Biotillgänglighet och fördelaktiga egenskaper hos kaffe och kakao bioaktiva föreningar (P4L)

En human biotillgänglighetsstudie kommer att genomföras för att uppnå de ovan beskrivna målen. Den mänskliga interventionsstudien kommer att bestå av en kortsiktig randomiserad cross-over-studie, inriktad på att mäta de dagliga medelkoncentrationerna av varje kaffe/kakao-härledd cirkulerande metabolit (CCDCM) för de fyra huvudgrupperna av kaffe/kakaofytokemikalier (metylxantiner, trigonellin) fenoler, diterpener). På grundval av olika konsumtionsmönster kommer denna frilevande studie (även om vissa minimala kostrestriktioner kommer att tillhandahållas två dagar före provtagningstider) också ta hänsyn till effekterna av upprepade doser på biotillgängligheten av kaffe/kakao bioaktiva ämnen.

Studien kommer att följa en upprepad dos, 3-arm, cross-over design. Denna design har valts enligt ILSI:s riktlinjer för interventionsförsök med kostprodukter.

Försökspersonerna tilldelades att konsumera följande behandlingar i slumpmässig ordning under 1 månad:

1. 1 kopp espressokaffe/dag ("lågkonsumenter") kl. 9.00
2. 3 koppar espressokaffe/dag ("högkonsumenter") kl. 9.00, 12.00 på eftermiddagen och 15.00.
3. 1 kopp espressokaffe till frukost kl. 9.00 och 2 kakaobaserade produkter som innehåller kaffe två gånger om dagen (kl. 12.00 och 15.00). Gruppen kommer att heta "medelkonsumenter", med tanke på koffeinhalten i de kakaobaserade produkterna som innehåller kaffe.

Minimala rekommendationer för att undvika andra källor till kaffe-/kakaofytokemikalier utöver det som introduceras genom den tilldelade behandlingen, och för att standardisera tidpunkten för kaffekonsumtion, kommer att ges under de två dagarna före varje provtagningsdag och på provtagningsdagen. Middagens tidpunkt och sammansättning kommer också att standardiseras dagen före provtagningsdagen. Endast vatten fick drickas under natten. Vid provtagningsdagen (dvs. den sista dagen av varje interventionsperiod) kommer försökspersonerna att hänvisa på morgonen till ambulatoriet där fastande baslinjeblod- och urinprover kommer att samlas in. Då kommer låg- och högkonsumenter att dricka en respektive tre koppar espressokaffe (utan socker, sötningsmedel och mjölk för det första kaffet; med 5 g socker för de två sista kaffet), medan medelstora konsumenter dricker en kopp espressokaffe och 2 kakaobaserade produkter som innehåller kaffe två gånger under dagen, enligt ovan beskrivna tidpunkt. Efter intag av det första kaffet tillsammans med en fytokemikaliefri frukost (ett bakverk), kommer blod- och urinprov att samlas in vid utvalda tidpunkter under de följande 24 timmarna. Fem timmar efter konsumtionen av det första kaffet får deltagarna en standardiserad blandad måltid (smörgås med skinka och ost) fri från kaffe/kakao fytokemikalierelaterade föreningar. Vatten kommer att finnas tillgängligt ad libitum. Tjugofyra timmar efter mottagandet av behandlingen kommer även blod- och urinprover att tas för att bedöma återgången till baslinjen. Dessutom kommer antropometriska egenskaper och blodtryck (BP) att mätas.

Sociodemografiska variabler kommer att bedömas genom ett generiskt frågeformulär som fylls i vid rekryteringen. Frågeformuläret kommer också att innehålla frågor som är användbara för att identifiera möjliga uteslutningskriterier (t.ex. diagnos för sjukdomar, regelbunden konsumtion av medicin, matallergi). Volontärers kostvanor kommer också att utvärderas under inskrivningen, genom ett semi-kvantitativt frågeformulär för matfrekvens (FFQ) för bedömning av kostens totala antioxidantkapacitet. Dessutom kommer deltagarnas födointag och överensstämmelse med studiekraven att bedömas med hjälp av 3-dagars dietjournaler, administrerade under varje interventionsperiod vid två tidpunkter: i) i mitten av varje interventionsperiod under två vardagar och en helg dag, och ii) i slutet av varje interventionsperiod, 2 dagar före provtagningsdagen och provtagningsdagen. Den vanliga fysiska aktivitetsnivån för varje deltagare kommer att mätas genom ett validerat internationellt frågeformulär för fysisk aktivitet.

Blodprovtagningen kommer att utföras på den ambulerande enheten vid Institutionen för medicin och kirurgi. Bloduppsamling kommer att utföras av en läkare. En venkateter kommer att föras in i antecubitalvenen och blodprover från varje individ kommer att samlas in i specifika rör under 24 timmar. Blodprovtagning vid tidpunkten 24 timmar efter första kaffekonsumtionen kommer att göras genom venpunktion. Urinprover kommer att samlas in under olika tidsperioder med hjälp av urinuppsamlare.

Blodprover kommer att centrifugeras och plasma, serum och mononukleära celler från perifert blod (PBMC) kommer att samlas in, alikvoteras och lagras vid -80 °C för vidare bearbetning. Urinprover kommer att alikvoteras och förvaras vid -80°C för vidare bearbetning.

Den primärt valda slutpunkten för studien är kvantifieringen av den dagliga medelkoncentrationen av kaffehärledda plasma cirkulerande fenoliska metaboliter, medan studien av biotillgängligheten av andra kaffehärledda cirkulerande bioaktiva ämnen, biotillgängligheten av kakao-härledda cirkulerande fytokemikalier och bedömningen av kardiometabola markörer kommer att betraktas som sekundära effektmått.