Erittäin epäilyttävien pigmentoituneiden ihovaurioiden esihoito interleukiini-2:lla (IL-2)

Tämä tutkimus on ensisijaisesti suunniteltu määrittämään, voidaanko kasvainspesifistä immuniteettia synnyttää potilailla, joilla on erittäin epäilyttäviä pigmentoituneita leesioita vasteena intraleesionaaliselle IL-2:lle, ja voiko tämä immuniteetti antaa vastustuskyvyn melanooman etäpesäkkeille. Pätevät ihotautilääkärit tunnistavat potilaat ja haastattelut järjestetään kirurgian klinikalla (4. kerros Dickson Center) QEII HSC, NSHA.

Normaali odotusaika konsultaatiosta kirurgiseen biopsiaan on enintään 4 viikkoa. Tutkijat varmistavat, että potilaat nähdään välittömästi osallistuvan ihotautilääkärin ilmoituksen jälkeen ja että kaikki tutkimuksen tutkimuskomponentit valmistuvat normaalisti odotetussa odotusajassa. Käyttämällä tätä standardia odotusaikaa leesionaalinen IL-2 voi mahdollisesti vaikuttaa immuunivasteeseen, jota ei muuten voitaisi saavuttaa biopsian valmistumisen jälkeen. Koska tutkimus suoritetaan normaalin odotusajan sisällä, se ei poikkea normaalista hoitotasosta. Tutkimusprotokollan mukaisesti potilaat saavat leesionsisäiset injektiot päivänä 1 (viikko 1 käynti) ja päivänä 8 (viikko 2 käynti) ja leikkausbiopsiat suoritetaan päivänä 15 (viikko 3 käynti), hyvissä ajoin konsultaation hyväksytyn odotusajan sisällä. biopsiaan. Leesionaaliset injektiot ja bionäytteiden kerääminen biopsian jälkeen poikkeavat normaalista hoidon tasosta, mutta eivät hidasta sitä. Ensimmäisen konsultaation lisäksi tarvitaan kaksi lisäkäyntiä.

Tämä tutkimus on satunnaistettu, kontrolloitu kaksoissokkotutkimus. Potilaat, joilla on erittäin epäilyttäviä pigmentoituneita leesioita, jaetaan satunnaisesti algoritmin avulla johonkin kahdesta ryhmästä: 1) Hoitoryhmän potilaita hoidetaan intraleesionaalisesti IL-2:lla (Proleukin (Aldesleukin), Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.) annoksella 500 000 International Yksiköt (IU) 0,1 ml:ssa steriloitua suolaliuosta (0,9 %, m/v) 2 hoitosykliä 1 viikon välein (päivä 1 ja päivä 7); 2) kontrolliryhmän potilaita hoidetaan intraleesionaalisesti steriloidulla suolaliuoksella (0,9 %, m/v), jonka tilavuus on (0,1 ml). Satunnaistaminen luodaan kullekin potilaalle Random Block -algoritmin avulla, ja kullekin potilaalle lähetetään ohjevalmistelu apteekkiin. Apteekki hankkii IL-2:n (Proleukin) Novartikselta, ja sen maksaa tohtori Carman Giacomantonion tutkimuspalvelutililtä. Apteekille annetaan ohjeet valmistaa joko IL-2-hoito tai injektoitava kontrolli (suolaliuos). Apteekki määrittää kodifioidun tunnuksen, joka toimitetaan ruiskun mukana ja jossa potilaan nimi on merkitty "Interleukiini-2/Placebo" (sokeava tutkimus kliinikolle ja potilaalle). Pilottitutkimuksena suunnittelun periaatteena on testata mahdollisuutta edetä suurempaan ja kalliimpaan kokeiluun ehdotetun metodologian ja protokollan mukaisesti. Näin ollen osallistujia on vähintään 20 (10 hoitoa, 10 lumelääkettä) (enintään 60). On arvioitu, että tilastollinen merkitsevyys saavutetaan 20 potilaalla, mutta jos sitä ei saavuteta 20 potilaan jälkeen, mukaan otetaan 10 lisäpotilasta (5 hoitoa, 5 kontrollia). Jos merkitystä ei vieläkään saavuteta 30 potilaan jälkeen, mukaan otetaan vielä 10 potilasta ja niin edelleen enintään 60 potilasta. Jos 60 potilaan jälkeen merkitystä ei saavuteta, lisärekrytointi nykyisen protokollan mukaisesti ei olisi loogista ja siksi menetelmää olisi tarkistettava tai tutkimus keskeytettävä.

