Uno studio clinico prospettico che valuta gli effetti dell'antibiotico tetraciclina sul film lacrimale e sulla composizione lipidica lacrimale all'interno di una popolazione di pazienti con diagnosi di blefarite e malattia dell'occhio secco

Le disfunzioni del film lacrimale, diagnosticate collettivamente come sindrome dell'occhio secco e distrofia delle ghiandole di Meibomio (MGD), affliggono milioni di individui in tutto il mondo, più di 10 milioni solo negli Stati Uniti. Tipicamente, i sintomi includono bruciore oculare, sensazione di corpo estraneo, fotofobia, arrossamento e altri sintomi che provocano disagio cronico generale nei pazienti. Gli analoghi della tetraciclina, come la minociclina, hanno dimostrato efficacia nel trattamento della meibomianite primaria, un tipo di blefarite cronica e sono stati prescritti ai pazienti per qualche tempo. È stato dimostrato che la tetraciclina può inibire l'attività della lipasi e quindi diminuire il rilascio di acidi grassi liberi nocivi. La tetraciclina inibisce anche l'attività della lipasi batterica in vitro e ha altri effetti. Abbiamo studiato le associazioni tra blefarite cronica e lipidi della ghiandola di Meibomio palpebrale e microflora per un certo numero di anni e abbiamo scoperto importanti relazioni tra questi lipidi e gli stati di malattia della blefarite cronica. A causa della sua elevata concentrazione 12 ore dopo la somministrazione, della bassa clearance renale, della lunga emivita e dell'alto livello di legame con le proteine ​​sieriche, la minociclina è stata suggerita come una buona opzione terapeutica. Lo studio propone di determinare l'effetto del trattamento orale con analoghi della tetraciclina sul film lacrimale e sulla composizione lipidica lacrimale all'interno di una popolazione di pazienti con diagnosi di malattia dell'occhio secco e disfunzione della ghiandola di Meibomio.

I pazienti con diagnosi di sindrome dell'occhio secco e distrofia delle ghiandole di Meibomio (MGD) saranno selezionati per partecipare a uno studio clinico: visita al basale, 1 mese dopo l'inizio del trattamento, 3 mesi dopo l'inizio del trattamento e 3 mesi dopo l'interruzione di trattamento.

Una volta valutati e qualificati per partecipare alla sperimentazione, i partecipanti saranno sottoposti ai seguenti test durante ogni visita:

I. Valutazione oculare di segni e sintomi II. Evaporometria III. Fluorofotometria IV. Test di Schirmers V. TBUT VI. Batteriologia VII. Transilluminazione e Meibografia VIII. Espressione della ghiandola di Meibomio e analisi dei lipidi

Dopo il completamento della visita di base, a ciascun paziente verrà somministrato un regime di 2 settimane di una dose di 50 mg di Minociclina seguito da una fornitura di 10 settimane di 100 mg di Minociclina da assumere ogni giorno dopo la colazione. Inoltre, possono continuare a utilizzare lacrime artificiali e trattamenti aggiuntivi come prescritto dai loro medici curanti.

I. Valutazione oculare La sintomatologia dei pazienti così come i risultati diagnostici dei valutatori saranno registrati e rivisti in dettaglio prima dell'ingresso del paziente nello studio. Questi includono l'acuità visiva, la biomicroscopia di palpebre/ciglia, congiuntiva e cornea. Inoltre, la colorazione corneale e congiuntivale sarà eseguita con l'uso di due coloranti colorati: verde di lissamina e fluoresceina. Inoltre, l'investigatore registrerà qualsiasi patologia con la lente, l'iride e la pupilla naturali dei pazienti.

II. Evaporometro: flusso evaporativo e contributo al turnover Un evaporometro utilizza una pompa per dirigere l'aria attraverso un tubo di essiccazione (Hammond Drierite, Xenia, OH) in un occhialino. La maschera contenente un rilevatore di vapore acqueo e un monitor della temperatura è posizionata saldamente sopra l'occhio. L'aria pompata passa nella maschera, riducendo l'umidità al 15%, momento in cui la pompa viene spenta. L'aumento di umidità dovuto all'evaporazione dalla pelle o all'evaporazione delle lacrime viene misurato e memorizzato in un computer. Il processo viene eseguito prima con le palpebre chiuse e poi con le stesse aperte; la differenza è il tasso di evaporazione lacrimale. L'area della superficie oculare interpalpebrale viene utilizzata per calcolare l'evaporazione per unità di area; l'immagine dell'area viene catturata con l'utilizzo di una fotocamera digitale e calcolata direttamente con l'ausilio di software per computer (ADOBE Photoshop, versione 6.0.1.2001, Sistemi ADOBE e San Jose, California). Il deflusso evaporativo come percentuale del volume lacrimale disponibile sarà calcolato dal tasso di aumento dell'umidità relativa all'interno della maschera con l'occhio aperto meno il contributo evaporativo della pelle dell'occhio chiuso all'interno della maschera.

