Erősen gyanús pigmentált bőrelváltozások előkezelése interleukin-2-vel (IL-2)

Ez a vizsgálat elsősorban annak meghatározására irányult, hogy kialakul-e tumorspecifikus immunitás az intraléziós IL-2-re adott válaszként erősen gyanús pigmentált léziókban szenvedő betegeknél, és hogy ez az immunitás rezisztenciát biztosít-e a melanoma metasztázisokkal szemben. A betegeket képzett bőrgyógyászok azonosítják, és interjúkat készítenek a sebészeti klinikán (4. emelet, Dickson Center), QEII HSC, NSHA.

A szokásos várakozási idő a konzultációtól a műtéti biopsziáig legfeljebb 4 hét. A vizsgálók gondoskodnak arról, hogy a résztvevő bőrgyógyász értesítése után a betegek azonnal megjelenjenek, és a vizsgálat minden kutatási komponense a szokásos várakozási időn belül elkészüljön. Ennek a standard várakozási időnek a kihasználásával az intraléziós IL-2 potenciálisan befolyásolhatja az immunválaszt, amelyet egyébként nem lehetne elérni a biopszia befejezése után. Tekintettel arra, hogy a vizsgálatot a szokásos várakozási időn belül végzik, nem tér el a szokásos ellátási színvonaltól. A vizsgálati protokollt követően a betegek az 1. napon (1. heti vizit) és a 8. napon (2. heti vizit) kapnak intraléziós injekciót, a 15. napon (3. heti vizit) pedig excisionális biopsziát végeznek, jóval a konzultációtól számított várakozási időn belül. biopsziára. A lézión belüli injekciók és a biopszián túli biominták gyűjtése eltér a normál ellátási színvonaltól, de nem késlelteti. Két további látogatásra van szükség a kezdeti konzultáción kívül.

Ez a vizsgálat randomizált, kontrollált, kettős vak vizsgálat. Az erősen gyanús pigmentált elváltozásokban szenvedő betegeket egy algoritmus véletlenszerűen osztja be a következő két csoport egyikébe: 1) A kezelési csoportba tartozó betegeket intralezionálisan kezelik IL-2-vel (Proleukin (Aldesleukin), Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.) 500 000 nemzetközi dózisban. Egységek (NE) 0,1 ml sterilizált sóoldatban (0,9%, m/v) 2 kezelési ciklusban 1 hét különbséggel (1. és 7. nap); 2) a kontrollcsoport betegeit intraléziósan kezeljük azonos térfogatú (0,1 ml) sterilizált sóoldattal (0,9%, m/v). A véletlenszerűsítést egy Random Block algoritmus generálja minden egyes páciens számára, és minden egyes betegre vonatkozó utasítás-előkészítést elküldik a gyógyszertárnak. Az IL-2-t (Proleukin) a Novartistól kapja meg a gyógyszertár, amelyet Dr. Carman Giacomantonio kutatási szolgáltatási számlájáról fizet. A gyógyszertár utasítást kap az IL-2 kezelés vagy az injekciós kontroll (sóoldat) elkészítésére. A gyógyszertár kijelöl egy kódolt azonosítót, amelyet a fecskendővel együtt a beteg nevével együtt „Interleukin-2/Placebo” címkével látnak el (így vak vizsgálatot végeznek a klinikus és a páciens között). Pilottanulmányként a tervezés elve az, hogy teszteljük a javasolt módszertan és protokoll szerint egy nagyobb és drágább kísérlet kivitelezhetőségét. Ennek megfelelően legalább 20 (10 kezelés, 10 placebo) résztvevő lesz (legfeljebb 60). Becslések szerint a statisztikai szignifikancia 20 betegnél érhető el, de ha nem éri el 20 beteg után, akkor további 10 (5 kezelés, 5 kontroll) beteg kerül felvételre. Ha a szignifikanciát 30 beteg után sem érik el, további 10 beteget vonnak be, és így tovább, legfeljebb 60 betegig. Ha 60 beteg után a szignifikancia nem érhető el, akkor a jelenlegi protokoll szerint nem lenne logikus a további toborzás, ezért a módszertant felül kell vizsgálni vagy a vizsgálatot le kell állítani.

