Voorbehandeling van zeer verdachte gepigmenteerde huidlaesies met interleukine-2 (IL-2)

Deze studie is in de eerste plaats bedoeld om te bepalen of tumorspecifieke immuniteit kan worden gegenereerd bij patiënten met zeer verdachte gepigmenteerde laesies als reactie op intralesionale IL-2, en of die immuniteit weerstand kan bieden tegen melanoommetastasen. Patiënten worden geïdentificeerd door gekwalificeerde dermatologen en er worden interviews gehouden in de operatiekliniek (4e verdieping Dickson Center) QEII HSC, NSHA.

De standaard wachttijd van consultatie tot chirurgische biopsie is maximaal 4 weken. Onderzoekers zullen ervoor zorgen dat patiënten onmiddellijk worden gezien na kennisgeving door de deelnemende dermatoloog en dat alle onderzoekscomponenten van het onderzoek binnen de normaal verwachte wachttijd worden voltooid. Door gebruik te maken van deze standaard wachttijd kan intralesionale IL-2 mogelijk een immuunrespons beïnvloeden die anders niet zou kunnen worden bereikt nadat de biopsie is voltooid. Aangezien het onderzoek binnen de normale wachttijd wordt uitgevoerd, wijkt het niet af van de normale zorgstandaard. Volgens het onderzoeksprotocol krijgen patiënten intralesionale injecties op dag 1 (bezoek in week 1) en dag 8 (bezoek in week 2) en worden excisiebiopten uitgevoerd op dag 15 (bezoek in week 3), ruim binnen de aanvaarde wachttijd vanaf het consult. naar biopsie. De intralesionale injecties en het verzamelen van biospecimens voorbij de biopsie wijken af ​​van, maar vertragen niet de normale zorgstandaard. Naast het eerste consult zijn er nog twee extra bezoeken nodig.

Deze studie is een gerandomiseerde, gecontroleerde, dubbelblinde studie. Patiënten met zeer verdachte gepigmenteerde laesies zullen willekeurig worden toegewezen door een algoritme aan een van twee groepen: 1) patiënten uit de behandelingsgroep zullen intralesionaal worden behandeld met IL-2 (Proleukin (Aldesleukin), Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.) in een dosis van 500.000 internationale Eenheden (IE) in 0,1 ml gesteriliseerde zoutoplossing (0,9%, m/v) voor 2 behandelingscycli met een tussenpoos van 1 week (dag 1 en dag 7); 2) patiënten uit de controlegroep zullen intralaesionaal worden behandeld met gesteriliseerde zoutoplossing (0,9%, m/v) van hetzelfde volume (0,1 ml). Randomisatie wordt gegenereerd door een Random Block-algoritme voor elke patiënt en instructievoorbereiding voor elke patiënt wordt naar de apotheek gestuurd. IL-2 (Proleukin) zal door de apotheek worden verkregen van Novartis, betaald door Dr. Carman Giacomantonio's research services account. De apotheek krijgt instructies om een ​​IL-2-behandeling of een injecteerbare controle (zoutoplossing) te bereiden. De apotheek zal een gecodeerde ID toewijzen die samen met de spuit zal worden verstrekt met de patiëntnaam gelabeld als "Interleukin-2/Placebo" (dus blinde studie voor clinicus en patiënt). Als pilootstudie is het principe van het ontwerp het testen van de haalbaarheid van een grotere en duurdere proef volgens de voorgestelde methodologie en het protocol. Er zullen dus minimaal 20 (10 behandeling, 10 placebo) deelnemers zijn (tot een maximum van 60). Geschat wordt dat statistische significantie wordt bereikt bij 20 patiënten, maar als dit niet wordt bereikt na 20 patiënten, zullen er nog eens 10 (5 behandeling, 5 controle) patiënten worden ingeschreven. Als de significantie na 30 patiënten nog steeds niet is bereikt, worden nog eens 10 patiënten ingeschreven en zo verder tot een maximum van 60 patiënten. Als na 60 patiënten geen significantie wordt bereikt, zou verdere rekrutering onder het huidige protocol niet logisch zijn en daarom zou de methodologie moeten worden herzien of zou de studie moeten worden stopgezet.

