A MASH-hez társított vastagbél-polipok magas kockázatú transzkriptom molekuláris predikciós vizsgálata

I. Kutatási módszerek

1. Kutatási tartalom

1. Vegyünk fel 6 endoszkópos vastagbél-polyp kezelésre ütemezett kórházi beteget, köztük 3-at zsírmáj nélkül és 3-at MASH-szal. A vastagbél-tükrözéses kezelés során távolítsuk el teljesen a vastagbél-polypot, és küldjünk be egy részét szövetet egysejtes RNS szekvenálásos elemzésre.
2. Hozzunk létre egy MASH-kapcsolatos vastagbél-polyp kohorszot. Vegyünk fel 94 endoszkópos vastagbél-polyp kezelésre ütemezett kórházi beteget. Értékeljük a steatosis és májfibrosis mértékét FibroScan segítségével. Gyűjtsünk 2 ml maradék plazmát a felvételkor végzett rutin vérvizsgálatokból a klinikai laboratóriumból. Miután elérhetővé válnak a patológiai eredmények, kérjünk kölcsön 3 paraffin metszetet a patológiai osztályról a magas kockázatú transzkripciós molekula expresszió validálására.
3. Statisztikailag elemezzük a magas kockázatú transzkripciós molekulák expressziós szintjeit, és értékeljük kapcsolatukat a MASH-kapcsolatos vastagbél-polypokkal és diagnosztikai értéküket.

2. Vizsgálati eljárások:

1. Vegyünk fel vastagbél-tükrözéses polypeltávolításra ütemezett kórházi betegeket, 1-2 cm-es polyp mérettel.
2. Válasszuk ki a jogosult betegeket a beválasztási és kizárási kritériumok szerint, magyarázzuk el a konkrét vizsgálati protokollt, és szerezzen be tájékoztatott beleegyezést.
3. Rögzítsük a beteg alapvető információit, mint például: név, nem, életkor, etnikum, születési dátum, magasság, testsúly, első tünetek megjelenésének dátuma, kapcsolattartási információk (telefonszám, állandó lakcím).
4. Felvételkor kérdezzünk rá az elmúlt három hónapban készült máj ultrahang eredményeire, alkoholfogyasztási anamnézisre és vírusos hepatitis anamnézisre. Zsírmájjal rendelkező betegeknél végezzünk elasztográfiát a felvétel napján. A máj ultrahang jelentést nem tudó betegeknél végezzünk éhgyomori ultrahangot a felvétel második napján. Kategorizáljuk a betegeket a nem zsírmáj csoportba és a MASH csoportba a máj ultrahang, ultrahang elasztográfia eredményei és májfunkciós tesztek alapján.
5. Gyűjtsünk a lehető legrészletesebb anamnézist és releváns kiegészítő vizsgálati/laboratóriumi eredményeket. Rutin vérvizsgálatok, biokémia (ALT, AST, TBIL, TG, Ch, Glu, teljes fehérje, albumin), vérnyomás, BMI, hasi ultrahang és elasztográfia (FibroScan) kötelező tételek.
6. Az egysejtes RNS szekvenálásos kohorszban szereplő betegeknél végezzük el a vastagbél-tükrözéses kezelést a felvétel második napján. Válasszunk egy 1-2 cm-es adenomás polypot egysejtes RNS szekvenálásos elemzésre. A vastagbél-tükrözéses eljárás során távolítsuk el teljesen a polypot. Gyorsan öblítsük át a mintát egy öblítőtálban sóoldattal, hogy eltávolítsuk a vért és törmeléket, majd helyezzük száraz gézére. Használjunk steril skalpel penget a polyp függőleges tengely mentén történő kettévágásához. Vegyünk egy kb. mungóbab méretű darabot (kb. 0,5 cm) és küldjük el szekvenálásra. Küldjük be a maradék részt patológiai vizsgálatra a patológiai típus megerősítésére (biztosítsuk, hogy a beteg számára patológiai jelentés készüljön). Helyezzük a tesztelendő mintát egy 1 ml előhűtött szövetkonzerváló oldatot tartalmazó centrifugáló csőbe. Ellenőrizzük a szövetmintát és konzerváló oldatot tartalmazó centrifugáló csövet, hogy a szövetminta teljesen elmerüljön. Győződjünk meg arról, hogy a releváns minta információ egyértelműen meg van jelölve a cső külső felületén, és zárjuk le paraffilmnel. Helyezzük a centrifugáló csövet egy habszivacs dobozba, védő anyagokkal körülvéve. Szállítás előtt adjunk hozzá elegendő -20°C-os jégcsomagot a szállítás alatti alacsony hőmérsékletű környezet biztosításához, majd zárjuk le a dobozt és szállítsuk el aznap.
7. A MASH-kapcsolatos vastagbél-polyp kohorszban szereplő betegeknél fejezzük be a májfunkciós vérvizsgálatokat a felvétel napján. Gyűjtsünk 2 ml maradék plazmát a rutin tesztelés után a klinikai laboratóriumból, és tároljuk -80°C-on vagy annál alacsonyabb hőmérsékleten. Végezzük el a vastagbél-tükrözéses kezelést a felvétel második napján, és küldjük el a polypot patológiai biopsziára. Miután elérhetővé válnak a patológiai eredmények, kérjünk kölcsön 3 paraffin metszetet patológiailag adenomásként diagnosztizált polypokból a patológiai osztályról. A plazmát és patológiai metszeteket a magas kockázatú transzkripciós molekula expresszió validálására fogjuk használni.

