Pretratamiento de lesiones cutáneas pigmentadas altamente sospechosas con interleucina-2 (IL-2)

Este estudio está diseñado principalmente para determinar si se puede generar inmunidad específica del tumor en pacientes con lesiones pigmentadas altamente sospechosas en respuesta a la IL-2 intralesional, y si esa inmunidad puede conferir resistencia a la metástasis del melanoma. Los pacientes serán identificados por dermatólogos calificados y las entrevistas se llevarán a cabo en la clínica de cirugía (Centro Dickson del cuarto piso) QEII HSC, NSHA.

El tiempo de espera estándar desde la consulta hasta la biopsia quirúrgica es de hasta 4 semanas. Los investigadores se asegurarán de que los pacientes sean atendidos inmediatamente después de la notificación del dermatólogo participante y que todos los componentes de investigación del estudio se completen dentro del tiempo de espera normalmente previsto. A través de la utilización de este tiempo de espera estándar, la IL-2 intralesional puede afectar potencialmente una respuesta inmunitaria, que de otro modo no podría lograrse después de completar la biopsia. Dado que el estudio se lleva a cabo dentro del tiempo de espera normal, no se desvía del estándar normal de atención. Siguiendo el protocolo del estudio, los pacientes recibirán inyecciones intralesionales el día 1 (visita de la semana 1) y el día 8 (visita de la semana 2), y se realizarán biopsias por escisión el día 15 (visita de la semana 3), dentro del tiempo de espera aceptado desde la consulta. a la biopsia. Las inyecciones intralesionales y la recolección de muestras biológicas más allá de la biopsia se desvían pero no retrasan el estándar de atención normal. Se requieren dos visitas adicionales además de la consulta inicial.

Este estudio es un estudio aleatorizado, controlado, doble ciego. Un algoritmo asignará aleatoriamente a los pacientes con lesiones pigmentadas altamente sospechosas a uno de dos grupos: 1) los pacientes del grupo de tratamiento recibirán tratamiento intralesional con IL-2 (Proleukin (Aldesleukin), Novartis Pharmaceuticals Canada Inc.) en una dosis de 500 000 International Unidades (UI) en 0,1 ml de solución salina esterilizada (0,9 %, m/v) para 2 ciclos de tratamiento con 1 semana de diferencia (Día 1 y Día 7); 2) los pacientes del grupo de control serán tratados intralesionalmente con solución salina esterilizada (0,9 %, m/v) del mismo volumen (0,1 ml). La aleatorización se generará mediante un algoritmo de bloques aleatorios para cada paciente, y la preparación de instrucciones para cada paciente se enviará a la farmacia. La farmacia obtendrá la IL-2 (Proleukin) de Novartis, y la pagará la cuenta de servicios de investigación de la Dra. Carman Giacomantonio. La farmacia recibirá instrucciones para preparar el tratamiento con IL-2 o el control inyectable (solución salina). La farmacia asignará una identificación codificada que se proporcionará junto con la jeringa con el nombre del paciente etiquetado como "Interleukin-2/Placebo" (por lo tanto, estudio ciego para el médico y el paciente). Como estudio piloto, el principio del diseño es probar la viabilidad de proceder a un ensayo más grande y más costoso siguiendo la metodología y el protocolo propuestos. Como tal, habrá un mínimo de 20 (10 de tratamiento, 10 de placebo) participantes (hasta un máximo de 60). Se estima que se alcanzará la significación estadística con 20 pacientes; sin embargo, si no se alcanza después de 20 pacientes, se inscribirán 10 pacientes adicionales (5 de tratamiento, 5 de control). Si aún no se alcanza la significación después de 30 pacientes, se inscribirán 10 pacientes adicionales y así sucesivamente hasta un máximo de 60 pacientes. Si después de 60 pacientes no se logra la significación, entonces no sería lógico realizar un reclutamiento adicional con el protocolo actual y, por lo tanto, sería necesario revisar la metodología o suspender el estudio.

En el día 1 (primer tratamiento) y 15 (biopsia por escisión), se tomarán muestras de sangre (4 viales) y orina (25-50 ml) de todos los pacientes. Se controlarán las reacciones locales a las inyecciones en busca de signos no específicos como sangrado, aritema, infección o irritación. Los investigadores no anticipan cambios específicos en la lesión pigmentada relacionados con la inyección en este breve período de tiempo, sin embargo, se anotarán todos los cambios.

El día 15, después de la segunda inyección intralesional, se realizará una biopsia por escisión siguiendo las técnicas quirúrgicas estándar, de la siguiente manera: se realizará una elipse de piel que abarque la lesión pigmentada que se extiende hacia la grasa subcutánea para lograr un margen de escisión macroscópicamente claro pero estrecho. Este pequeño defecto se cerrará principalmente con puntos sueltos. El espécimen de la biopsia se evaluará posteriormente utilizando técnicas histológicas estándar para confirmar diagnósticos, evaluar el estado del margen (limpio o comprometido) y la profundidad de la invasión de la lesión. La profundidad de la invasión de la lesión dictará la extensión de las escisiones quirúrgicas posteriores y la selección del margen de acuerdo con las pautas estándar de la Red Nacional Integral del Cáncer (NCCN). Las inyecciones intralesionales previas a la biopsia de 0,1 ml en la lesión no alterarán las dimensiones o la arquitectura de la lesión ni afectarán la extensión requerida por la biopsia posterior. Las lesiones que se consideren demasiado grandes para el cierre sin manipulación de tejido o creación de colgajos se someterán a una biopsia utilizando una técnica de muestreo de biopsia por punción mediante la cual se tomarán discos de tejido de 4 mm de diámetro de áreas representativas de la lesión para confirmar el diagnóstico y la profundidad de invasión. La profundidad de la invasión dictará el alcance y la complejidad de la cirugía posterior necesaria para extirpar la lesión y lograr márgenes claros de acuerdo con las pautas de la NCCN. La muestra biopsiada se procesará de la siguiente manera: con una aguja 22G se realizará una biopsia por aspiración con aguja fina (la aguja se pasará dos veces por el centro de la lesión) para el análisis de ARN. El resto del tejido se enviará a patología para una evaluación histológica estándar. El patólogo también informará la extensión de los linfocitos infiltrantes del tumor (TIL) observados asociados con el tratamiento en comparación con las inyecciones de control. La sangre y la orina se evaluarán mediante métodos metabalómicos y proteómicos para evaluar la respuesta inmunitaria sistémica al tratamiento.

Todas las muestras de biopsia de sangre, orina y lesiones se etiquetarán con un número codificado (no contendrán ninguna información de identificación del paciente) y se transportarán inmediatamente al laboratorio del Dr. Carman Giacomantonio en la Universidad de Dalhousie para su almacenamiento. Se evaluará la aspiración con aguja fina de las muestras extirpadas para determinar el perfil epigenético y genético del tumor. La sangre y la orina se evaluarán para perfiles proteómicos y metabolómicos, respectivamente.

Todos los participantes del estudio recibirán evaluaciones cada 4 meses durante 2 años y evaluaciones semestrales durante los años 3 a 5 después de la intervención inicial para evaluar la progresión de la enfermedad o el desarrollo de un nuevo melanoma, para comparar entre los grupos de tratamiento y control. No existe una prueba estandarizada o biomarcador medible para evaluar la inmunidad establecida o duradera. Este aspecto del estudio es idéntico a la evaluación del paciente realizada según el estándar de atención para pacientes con melanoma. Nuevamente, cualquier publicación de los resultados del estudio se completará sin ninguna información que pueda usarse para identificar a los pacientes incluidos en el estudio.