Förbehandling av mycket misstänkta pigmenterade hudskador med interleukin-2 (IL-2)

Denna studie är i första hand utformad för att avgöra om tumörspecifik immunitet kan genereras hos patienter med mycket misstänkta pigmenterade lesioner som svar på intralesional IL-2, och om den immuniteten kan ge resistens mot melanommetastaser. Patienterna kommer att identifieras av kvalificerade hudläkare och intervjuer kommer att hållas på operationskliniken (4:e våningen Dickson Center) QEII HSC, NSHA.

Standardväntetiden från konsultation till kirurgisk biopsi är upp till 4 veckor. Utredarna kommer att se till att patienter ses omedelbart efter meddelande från deltagande hudläkare och att alla forskningskomponenter i studien slutförs inom den normalt förväntade väntetiden. Genom att använda denna standardväntetid kan intralesional IL-2 potentiellt påverka ett immunsvar, som annars inte skulle kunna uppnås efter att biopsien är klar. Med tanke på att studien genomförs inom normal väntetid avviker den inte från normal vårdstandard. Enligt studieprotokollet kommer patienter att få intralesionala injektioner på dag 1 (besök i vecka 1) och dag 8 (besök i vecka 2), och excisionsbiopsier kommer att utföras på dag 15 (besök i vecka 3), väl inom den accepterade väntetiden från konsultationen till biopsi. De intralesionala injektionerna och insamlingen av bioprover bortom biopsi avviker från men fördröjer inte den normala vårdstandarden. Två ytterligare besök krävs utöver den inledande konsultationen.

Denna studie är en randomiserad, kontrollerad, dubbelblind studie. Patienter med mycket misstänkta pigmenterade lesioner kommer att slumpmässigt tilldelas en av två grupper med hjälp av en algoritm: 1) behandlingsgruppspatienter kommer att behandlas intralesionalt med IL-2 (Proleukin (Aldesleukin), Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.) i en dos av 500 000 International Enheter (IE) i 0,1 ml steriliserad koksaltlösning (0,9 %, m/v) för 2 behandlingscykler med 1 veckas mellanrum (dag 1 och dag 7); 2) kontrollgruppspatienter kommer att behandlas intralesionalt med steriliserad koksaltlösning (0,9 %, m/v) av samma volym (0,1 ml). Randomisering kommer att genereras av en Random Block-algoritm för varje patient, och instruktionsförberedelser för varje patient kommer att skickas till apoteket. IL-2 (Proleukin) kommer att erhållas från Novartis av apoteket, betald av Dr. Carman Giacomantonios forskningstjänstkonto. Apoteket kommer att få instruktioner om att förbereda antingen IL-2-behandling eller injicerbar kontroll (saltlösning). Apoteket kommer att tilldela ett kodifierat ID som kommer att tillhandahållas tillsammans med sprutan med patientnamnet märkt som "Interleukin-2/Placebo" (vilket gör studien blind för läkare och patient). Som en pilotstudie är principen för designen att testa möjligheten att gå vidare till ett större och dyrare försök enligt den metod och det protokoll som föreslagits. Som sådan kommer det att finnas minst 20 (10 behandlingar, 10 placebo) deltagare (upp till ett maximum av 60). Det uppskattas att statistisk signifikans kommer att uppnås med 20 patienter, men om den inte uppnås efter 20 patienter kommer ytterligare 10 (5 behandlingar, 5 kontroll) patienter att registreras. Om signifikans fortfarande inte uppnås efter 30 patienter kommer ytterligare 10 patienter att skrivas in och så vidare upp till maximalt 60 patienter. Om betydelsen inte uppnås efter 60 patienter skulle ytterligare rekrytering enligt det nuvarande protokollet inte vara logiskt och därför skulle metoden behöva revideras eller studien avbrytas.

Dag 1 (första behandlingen) och 15 (excisionsbiopsi) kommer alla patienter att ta blodprov (4 injektionsflaskor) och urin (25-50 ml). Lokala reaktioner på injektioner kommer att övervakas för icke-specifika tecken som blödning, arytem, ​​infektion eller irritation. Utredarna förutser inte specifika förändringar i den pigmenterade lesionen relaterade till injektionen under denna korta tidsperiod, men alla förändringar kommer att noteras.

På dag 15, efter den andra intralesionala injektionen, kommer en excisionsbiopsi att utföras enligt standardkirurgiska tekniker, enligt följande: hudellips som omfattar den pigmenterade lesionen som sträcker sig in i det subkutana fettet kommer att utföras för att uppnå en mycket tydlig men smal utskärningsmarginal. Denna lilla defekt kommer att stängas i första hand med avbrutna suturer. Det biopsierade provet kommer därefter att utvärderas med histologiska standardtekniker för att bekräfta diagnoser, bedöma marginalstatus (klar eller involverad) och djupet av lesionsinvasion. Djupet av lesionsinvasionen kommer att diktera omfattningen av efterföljande kirurgiska excisioner och marginalval enligt standardriktlinjerna för National Comprehensive Cancer Network (NCCN). Pre-biopsi intralesionala injektioner av 0,1 ml i lesionen kommer inte att ändra dimensioner eller arkitektur av lesionen eller påverka den omfattning som efterföljande biopsi krävs. Lesioner som upplevs vara för stora för att stängas utan vävnadsmanipulation eller skapande av flikar, kommer att biopsieras med hjälp av en stansbiopsiprovtagningsteknik där vävnadsskivor med en diameter på 4 mm från representativa områden av lesionen kommer att tas för att bekräfta diagnosen och djupet av invasion. Djupet av invasionen kommer att diktera omfattningen och komplexiteten av efterföljande operation som krävs för att ta bort lesionen och uppnå tydliga marginaler enligt NCCN:s riktlinjer. Det biopsierade provet kommer att bearbetas enligt följande: med hjälp av en 22G-nål kommer en finnålsaspirationsbiopsi att utföras (nålen kommer att passera genom mitten av lesionen två gånger) för RNA-analys. Resten av vävnaden kommer att skickas till patologi för standard histologisk bedömning. Patologen kommer också att rapportera omfattningen av observerade tumörinfiltrerande lymfocyter (TIL) associerade med behandling jämfört med kontrollinjektioner. Blod och urin kommer att bedömas med hjälp av metabalomiska och proteomiska metoder för att bedöma systemiskt immunsvar på behandling.

Alla blod-, urin- och lesionsbiopsiprover kommer att märkas med ett kodifierat nummer (kommer inte att innehålla någon patientidentifierande information) och kommer omedelbart att transporteras till Dr. Carman Giacomantonio-laboratoriet vid Dalhousie University för förvaring. Finnålsaspiration av utskurna prover kommer att bedömas för tumörgenetisk och epigeneitisk profil. Blod och urin kommer att bedömas för proteomisk respektive metabolomisk profil.

Alla studiedeltagare kommer att få bedömningar var 4:e månad i 2 år och tvååriga bedömningar för år 3 till 5 efter den första interventionen för att bedöma sjukdomsprogression, eller utvecklingen av nytt melanom, för att jämföra mellan både behandlings- och kontrollgrupper. Det finns inget standardiserat test eller mätbar biomarkör för att bedöma etablerad eller bestående immunitet. Denna aspekt av studien är identisk med den patientbedömning som utförs enligt standarden för vård för melanompatienter. Återigen kommer alla publikationer av studieresultat att slutföras utan all information som kan användas för att identifiera patienter som ingår i studien.