap és egy hétvégén. napon, és ii. az egyes beavatkozási időszakok végén, 2 nappal a mintavételi nap és a mintavételi nap előtt. Az egyes résztvevők szokásos fizikai aktivitási szintjét validált nemzetközi fizikai aktivitási kérdőíveken keresztül mérik.

A vérmintavétel az Orvos- és Sebészeti Klinika ambuláns osztályán történik. A vérvételt orvos végzi. Egy vénás katétert helyeznek be az antecubitalis vénába, és minden egyes alanytól vérmintát vesznek meghatározott csövekbe 24 órán keresztül. Az első kávéfogyasztás után 24 órával a vérmintavétel vénapunkcióval történik. A vizeletmintákat különböző időszakokban gyűjtik vizeletgyűjtők segítségével.

A vérmintákat centrifugálják, a plazmát, a szérumot és a perifériás vér mononukleáris sejtjeit (PBMC) összegyűjtik, aliquot részekre osztják, és -80 °C-on tárolják további feldolgozás céljából. A vizeletmintákat aliquot részekre osztják és -80 °C-on tárolják további feldolgozás céljából.

A vizsgálat elsődleges kiválasztott végpontja a kávéból származó plazmában keringő fenolos metabolitok napi átlagos koncentrációjának számszerűsítése, míg az egyéb kávéból származó keringő bioaktív anyagok biohasznosulásának, a kakaóból származó keringő fitokemikáliák biohasznosulásának vizsgálata, valamint az értékelés. a kardiometabolikus markerek másodlagos végpontjának tekintendők.