Forbehandling av svært mistenkelige pigmenterte hudlesjoner med interleukin-2 (IL-2)

Denne studien er primært designet for å avgjøre om tumorspesifikk immunitet kan genereres hos pasienter med svært mistenkelige pigmenterte lesjoner som respons på intralesjonell IL-2, og om denne immuniteten kan gi resistens mot melanommetastase. Pasienter vil bli identifisert av kvalifiserte hudleger og intervjuer vil bli holdt på kirurgiklinikken (4. etasje Dickson Center) QEII HSC, NSHA.

Standard ventetid fra konsultasjon til kirurgisk biopsi er inntil 4 uker. Etterforskere vil sørge for at pasienter blir sett umiddelbart etter varsel fra deltakende hudlege, og at alle forskningskomponenter i studien er fullført innen den normalt forventede ventetiden. Gjennom bruk av denne standard ventetiden kan intralesjonell IL-2 potensielt påvirke en immunrespons som ellers ikke kunne oppnås etter at biopsien er fullført. Gitt at studien gjennomføres innenfor normal ventetid, avviker den ikke fra normal standard for omsorg. Etter studieprotokollen vil pasienter motta intralesjonelle injeksjoner på dag 1 (uke 1 besøk) og dag 8 (uke 2 besøk), og eksisjonsbiopsier vil bli utført på dag 15 (uke 3 besøk), godt innenfor akseptert ventetid fra konsultasjon til biopsi. De intralesjonelle injeksjonene og innsamlingen av bioprøver utover biopsien avviker fra, men forsinker ikke normal behandlingsstandard. Det kreves to ekstra besøk i tillegg til den første konsultasjonen.

Denne studien er en randomisert, kontrollert, dobbeltblind studie. Pasienter med svært mistenkelige pigmenterte lesjoner vil ved hjelp av en algoritme bli tilfeldig tilordnet en av to grupper: 1) behandlingsgruppepasienter vil bli behandlet intralesjonalt med IL-2 (Proleukin (Aldesleukin), Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.) i en dose på 500 000 International Enheter (IE) i 0,1 ml sterilisert saltvann (0,9 %, m/v) i 2 behandlingssykluser med 1 ukes mellomrom (dag 1 og dag 7); 2) kontrollgruppepasienter vil bli behandlet intralesjonelt med sterilisert saltvann (0,9 %, m/v) av samme volum (0,1 ml). Randomisering vil bli generert av en Random Block-algoritme for hver pasient, og instruksjonsforberedelse for hver pasient vil bli sendt til apotek. IL-2 (Proleukin) vil bli hentet fra Novartis av apoteket, betalt av Dr. Carman Giacomantonios forskningstjenestekonto. Apoteket vil få instruksjon om å forberede enten IL-2-behandling eller injiserbar kontroll (saltvann). Apoteket vil tildele en kodifisert ID som vil bli levert sammen med sprøyten med pasientnavnet merket som "Interleukin-2/Placebo" (og dermed blendende studie for kliniker og pasient). Som en pilotstudie er prinsippet for designet å teste muligheten for å gå videre til et større og dyrere forsøk etter den foreslåtte metodikken og protokollen. Som sådan vil det være minimum 20 (10 behandlinger, 10 placebo) deltakere (opptil maksimalt 60). Det er estimert at statistisk signifikans vil nås med 20 pasienter, men hvis den ikke oppnås etter 20 pasienter, vil ytterligere 10 (5 behandlinger, 5 kontroll) pasienter bli registrert. Dersom signifikans fortsatt ikke oppnås etter 30 pasienter, vil ytterligere 10 pasienter bli innrullert og så videre opp til maksimalt 60 pasienter. Hvis betydningen ikke oppnås etter 60 pasienter, vil ytterligere rekruttering under gjeldende protokoll ikke være logisk, og derfor må metodikken revideres eller studien avbrytes.

På dag 1 (første behandling) og 15 (eksisjonsbiopsi) vil alle pasienter få tatt blodprøver (4 hetteglass) og urin (25-50 ml). Lokale reaksjoner på injeksjoner vil bli overvåket for ikke-spesifikke tegn som blødning, arythema, infeksjon eller irritasjon. Undersøkere forventer ikke spesifikke endringer i den pigmenterte lesjonen relatert til injeksjonen i løpet av denne korte tidsperioden, men alle endringer vil bli notert.

På dag 15, etter den andre intralesjonelle injeksjonen, vil en eksisjonsbiopsi bli utført etter standard kirurgiske teknikker, som følger: ellipse av hud som omfatter den pigmenterte lesjonen som strekker seg inn i det subkutane fettet, vil bli utført for å oppnå en grovt klar, men smal utskjæringsmargin. Denne lille defekten vil primært lukkes med avbrutt suturer. Den biopsierte prøven vil deretter bli evaluert ved bruk av standard histologiske teknikker for å bekrefte diagnoser, vurdere marginstatus (klar eller involvert) og dybden av lesjonsinvasjonen. Dybden av lesjonsinvasjonen vil diktere omfanget av påfølgende kirurgiske eksisjoner og marginvalg i henhold til standard retningslinjer for National Comprehensive Cancer Network (NCCN). Pre-biopsi intralesjonelle injeksjoner på 0,1 ml i lesjonen vil ikke endre dimensjonene eller arkitekturen til lesjonen eller påvirke omfanget av den påfølgende biopsien som kreves. Lesjoner som oppleves å være for store for lukking uten vevsmanipulering eller opprettelse av klaffer, vil bli biopsiert ved hjelp av en punchbiopsi-prøvetakingsteknikk hvor 4 mm diameter vevsplater fra representative områder av lesjonen vil bli tatt for å bekrefte diagnosen og dybden av invasjon. Dybden av invasjonen vil diktere omfanget og kompleksiteten av påfølgende kirurgi som kreves for å fjerne lesjonen og oppnå klare marginer i henhold til NCCNs retningslinjer. Den biopsierte prøven vil bli behandlet som følger: ved bruk av en 22G nål vil en finnålsaspirasjonsbiopsi bli utført (nålen vil føres gjennom midten av lesjonen to ganger) for RNA-analyse. Resten av vevet vil bli sendt til patologi for standard histologisk vurdering. Patologen vil også rapportere omfanget av observerte tumorinfiltrerende lymfocytter (TIL) assosiert med behandling sammenlignet med kontrollinjeksjoner. Blod og urin vil bli vurdert ved hjelp av metabalomiske og proteomiske metoder for å vurdere systemisk immunrespons på behandling.

Alle blod-, urin- og lesjonsbiopsiprøver vil bli merket med et kodifisert nummer (vil ikke inneholde noen pasientidentifikasjonsinformasjon) og vil umiddelbart bli transportert til Dr. Carman Giacomantonio-laboratoriet ved Dalhousie University for lagring. Finnålsaspirasjon av utskårne prøver vil bli vurdert for tumorgenetisk og epigeneitisk profil. Blod og urin vil bli vurdert for henholdsvis proteomisk og metabolomisk profil.

Alle studiedeltakere vil motta vurderinger hver 4. måned i 2 år og halvårlige vurderinger i år 3 til 5 etter den første intervensjonen for å vurdere sykdomsprogresjon, eller utvikling av nytt melanom, for å sammenligne mellom både behandlings- og kontrollgruppene. Det er ingen standardisert test eller målbar biomarkør for å vurdere etablert eller varig immunitet. Dette aspektet av studien er identisk med pasientvurderingen utført i henhold til standard for omsorg for melanompasienter. Igjen vil alle publikasjoner av studieresultater bli fullført uten informasjon som kan brukes til å identifisere pasienter inkludert i studien.