Op dag 1 (eerste behandeling) en dag 15 (excisiebiopsie) wordt bij alle patiënten bloed (4 flesjes) en urine (25-50 ml) afgenomen. Lokale reacties op injecties zullen worden gecontroleerd op niet-specifieke tekenen zoals bloeding, aritmie, infectie of irritatie. Onderzoekers verwachten geen specifieke veranderingen in de gepigmenteerde laesie gerelateerd aan de injectie in deze korte periode, maar alle veranderingen zullen worden genoteerd.

Op dag 15, na de tweede intralaesionale injectie, zal een excisiebiopsie worden uitgevoerd volgens de standaard chirurgische technieken, en wel als volgt: ellips van de huid die de gepigmenteerde laesie omsluit en zich uitstrekt tot in het onderhuidse vet zal worden uitgevoerd om een ​​zeer heldere maar smalle excisiemarge te verkrijgen. Dit kleine defect wordt voornamelijk gesloten met onderbroken hechtingen. Het biopsiemonster zal vervolgens worden geëvalueerd met behulp van standaard histologische technieken om diagnoses te bevestigen, de margestatus (vrij of betrokken) en de diepte van de laesie-invasie te beoordelen. De diepte van de laesie-invasie bepaalt de omvang van daaropvolgende chirurgische excisies en margeselectie volgens de standaard richtlijnen van het National Comprehensive Cancer Network (NCCN). Pre-biopsie intralesionale injecties van 0,1 ml in de laesie zullen de afmetingen of architectuur van de laesie niet veranderen of de omvang van de daaropvolgende biopsie beïnvloeden. Laesies die te groot worden geacht om te sluiten zonder weefselmanipulatie of het maken van flappen, zullen worden gebiopteerd met behulp van een ponsbiopsietechniek waarbij weefselschijven met een diameter van 4 mm uit representatieve delen van de laesie worden genomen om de diagnose en de diepte van de laesie te bevestigen. invasie. De diepte van de invasie bepaalt de omvang en complexiteit van de daaropvolgende operatie die nodig is om de laesie te verwijderen en duidelijke marges te bereiken volgens de NCCN-richtlijnen. Het biopsiemonster wordt als volgt verwerkt: met behulp van een 22G-naald wordt een biopsie met fijne naaldaspiratie uitgevoerd (de naald wordt twee keer door het midden van de laesie gestoken) voor RNA-analyse. De rest van het weefsel wordt naar de pathologie gestuurd voor standaard histologische beoordeling. De patholoog zal ook de mate van waargenomen tumor-infiltrerende lymfocyten (TIL's) in verband met de behandeling rapporteren in vergelijking met controle-injecties. Bloed en urine zullen worden beoordeeld met behulp van metabalomische en proteomische methoden om de systemische immuunrespons op de behandeling te beoordelen.

Alle bloed-, urine- en laesiebiopsiemonsters zullen worden gelabeld met een gecodeerd nummer (bevatten geen patiëntidentificerende informatie) en zullen onmiddellijk worden vervoerd naar het Dr. Carman Giacomantonio-laboratorium aan de Dalhousie University voor opslag. Fijne naaldaspiratie van uitgesneden monsters zal worden beoordeeld op tumorgenetisch en epigenetisch profiel. Bloed en urine zullen worden beoordeeld op respectievelijk proteomische en metabolomische profielen.

Alle deelnemers aan de studie zullen elke 4 maanden gedurende 2 jaar beoordelingen ontvangen en tweejaarlijkse beoordelingen gedurende jaar 3 tot 5 na de eerste interventie om ziekteprogressie of de ontwikkeling van nieuw melanoom te beoordelen, om te vergelijken tussen zowel behandelings- als controlegroepen. Er is geen standaardtest of meetbare biomarker om gevestigde of blijvende immuniteit te beoordelen. Dit aspect van de studie is identiek aan de patiëntbeoordeling die wordt uitgevoerd volgens de zorgstandaard voor melanoompatiënten. Nogmaals, alle publicaties van onderzoeksresultaten zullen worden voltooid zonder enige informatie die zou kunnen worden gebruikt om patiënten die in het onderzoek zijn opgenomen te identificeren.