Az 1. napon (első kezelés) és a 15. napon (excíziós biopszia) minden betegtől vért (4 fiola) és vizeletmintát (25-50 ml) vesznek. Az injekciókra adott helyi reakciókat nem specifikus jelek, például vérzés, arthema, fertőzés vagy irritáció szempontjából figyelik. A kutatók nem számítanak specifikus változásokra az injekció beadásával összefüggő pigmentált lézióban ebben a rövid időszakban, de minden változást feljegyeznek.

A 15. napon, a második intraléziós injekciót követően, a szokásos sebészeti technikákat követve excisiós biopsziát végzünk, az alábbiak szerint: a bőr ellipszisét, amely magában foglalja a pigmentált elváltozást, amely a bőr alatti zsírba nyúlik, a durván tiszta, de szűk kimetszési határ elérése érdekében. Ezt a kis hibát elsősorban megszakított varratokkal zárják le. A biopsziás mintát ezt követően standard szövettani technikákkal értékelik a diagnózis megerősítésére, a perem állapotának (tiszta vagy érintett) és a lézió inváziójának mélységének értékelésére. A lézió inváziójának mélysége határozza meg a későbbi sebészeti kimetszések mértékét és a határvonal kiválasztását a National Comprehensive Cancer Network (NCCN) szabványos irányelvei szerint. A lézióba adott 0,1 ml-es biopszia előtti intraléziós injekciók nem változtatják meg a lézió méreteit vagy felépítését, és nem befolyásolják a későbbi biopszia szükséges mértékét. Azokat a léziókat, amelyek túl nagynak tűnnek ahhoz, hogy szövetmanipuláció vagy lebenyek létrehozása nélkül lehessen zárni, biopsziát vesznek lyukasztásos biopsziás mintavételi technikával, amelynek során a lézió reprezentatív területeiről 4 mm átmérőjű szövetkorongokat vesznek a diagnózis és a szövetek mélységének megerősítésére. invázió. Az invázió mélysége határozza meg a későbbi sebészeti beavatkozások mértékét és összetettségét, amely a lézió eltávolításához és az NCCN irányelveinek megfelelően egyértelmű határvonalak eléréséhez szükséges. A biopsziás minta feldolgozása a következőképpen történik: 22G tűvel finom tűs aspirációs biopsziát végeznek (a tűt kétszer vezetik át a lézió közepén) RNS-elemzés céljából. A szövet fennmaradó részét patológiára küldik standard szövettani értékelés céljából. A patológus beszámol arról is, hogy a kezeléssel összefüggő tumorba infiltráló limfociták (TIL-ek) mekkora mértéket mutatnak a kontroll injekciókhoz képest. A vért és a vizeletet metabolikus és proteomikus módszerekkel értékelik a kezelésre adott szisztémás immunválasz értékelésére.

Minden vér-, vizelet- és lézióbiopsziás mintát kódolt számmal látnak el (nem tartalmaznak betegazonosító adatokat), és azonnal a Dalhousie Egyetem Dr. Carman Giacomantonio laboratóriumába szállítják tárolás céljából. A kimetszett minták finom tűs aspirációját a tumor genetikai és epigenetikai profilja szempontjából értékeljük. A vért és a vizeletet a proteomikus és metabolomikus profilok szempontjából értékelik.

A vizsgálat minden résztvevője 2 éven keresztül 4 havonta, a kezdeti beavatkozást követő 3-5. évben pedig félévente értékelést kap, hogy felmérjék a betegség progresszióját vagy új melanoma kialakulását, hogy összehasonlítsák a kezelt és a kontrollcsoportot. Nincs szabványosított teszt vagy mérhető biomarker a kialakult vagy tartós immunitás értékelésére. A vizsgálat ezen aspektusa megegyezik a melanómás betegek ellátásának standardja szerint végzett betegértékeléssel. A vizsgálati eredmények publikációit ismételten minden olyan információ nélkül kell kitölteni, amely felhasználható lenne a vizsgálatban részt vevő betegek azonosítására.