Pré-tratamento de lesões cutâneas pigmentadas altamente suspeitas com interleucina-2 (IL-2)

Este estudo é projetado principalmente para determinar se a imunidade específica do tumor pode ser gerada em pacientes com lesões pigmentadas altamente suspeitas em resposta à IL-2 intralesional e se essa imunidade pode conferir resistência à metástase do melanoma. Os pacientes serão identificados por dermatologistas qualificados e as entrevistas serão realizadas na clínica cirúrgica (4º andar Dickson Center) QEII HSC, NSHA.

O tempo de espera padrão desde a consulta até a biópsia cirúrgica é de até 4 semanas. Os investigadores garantirão que os pacientes sejam atendidos imediatamente após a notificação do dermatologista participante e que todos os componentes da pesquisa do estudo sejam concluídos dentro do tempo de espera normalmente previsto. Através da utilização deste tempo de espera padrão, a IL-2 intralesional pode potencialmente afetar uma resposta imune, que de outra forma não poderia ser alcançada após a conclusão da biópsia. Dado que o estudo é realizado dentro do tempo de espera normal, ele não se desvia do padrão normal de atendimento. Seguindo o protocolo do estudo, os pacientes receberão injeções intralesionais no Dia 1 (Visita da Semana 1) e Dia 8 (Visita da Semana 2), e biópsias excisionais serão realizadas no Dia 15 (Visita da Semana 3), bem dentro do tempo de espera aceito desde a consulta para biópsia. As injeções intralesionais e a coleta de amostras biológicas além da biópsia desviam-se, mas não atrasam o padrão normal de atendimento. Duas visitas adicionais são necessárias além da consulta inicial.

Este estudo é um estudo randomizado, controlado, duplo-cego. Os pacientes com lesões pigmentadas altamente suspeitas serão aleatoriamente designados por um algoritmo para um dos dois grupos: 1) os pacientes do grupo de tratamento serão tratados por via intralesional com IL-2 (Proleukin (Aldesleukin), Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.) na dose de 500.000 Unidades (UI) em 0,1ml de solução salina esterilizada (0,9%, m/v) para 2 ciclos de tratamento com 1 semana de intervalo (Dia 1 e Dia 7); 2) os pacientes do grupo controle serão tratados por via intralesional com solução salina esterilizada (0,9%, m/v) no mesmo volume (0,1ml). A randomização será gerada por um algoritmo de bloco aleatório para cada paciente, e a preparação das instruções para cada paciente será enviada à farmácia. A IL-2 (Proleukin) será obtida da Novartis pela farmácia, paga pela conta de serviços de pesquisa do Dr. Carman Giacomantonio. A farmácia receberá instruções para preparar o tratamento com IL-2 ou o controle injetável (solução salina). A farmácia atribuirá um ID codificado que será fornecido junto com a seringa com o nome do paciente rotulado como "Interleucina-2/Placebo" (portanto, estudo cego para o clínico e o paciente). Como estudo piloto, o princípio do desenho é testar a viabilidade de proceder a um estudo maior e mais caro seguindo a metodologia e o protocolo propostos. Como tal, haverá um mínimo de 20 (10 tratamento, 10 placebo) participantes (até um máximo de 60). Estima-se que a significância estatística será alcançada com 20 pacientes, no entanto, se não for alcançada após 20 pacientes, serão incluídos 10 pacientes adicionais (5 de tratamento, 5 de controle). Se a significância ainda não for alcançada após 30 pacientes, mais 10 pacientes serão inscritos e assim por diante até um máximo de 60 pacientes. Se, após 60 pacientes, a significância não for alcançada, o recrutamento adicional sob o protocolo atual não seria lógico e, portanto, a metodologia precisaria ser revisada ou o estudo descontinuado.

No Dia 1 (primeiro tratamento) e 15 (biópsia excisional), todos os pacientes terão amostras de sangue (4 frascos) e urina (25-50 ml). As reações locais às injeções serão monitoradas quanto a sinais inespecíficos, como sangramento, aritema, infecção ou irritação. Os investigadores não antecipam alterações específicas na lesão pigmentada relacionadas à injeção neste curto período de tempo, porém todas as alterações serão observadas.

No dia 15, após a segunda injeção intralesional, uma biópsia excisional será realizada seguindo as técnicas cirúrgicas padrão, como segue: será realizada uma elipse de pele abrangendo a lesão pigmentada que se estende até a gordura subcutânea para obter uma margem de excisão grosseiramente clara, mas estreita. Este pequeno defeito será fechado principalmente com suturas interrompidas. O espécime da biópsia será posteriormente avaliado usando técnicas histológicas padrão para confirmar diagnósticos, avaliar o estado da margem (clara ou envolvida) e a profundidade da invasão da lesão. A profundidade da invasão da lesão ditará a extensão das excisões cirúrgicas subsequentes e a seleção da margem de acordo com as diretrizes padrão da National Comprehensive Cancer Network (NCCN). As injeções intralesionais pré-biópsia de 0,1 ml na lesão não alterarão as dimensões ou a arquitetura da lesão ou afetarão a extensão necessária para a biópsia subsequente. As lesões consideradas muito grandes para fechamento sem manipulação de tecido ou criação de retalhos serão biopsiadas usando uma técnica de amostragem por punção, na qual discos de tecido de 4 mm de diâmetro de áreas representativas da lesão serão retirados para confirmar o diagnóstico e a profundidade da lesão. invasão. A profundidade da invasão ditará a extensão e a complexidade da cirurgia subsequente necessária para remover a lesão e obter margens claras de acordo com as diretrizes da NCCN. O espécime biopsiado será processado da seguinte forma: com uma agulha 22G será realizada uma biópsia aspirativa com agulha fina (a agulha será passada duas vezes pelo centro da lesão) para análise do RNA. O restante do tecido será enviado ao patologista para avaliação histológica padrão. O patologista também relatará a extensão dos linfócitos infiltrados no tumor (TILs) associados ao tratamento em comparação com as injeções de controle. Sangue e urina serão avaliados usando métodos metabalômicos e proteômicos para avaliar a resposta imune sistêmica ao tratamento.

Todas as amostras de sangue, urina e biópsia de lesão serão rotuladas com um número codificado (não conterá nenhuma informação de identificação do paciente) e serão imediatamente transportadas para o laboratório do Dr. Carman Giacomantonio na Dalhousie University para armazenamento. A aspiração por agulha fina de amostras excisadas será avaliada quanto ao perfil genético e epigenético do tumor. Sangue e urina serão avaliados quanto aos perfis proteômico e metabolômico, respectivamente.

Todos os participantes do estudo receberão avaliações a cada 4 meses por 2 anos e avaliações semestrais para os anos 3 a 5 após a intervenção inicial para avaliar a progressão da doença ou o desenvolvimento de novo melanoma, para comparar entre os grupos de tratamento e controle. Não há teste padronizado ou biomarcador mensurável para avaliar a imunidade estabelecida ou duradoura. Este aspecto do estudo é idêntico à avaliação do paciente realizada de acordo com o padrão de tratamento para pacientes com melanoma. Novamente, quaisquer publicações dos resultados do estudo serão concluídas sem qualquer informação que possa ser usada para identificar os pacientes incluídos no estudo.