Исследование молекулярного прогнозирования транскриптома высокого риска при MASH-ассоциированных колоректальных полипах

I. Методы исследования

1. Содержание исследования

1. Набрать 6 стационарных пациентов, запланированных на эндоскопическое лечение полипов толстой кишки, включая 3 без жировой болезни печени и 3 с MASH. Во время колоноскопического лечения полностью удалить полип толстой кишки и отправить часть ткани на анализ секвенирования РНК единичных клеток.
2. Создать когорту полипов толстой кишки, ассоциированных с MASH. Набрать 94 стационарных пациента, запланированных на эндоскопическое лечение полипов толстой кишки. Оценить степень стеатоза и фиброза печени с помощью FibroScan. Собрать 2 мл остаточной плазмы из рутинных анализов крови, выполненных при поступлении, из клинической лаборатории. После получения патологических результатов взять 3 парафиновых среза из патологического отделения для валидации экспрессии высокорисковых транскрипционных молекул.
3. Провести статистический анализ уровней экспрессии высокорисковых транскрипционных молекул и оценить их связь с полипами толстой кишки, связанными с MASH, и их диагностическую ценность.

2. Процедуры исследования:

1. Набрать стационарных пациентов, запланированных на колоноскопическую полипэктомию, с размерами полипов 1-2 см.
2. Отобрать подходящих пациентов в соответствии с критериями включения и исключения, объяснить конкретный протокол исследования и получить информированное согласие.
3. Записать основную информацию о пациенте, такую как: имя, пол, возраст, этническая принадлежность, дата рождения, рост, вес, дата появления первых симптомов, контактная информация (телефон, постоянный адрес).
4. При поступлении уточнить результаты УЗИ печени за последние три месяца, историю употребления алкоголя и историю вирусного гепатита. Для пациентов с жировой болезнью печени провести эластографию в день поступления. Для пациентов, которые не могут предоставить отчет УЗИ печени, провести УЗИ натощак на второй день после поступления. Классифицировать пациентов на группу без жировой болезни печени и группу MASH на основе УЗИ печени, результатов ультразвуковой эластографии и функциональных проб печени.
5. Собрать как можно более подробный медицинский анамнез и соответствующие результаты вспомогательных обследований/лабораторных анализов. Рутинные анализы крови, биохимия (АЛТ, АСТ, общий билирубин, триглицериды, холестерин, глюкоза, общий белок, альбумин), артериальное давление, ИМТ, УЗИ брюшной полости и эластография (FibroScan) являются обязательными пунктами.
6. Для пациентов, включенных в когорту секвенирования РНК единичных клеток, провести колоноскопическое лечение на второй день после поступления. Выбрать аденоматозный полип размером 1-2 см для анализа секвенирования РНК единичных клеток. Во время колоноскопической процедуры полностью удалить полип. Быстро промыть образец в перевязочной чашке физиологическим раствором для удаления крови и загрязнений, затем поместить на сухую марлю. Использовать стерильное лезвие скальпеля, чтобы разрезать полип вдоль вертикальной оси пополам. Взять кусочек примерно размером с фасоль маш (около 0,5 см) и отправить на секвенирование. Отправить оставшуюся часть на патологическое исследование для подтверждения патологического типа (обеспечить выдачу патологического отчета для пациента). Поместить образец для тестирования в центрифужную пробирку, содержащую 1 мл предварительно охлажденного раствора для сохранения ткани. Проверить центрифужную пробирку, содержащую образец ткани и раствор для сохранения, чтобы убедиться, что образец ткани полностью погружен. Убедиться, что соответствующая информация об образце четко обозначена на внешней поверхности пробирки, и запечатать парафильмом. Поместить центрифужную пробирку в пенопластовый ящик, окружив амортизирующим материалом для защиты. Перед отправкой добавить достаточное количество охлаждающих элементов при -20°C, чтобы обеспечить низкотемпературную среду во время транспортировки, затем запечатать ящик и отправить в тот же день.
7. Для пациентов, включенных в когорту полипов толстой кишки, ассоциированных с MASH, выполнить анализы крови на функцию печени в день поступления. Собрать 2 мл остаточной плазмы, оставшейся после рутинного тестирования из клинической лаборатории, и хранить при -80°C или ниже. Провести колоноскопическое лечение на второй день после поступления и отправить полип на патологическую биопсию. После получения патологических результатов взять 3 парафиновых среза полипов, патологически диагностированных как аденоматозные, из патологического отделения. Плазма и патологические срезы будут использованы для валидации экспрессии высокорисковых транскрипционных молекул.

II. Критерии включения и исключения

Критерии включения:

1. Диагноз MAFLD соответствует «Руководству по профилактике и лечению неалкогольной жировой болезни печени» (издание 2018 года);
2. Пациенты мужского или женского пола в возрасте 18-70 лет;
3. Подписанная форма информированного согласия и объяснение конкретного протокола исследования.

Критерии исключения:

1. Хроническое заболевание печени из-за других этиологий (алкогольное, вирусное, аутоиммунное, лекарственное и т.д.), декомпенсированный цирроз, первичный рак печени;
2. Фоновые заболевания других жизненно важных органов (сердце, почки, легкие и т.д.) и нарушения свертываемости крови;
3. Лица, не обладающие дееспособностью, или с плохой инсайт-способностью. III. Риски и побочные эффекты Исследователи будут придерживаться клинических стандартов и действовать осторожно. [В случае серьезных осложнений будет предоставлено активное лечение в соответствии с клиническими рутинными протоколами диагностики и лечения, и будет предложено бесплатное лечение]{.underline}. Потенциальные проблемы при заборе крови в основном включают местную боль в месте пункции, кровотечение, отек и инфекцию. Мы будем активно управлять этим в соответствии с клинической рутиной. Безболезненная электронная колоноскопическая полипэктомия является инвазивной процедурой, но это рутинная клиническая операция. Потенциальные риски и осложнения включают кровотечение, перфорацию, инфекцию, боль в животе, вздутие, кишечную непроходимость, анестезиологические инциденты и т.д.

IV. Условия прекращения участия

1. Если у пациента возникает серьезная нежелательная реакция или осложнение, требующее немедленного выхода из исследования, ему будет предоставлено соответствующее лечение и уход.
2. Если пациент испытывает значительный физический или психологический дискомфорт во время исследования, который не позволяет ему продолжать участие, он может выбрать выход.
3. Если пациент добровольно выбирает выход из исследования, его пожелания должны быть уважены, и предоставлена необходимая поддержка и помощь.
4. Если во время исследования возникают непредвиденные риски или проблемы, которые делают продолжение невозможным, пациентам должно быть разрешено выйти.