Päivänä 1 (ensimmäinen hoito) ja 15 (leikkausbiopsia) kaikilta potilailta otetaan verinäytteitä (4 injektiopulloa) ja virtsanäytteitä (25-50 ml). Paikallisia injektioreaktioita seurataan epäspesifisten merkkien, kuten verenvuodon, arteeman, infektion tai ärsytyksen varalta. Tutkijat eivät odota spesifisiä muutoksia injektioon liittyvässä pigmentoituneessa leesiossa tämän lyhyen ajanjakson aikana, mutta kaikki muutokset huomioidaan.

Päivänä 15, toisen intraleesionaalisen injektion jälkeen, suoritetaan leikkausbiopsia noudattaen tavanomaisia ​​kirurgisia tekniikoita seuraavasti: ihon ellipsi, joka käsittää pigmentoituneen vaurion, joka ulottuu ihonalaiseen rasvaan, suoritetaan karkean kirkkaan mutta kapean leikkausmarginaalin saavuttamiseksi. Tämä pieni vika suljetaan ensisijaisesti katkenneilla ompeleilla. Biopsia näyte arvioidaan myöhemmin käyttämällä tavanomaisia ​​histologisia tekniikoita diagnoosin vahvistamiseksi, marginaalin tilan (selvä tai mukana) ja vaurion tunkeutumisen syvyyden arvioimiseksi. Leesion invaasion syvyys sanelee myöhempien kirurgisten leikkausten laajuuden ja marginaalin valinnan NCCN:n (National Comprehensive Cancer Network) standardiohjeiden mukaisesti. Leesion sisäiset 0,1 ml:n injektiot ennen biopsiaa vaurioon eivät muuta leesion kokoa tai arkkitehtuuria tai vaikuta myöhemmän biopsian vaatimaan laajuuteen. Leesioista, jotka koetaan liian suuriksi sulkemista varten ilman kudosmanipulaatiota tai läppien luomista, otetaan biopsia käyttämällä lävistysbiopsianäytteenottotekniikkaa, jossa leesion edustavilta alueilta otetaan halkaisijaltaan 4 mm:n levyjä kudoslevyistä diagnoosin ja syvyyden vahvistamiseksi. maahantunkeutuminen. Invaasion syvyys sanelee leesion poistamiseksi ja selkeän marginaalin saavuttamiseksi tarvittavan myöhemmän leikkauksen laajuuden ja monimutkaisuuden NCCN:n ohjeiden mukaisesti. Biopsialla otettu näyte käsitellään seuraavasti: RNA-analyysiä varten tehdään 22G:n neulalla hieno neulan aspiraatiobiopsia (neula viedään leesion keskustan läpi kaksi kertaa). Loput kudoksesta lähetetään patologiaan tavanomaista histologista arviointia varten. Patologi raportoi myös hoitoon liittyvien havaittujen kasvaimeen tunkeutuvien lymfosyyttien (TIL) määrän verrattuna kontrolliinjektioihin. Veri ja virtsa arvioidaan aineenvaihdunta- ja proteomimenetelmillä systeemisen immuunivasteen arvioimiseksi hoidolle.

Kaikki veri-, virtsa- ja leesiobiopsianäytteet merkitään kodifioidulla numerolla (eivät sisällä potilaiden tunnistetietoja) ja kuljetetaan välittömästi Dr. Carman Giacomantonio -laboratorioon Dalhousien yliopistoon varastointia varten. Poistettujen näytteiden hienoneula-aspiraatio arvioidaan kasvaimen geneettisen ja epigeneettisen profiilin suhteen. Verestä ja virtsasta arvioidaan vastaavasti proteominen ja metabolominen profiili.

Kaikki tutkimukseen osallistujat saavat arvioinnit 4 kuukauden välein 2 vuoden ajan ja kahdesti vuodessa 3–5 vuoden ajan ensimmäisen toimenpiteen jälkeen arvioidakseen taudin etenemistä tai uuden melanooman kehittymistä sekä hoito- että kontrolliryhmien vertailua varten. Ei ole olemassa standardoitua testiä tai mitattavissa olevaa biomarkkeria vakiintuneen tai kestävän immuniteetin arvioimiseksi. Tämä tutkimuksen näkökohta on identtinen melanoomapotilaiden hoidon standardin mukaisesti suoritetun potilasarvioinnin kanssa. Jälleen kaikki tutkimustulosten julkaisut täytetään ilman tietoja, joita voitaisiin käyttää tutkimukseen osallistuvien potilaiden tunnistamiseen.