Studio di Predizione Molecolare del Trascrittoma ad Alto Rischio dei Polipi Colorettali Associati a MASH

I. Metodi di Ricerca

1. Contenuto della Ricerca

1. Reclutare 6 pazienti ricoverati programmati per trattamento endoscopico di polipi colici, inclusi 3 senza steatosi epatica e 3 con MASH. Durante il trattamento colonscopico, rimuovere completamente il polipo colico e inviare una porzione del tessuto per analisi di sequenziamento RNA a singola cellula.
2. Stabilire una coorte di polipi colici associati a MASH. Reclutare 94 pazienti ricoverati programmati per trattamento endoscopico di polipi colici. Valutare il grado di steatosi e fibrosi epatica utilizzando FibroScan. Raccogliere 2 ml di plasma residuo dagli esami del sangue di routine eseguiti al momento del ricovero dal laboratorio clinico. Dopo la disponibilità dei risultati patologici, richiedere in prestito 3 sezioni in paraffina dal reparto di patologia per la validazione dell'espressione di molecole trascrizionali ad alto rischio.
3. Analizzare statisticamente i livelli di espressione delle molecole trascrizionali ad alto rischio e valutarne l'associazione con polipi colici correlati a MASH e il loro valore diagnostico.

2. Procedure dello Studio:

1. Reclutare pazienti ricoverati programmati per polipectomia colonscopica, con dimensioni dei polipi di 1-2 cm.
2. Selezionare pazienti idonei secondo i criteri di inclusione ed esclusione, spiegare il protocollo di studio specifico e ottenere il consenso informato.
3. Registrare le informazioni di base del paziente, come: nome, sesso, età, etnia, data di nascita, altezza, peso, data di insorgenza dei sintomi iniziali, informazioni di contatto (telefono, indirizzo permanente).
4. Al momento del ricovero, indagare sui risultati dell'ecografia epatica negli ultimi tre mesi, sulla storia di consumo di alcol e sulla storia di epatite virale. Per i pazienti con steatosi epatica, eseguire l'elastografia il giorno del ricovero. Per i pazienti che non possono fornire un referto di ecografia epatica, eseguire un'ecografia a digiuno il secondo giorno di ricovero. Classificare i pazienti nel gruppo senza steatosi epatica e nel gruppo MASH in base all'ecografia epatica, ai risultati dell'elastografia ecografica e agli esami di funzionalità epatica.
5. Raccogliere un'anamnesi il più dettagliata possibile e i risultati degli esami di laboratorio/ausiliari rilevanti. Esami del sangue di routine, biochimica (ALT, AST, TBIL, TG, Ch, Glu, proteine totali, albumina), pressione sanguigna, BMI, ecografia addominale ed elastografia (FibroScan) sono elementi obbligatori.
6. Per i pazienti arruolati nella coorte di sequenziamento RNA a singola cellula, eseguire il trattamento colonscopico il secondo giorno dopo il ricovero. Selezionare un polipo adenomatoso di 1-2 cm per l'analisi di sequenziamento RNA a singola cellula. Durante la procedura colonscopica, rimuovere completamente il polipo. Risciacquare rapidamente il campione in una ciotola da medicazione con soluzione fisiologica per rimuovere sangue e detriti, quindi posizionarlo su garza asciutta. Utilizzare una lama di bisturi sterile per sezionare il polipo lungo l'asse verticale. Prendere un pezzo di dimensioni approssimative di un fagiolo mungo (circa 0,5 cm) e inviarlo per il sequenziamento. Inviare la porzione rimanente per esame patologico per confermare il tipo patologico (assicurarsi che venga emesso un referto patologico per il paziente). Posizionare il campione per il test in una provetta da centrifuga contenente 1 ml di soluzione di conservazione del tessuto preraffreddata. Controllare la provetta da centrifuga contenente il campione di tessuto e la soluzione di conservazione per assicurarsi che il campione di tessuto sia completamente immerso. Verificare che le informazioni rilevanti sul campione siano chiaramente marcate sulla superficie esterna della provetta e sigillare con parafilm. Posizionare la provetta da centrifuga in una scatola di polistirolo, circondata da materiale ammortizzante per la protezione. Prima della spedizione, aggiungere sufficienti blocchi di ghiaccio a -20°C per garantire un ambiente a bassa temperatura durante il trasporto, quindi sigillare la scatola e spedire lo stesso giorno.
7. Per i pazienti arruolati nella coorte di polipi colici associati a MASH, completare gli esami del sangue di funzionalità epatica il giorno del ricovero. Raccogliere 2 ml di plasma residuo rimanente dopo i test di routine dal laboratorio clinico e conservare a -80°C o inferiore. Eseguire il trattamento colonscopico il secondo giorno dopo il ricovero e inviare il polipo per biopsia patologica. Dopo la disponibilità dei risultati patologici, richiedere in prestito 3 sezioni in paraffina di polipi diagnosticati patologicamente come adenomatosi dal reparto di patologia. Plasma e sezioni patologiche saranno utilizzati per la validazione dell'espressione di molecole trascrizionali ad alto rischio.

II. Criteri di Inclusione ed Esclusione

Criteri di Inclusione:

1. La diagnosi di MAFLD è conforme alle "Linee Guida per la Prevenzione e il Trattamento della Malattia del Fegato Grasso Non Alcolico" (Edizione 2018);
2. Pazienti di sesso maschile o femminile di età compresa tra 18 e 70 anni;
3. Firmato modulo di consenso informato e spiegazione del protocollo di studio specifico.

Criteri di Esclusione:

1. Malattia epatica cronica dovuta ad altre eziologie (alcolica, virale, autoimmune, indotta da farmaci, ecc.), cirrosi scompensata, carcinoma epatico primario;
2. Malattie di base di altri organi vitali (cuore, rene, polmone, ecc.) e disturbi della coagulazione;
3. Individui privi di capacità giuridica o con scarsa consapevolezza. III. Rischi ed Effetti Avversi I ricercatori aderiranno agli standard clinici e opereranno con cautela. [In caso di gravi complicanze, verrà fornita una gestione attiva secondo i protocolli clinici di routine di diagnosi e trattamento, e verrà offerto un trattamento gratuito]{.underline}. Problemi potenziali dai prelievi di sangue includono principalmente dolore locale nel sito di puntura, sanguinamento, gonfiore e infezione. Gestiremo questi attivamente secondo la routine clinica. La polipectomia colonscopica elettronica indolore è una procedura invasiva ma è un'operazione clinica di routine. Rischi e complicazioni potenziali includono sanguinamento, perforazione, infezione, dolore addominale, gonfiore, ostruzione intestinale, incidenti anestetici, ecc.

IV. Condizioni di Ritiro

1. Se un paziente manifesta una grave reazione avversa o complicanza che richiede il ritiro immediato dallo studio, riceverà un trattamento e cure appropriate.
2. Se un paziente manifesta un significativo disagio fisico o psicologico durante lo studio che gli impedisce di continuare la partecipazione, può scegliere di ritirarsi.
3. Se un paziente sceglie volontariamente di ritirarsi dallo studio, i suoi desideri saranno rispettati e verrà fornito il supporto e l'assistenza necessari.
4. Se durante lo studio sorgono rischi o problemi imprevisti che rendono impossibile continuare, i pazienti saranno autorizzati a ritirarsi.