II. Beválasztási és kizárási kritériumok

Beválasztási kritériumok:

1. A MAFLD diagnózisa megfelel a „Nem alkoholos eredetű zsírmájbetegség megelőzésére és kezelésére vonatkozó irányelveknek” (2018-as kiadás);
2. 18-70 éves férfi vagy női betegek;
3. Aláírt tájékoztatott beleegyezési nyilatkozat és a konkrét vizsgálati protokoll magyarázata.

Kizárási kritériumok:

1. Egyéb etiológiájú krónikus májbetegség (alkoholos, vírusos, autoimmun, gyógyszer-indukált stb.), dekompenzált májcirrhózis, primer májrák;
2. Egyéb létfontosságú szervek (szív, vese, tüdő stb.) alapbetegségei és vérzési rendellenességek;
3. Jogi cselekvőképességgel nem rendelkező személyek vagy rossz bepillantással rendelkezők. III. Kockázatok és mellékhatások A vizsgálók betartják a klinikai szabványokat és óvatosan működnek. [Súlyos szövődmények esetén aktív kezelést biztosítunk a klinikai rutin diagnosztikai és kezelési protokollok szerint, és ingyenes kezelést kínálunk]{.underline}. A vérvételből származó lehetséges problémák főként a punkciós hely lokalizált fájdalma, vérzés, duzzanat és fertőzés. Ezeket aktívan kezeljük a klinikai rutin szerint. A fájdalommentes elektronikus vastagbél-tükrözéses polypeltávolítás invazív eljárás, de rutin klinikai művelet. Lehetséges kockázatok és szövődmények közé tartozik a vérzés, perforáció, fertőzés, hasi fájdalom, puffadás, bélobstrukció, anesztézia balesetek stb.

IV. Kivonulási feltételek

1. Ha egy beteg súlyos mellékhatást vagy szövődményt tapasztal, amely azonnali kivonulást igényel a vizsgálatból, megfelelő kezelést és gondozást kap.
2. Ha egy beteg jelentős fizikai vagy pszichológiai kellemetlenséget tapasztal a vizsgálat során, amely megakadályozza a további részvételt, választhatja a kivonulást.
3. Ha egy beteg önként választja a vizsgálatból való kivonulást, tiszteletben tartjuk kívánságát, és szükséges támogatást és segítséget nyújtunk.
4. Ha előre nem látható kockázatok vagy problémák merülnek fel a vizsgálat során, amelyek lehetetlenné teszik a folytatást, a betegeknek engedélyezni kell a kivonulást.