白细胞介素 2 对高度可疑色素性皮肤病变的预处理 (IL-2)

这项研究的主要目的是确定是否可以在具有高度可疑色素性病变的患者中产生肿瘤特异性免疫以响应病灶内 IL-2，以及该免疫是否可以赋予黑色素瘤转移抗性。 患者将由合格的皮肤科医生进行鉴定，面谈将在外科诊所（迪克森中心 4 楼）QEII HSC、NSHA 进行。

从咨询到手术活检的标准等待时间长达 4 周。 研究人员将确保在收到参与皮肤科医生的通知后立即对患者进行检查，并且研究的所有研究部分都在正常预期的等待时间内完成。 通过利用这个标准等待时间，病灶内 IL-2 可能会影响免疫反应，否则在活检完成后无法实现。 鉴于该研究是在正常等待时间内进行的，因此它不会偏离正常的护理标准。 按照研究方案，患者将在第 1 天（第 1 周就诊）和第 8 天（第 2 周就诊）接受病灶内注射，并在第 15 天（第 3 周就诊）进行切除活检，这完全在咨询后可接受的等待时间内活检。 活检以外的病灶内注射和生物样本收集偏离但不延迟正常的护理标准。 除了初步咨询外，还需要两次额外的访问。

本研究是一项随机、对照、双盲研究。 具有高度可疑色素病变的患者将通过算法随机分配到两组之一：1) 治疗组患者将接受 IL-2（Proleukin（Aldesleukin），Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.）病灶内治疗，剂量为 500,000 国际单位 (IU) 在 0.1ml 无菌盐水 (0.9%, m/v) 中，2 个治疗周期间隔 1 周（第 1 天和第 7 天）； 2)对照组患者将用相同体积(0.1ml)的灭菌盐水(0.9％，m/v)进行病灶内处理。 将通过 Random Block 算法为每位患者生成随机化，并且每位患者的说明准备工作将发送至药房。 IL-2 (Proleukin) 将由药房从 Novartis 获得，费用由 Carman Giacomantonio 博士的研究服务账户支付。 将向药房提供准备 IL-2 治疗药物或可注射对照药物（盐水）的说明。 药房将分配一个编码 ID，该 ID 将与注射器一起提供，患者姓名标记为“Interleukin-2/Placebo”（因此对临床医生和患者进行盲法研究）。 作为一项试点研究，设计的原则是测试按照建议的方法和协议进行更大规模、更昂贵的试验的可行性。 因此，至少有 20 名（10 名治疗组，10 名安慰剂组）参与者（最多 60 名）。 据估计，20 名患者将达到统计学显着性，但如果在 20 名患者后仍未达到，则将招募另外 10 名（5 名治疗组，5 名对照）患者。 如果在 30 名患者后仍未达到显着性，将再招募 10 名患者，依此类推，最多 60 名患者。 如果在 60 名患者之后，未达到显着性，则根据当前方案进一步招募将不合逻辑，因此需要修改方法或停止研究。

在第 1 天（第一次治疗）和第 15 天（切除活检），所有患者都将采集血液（4 瓶）和尿液（25-50 毫升）样本。 将监测对注射的局部反应的非特异性体征，例如出血、红斑、感染或刺激。 调查人员预计在这段短时间内不会出现与注射相关的色素病变的具体变化，但所有变化都会被记录下来。

在第 15 天，在第二次病灶内注射后，将按照标准手术技术进行切除活检，如下：将进行包含延伸到皮下脂肪的色素性病变的皮肤椭圆形，以实现非常清晰但狭窄的切除边缘。 这个小缺陷将主要通过间断缝合来闭合。 随后将使用标准组织学技术对活检标本进行评估，以确认诊断、评估边缘状态（清晰或受累）和病变浸润深度。 根据标准的国家综合癌症网络 (NCCN) 指南，病变浸润的深度将决定后续手术切除的范围和边缘选择。 活检前向病灶内注射 0.1ml 不会改变病灶的尺寸或结构，也不会影响后续活检所需的范围。 如果病变感觉太大而无法在没有组织操作或制作皮瓣的情况下闭合，将使用穿孔活检取样技术进行活检，从病变的代表性区域采集直径为 4 毫米的组织圆盘，以确认诊断和切除深度入侵。 根据 NCCN 指南，入侵的深度将决定去除病灶和获得清晰边缘所需的后续手术的范围和复杂性。 活检标本将按如下方式处理：使用22G针进行细针穿刺活检（针将通过病灶中心两次）进行RNA分析。 剩余的组织将被送往病理学进行标准组织学评估。 病理学家还将报告与对照注射相比观察到的与治疗相关的肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL) 的程度。 将使用代谢组学和蛋白质组学方法评估血液和尿液，以评估对治疗的全身免疫反应。

所有血液、尿液和病变活检样本都将标有编码编号（不包含任何患者身份信息），并将立即运送到达尔豪斯大学的 Carman Giacomantonio 博士实验室进行储存。 将对切除样本的细针穿刺进行肿瘤遗传学和表观遗传学概况的评估。 将分别评估血液和尿液的蛋白质组学和代谢组学特征。

所有研究参与者将在初始干预后的 2 年内每 4 个月接受一次评估，并在第 3 至 5 年每半年接受一次评估，以评估疾病进展或新黑色素瘤的发展，以比较治疗组和对照组。 没有标准化测试或可测量的生物标志物来评估已建立或持久的免疫力。 该研究的这一方面与按照黑色素瘤患者护理标准进行的患者评估相同。 同样，任何研究结果的发布都将在没有任何可用于识别研究中患者的信息的情况下完成。