Biologische beschikbaarheid en gunstige eigenschappen van bioactieve stoffen in koffie en cacao (P4L)

Er zal een onderzoek naar de biologische beschikbaarheid bij de mens worden uitgevoerd om de hierboven beschreven doelen te bereiken. De menselijke interventiestudie zal bestaan ​​uit een gerandomiseerde cross-over-studie op korte termijn, gericht op het meten van de dagelijkse gemiddelde concentraties van elke van koffie/cacao afgeleide circulerende metaboliet (CCDCM) voor de vier hoofdgroepen van koffie/cacao fytochemicaliën (methylxanthines, trigonelline , fenolen, diterpenen). Op basis van verschillende consumptiepatronen zal deze vrijlevende studie (hoewel enkele minimale dieetbeperkingen twee dagen vóór de bemonsteringstijdstippen worden verstrekt) ook rekening houden met de effecten van herhaalde doses op de biologische beschikbaarheid van bioactieve stoffen in koffie/cacao.

De studie zal een cross-over design met herhaalde doses en 3 armen volgen. Deze opzet is gekozen volgens de richtlijnen van ILSI voor interventieproeven met dieetproducten.

Proefpersonen werden toegewezen om gedurende 1 maand de volgende behandelingen in willekeurige volgorde te gebruiken:

1. 1 kopje espressokoffie/dag ("weinig verbruik") om 9.00 uur
2. 3 kopjes espressokoffie/dag ("grote verbruikers") om 9.00 uur, 12.00 uur en 15.00 uur
3. 1 kopje espresso bij het ontbijt 09.00 uur en 2 producten op basis van cacao met koffie twee keer per dag (om 12.00 uur 's middags en 15.00 uur). De groep zal de naam "medium consumer" krijgen, gezien het cafeïnegehalte van de producten op basis van cacao die koffie bevatten.

Minimale aanbevelingen om andere bronnen van fytochemicaliën van koffie/cacao te vermijden dan die welke via de toegewezen behandeling zijn geïntroduceerd, en om het tijdstip van koffieconsumptie te standaardiseren, zullen worden gegeven voor de twee dagen voorafgaand aan elke bemonsteringsdag en op de bemonsteringsdag. De dag voor de bemonsteringsdag wordt ook het tijdstip en de samenstelling van het diner gestandaardiseerd. Alleen water mocht 's nachts gedronken worden. Op de bemonsteringsdag (d.w.z. de laatste dag van elke interventieperiode) zullen de proefpersonen 's ochtends verwijzen naar de ambulante waar nuchtere bloed- en urinemonsters zullen worden verzameld. Dan drinken kleine en grote consumenten respectievelijk één of drie kopjes espressokoffie (zonder suiker, zoetstoffen en melk voor de eerste koffie; met 5 gram suiker voor de laatste twee koffies), terwijl middelgrote consumenten een kopje koffie drinken. espressokoffie en 2 producten op basis van cacao die koffie bevatten tweemaal per dag, volgens de hierboven beschreven timing. Na inname van de eerste koffie samen met een ontbijt zonder fytochemicaliën (een gebakje), worden bloed- en urinemonsters verzameld op geselecteerde tijdstippen in de volgende 24 uur. Vijf uur na consumptie van de eerste koffie krijgen de deelnemers een gestandaardiseerde gemengde maaltijd (sandwich met ham en kaas) vrij van koffie/cacao fytochemisch-gerelateerde verbindingen. Water zal ad libitum beschikbaar zijn. Vierentwintig uur na ontvangst van de behandeling zullen ook bloed- en urinemonsters worden genomen om de terugkeer naar de uitgangswaarde te beoordelen. Daarnaast worden antropometrische kenmerken en bloeddruk (BP) gemeten.

Sociaal-demografische variabelen zullen worden beoordeeld aan de hand van een generieke vragenlijst die bij de aanwerving wordt ingevuld. De vragenlijst zal ook vragen bevatten die nuttig zijn om mogelijke uitsluitingscriteria te identificeren (bijv. diagnose van ziekten, regelmatige consumptie van medicijnen, voedselallergie). Voedingsgewoonten van vrijwilligers zullen ook worden geëvalueerd tijdens de inschrijving, door middel van een semi-kwantitatieve voedselfrequentievragenlijst (FFQ) voor de beoordeling van de totale antioxidantcapaciteit van de voeding. Bovendien zullen de voedselinname van de deelnemers en de naleving van de studievereisten worden beoordeeld door middel van driedaagse voedingsdossiers, die gedurende elke interventieperiode op twee tijdstippen worden toegediend: i) in het midden van elke interventieperiode gedurende twee weekdagen en een weekend dag, en ii) op ​​het einde van elke interventieperiode, 2 dagen vóór de bemonsteringsdag en de bemonsteringsdag. Het gebruikelijke fysieke activiteitsniveau van elke deelnemer zal worden gemeten door middel van gevalideerde International Physical Activity Questionnaires.

De bloedafname vindt plaats op de ambulante afdeling van de afdeling Geneeskunde en Heelkunde. De bloedafname wordt uitgevoerd door een arts. Er wordt een veneuze katheter in de antecubitale ader ingebracht en gedurende 24 uur worden bloedmonsters van elke proefpersoon in specifieke buizen verzameld. Bloedafname op het tijdstip 24 uur na de eerste koffieconsumptie zal worden gedaan door middel van aderpunctie. Urinemonsters worden gedurende verschillende tijdsperioden verzameld met behulp van urinecollectoren.

Bloedmonsters worden gecentrifugeerd en plasma, serum en perifere mononucleaire bloedcellen (PBMC's) worden verzameld, in porties verdeeld en bij -80 °C bewaard voor verdere verwerking. Urinemonsters worden verdeeld en bewaard bij -80°C voor verdere verwerking.

Het primaire geselecteerde eindpunt van de studie is de kwantificering van de dagelijkse gemiddelde concentratie van van koffie afgeleide plasma-circulerende fenolische metabolieten, terwijl de studie van de biologische beschikbaarheid van andere van koffie afgeleide circulerende bioactieve stoffen, de biologische beschikbaarheid van van cacao afgeleide circulerende fytochemicaliën, en de beoordeling van cardiometabolische markers zullen als secundaire eindpunten worden beschouwd.