Il contributo evaporativo al turnover sarà calcolato come deflusso evaporativo per volume lacrimale disponibile al minuto diviso per il turnover lacrimale.

III. Fluorofotometro: Volume lacrimale, flusso e turnover La fluorescenza di fondo sarà determinata prima dell'instillazione di 0,5 microlitri di fluoresceina di sodio allo 0,5% sulla superficie oculare. Utilizzando un fluorofotometro (Fluorotron Master, Ocumetrics, Mountain View, CA), verranno prese otto misurazioni da ciascun occhio per determinare la fluorescenza lacrimale. Le prime due misurazioni verranno eseguite a distanza di un minuto e le misurazioni successive verranno ripetute con intervalli di tre minuti fino al completamento a 19 minuti. Questi dati verranno analizzati per calcolare il volume lacrimale, il flusso e il turnover lacrimale.

IV. Test di Schirmers: misurazione quantitativa lacrimale eseguita con e senza gocce anestetiche. Uno stoppino di carta comunemente usato verrà posizionato tra il bulbo oculare e il terzo esterno del cul-de-sac della palpebra inferiore per misurare quantitativamente la produzione di lacrime. Questo test richiede in genere 5 minuti per essere eseguito.

V. Tempo di rottura lacrimale - Valutazione quantitativa/qualitativa delle macchie secche corneali e congiuntivali (cellule epiteliali superficiali devitalizzate) Una goccia di fluoresceina verrà instillata in entrambi gli occhi del paziente. Al paziente verrà chiesto di battere le palpebre normalmente affinché il colorante si diffonda uniformemente nell'occhio. Una volta completato, al paziente verrà chiesto di battere le palpebre una volta e tenere gli occhi aperti mentre il valutatore utilizza un cronometro per registrare il numero di secondi necessari per la rottura del film lacrimale. Questo è uno strumento che consente all'esaminatore di valutare la qualità del film lacrimale. Il TBUT del paziente di controllo normale è di 10-12 secondi mentre il TBUT del paziente con occhio secco è inferiore a 2 secondi.

VI. Batteriologia - Valutazione della microflora palpebrale Campioni di microflora palpebrale e congiuntivale di ciascun occhio saranno prelevati separatamente con un tampone di alginato di calcio immerso in una soluzione salina allo 0,9%. Dopo aver strisciato il tampone su diverse piastre (agar sangue, agar cioccolato e agar sangue brucella ridotto), verrà posto in una provetta di tioglicolato per la valutazione batteriologica.

VII. Transilluminazione e Meibografia - Valutazione quantitativa della produzione di lipidi della ghiandola di Meibomio della palpebra inferiore Una ghiandola escretrice, il ruolo principale delle ghiandole di Meibomio è quello di produrre e secernere lipidi nel film lacrimale. Lo scopo di questo test è determinare quantitativamente il numero di ghiandole della palpebra inferiore che sono produttori funzionali di lipidi. Verrà utilizzato un transilluminatore (luce muscolare) con una punta di dispersione della luce per illuminare le ghiandole. La piccola banda di luce transillumina le palpebre inferiori invertite dei pazienti. Con l'uso di una fotocamera digitale, verrà scattata una foto per valutare le ghiandole vitali da drop-out (ghiandole non produttive). Ciò si ottiene con un frame grabber abbinato a una telecamera a infrarossi con scanner progressivo Hitachi KP-F2A montata su un microscopio con lampada a fessura. Le immagini verranno acquisite e archiviate con l'uso di software di imaging.

VIII. Espressione della ghiandola di Meibomio e analisi dei lipidi - I campioni delle palpebre inferiori e superiori saranno raccolti e analizzati per la loro composizione biochimica Con l'uso di un conformatore oculare e di un applicatore con punta di cotone, i campioni dei lipidi della ghiandola di Meibomio del coperchio superiore e inferiore saranno raccolti e valutati per marcare -su