La maturazione in vitro degli ovociti è influenzata dall'origine delle gonadotropine utilizzate nel terreno di maturazione: c'è una differenza di efficienza quando si utilizza l'ormone follicolo-stimolante prodotto urinario rispetto a quello ricombinante e la gonadotropina corionica umana (IVM-FSHhCG)

La maturazione in vitro è un'opzione valida per i pazienti con PCO(S) nella clinica ART quotidiana, tuttavia la maturazione e lo sviluppo embriologico non corrispondono ancora ai livelli di efficienza ottenuti dal trattamento COS standard (Ho et al. 2019). Per migliorare ulteriormente la qualità dell'embrione dopo l'IVM, i terreni e gli integratori dovrebbero essere efficienti, sicuri e puri. È stato descritto che una soglia di attività dell'FSH è necessaria per la maturazione nella IVM umana (Cadenas et al. 2021), ma l'hCG potrebbe essere ridondante (Ge et al 2008).

Fino ad ora, i ricercatori hanno utilizzato gonadotropine derivate urinarie altamente purificate per integrare i media IVM. Tuttavia negli ultimi decenni sono disponibili più prodotti ricombinanti e caratterizzati in modo approfondito. Nella ART, sia gli ormoni di derivazione urinaria che quelli ricombinanti vengono utilizzati per indurre la crescita di più follicoli e l'ovulazione in un ciclo di stimolazione ovarica. A causa della paura della trasmissione di agenti patogeni (anche se non ancora documentata) e dell'intolleranza causata da contaminanti, i prodotti ricombinanti sono spesso preferiti in clinica, senza indicazioni di differenze di efficacia e sicurezza (Nahuis 2009). In un saggio biologico in vitro, le proteine ​​contaminanti possono alterare le risposte biologiche con effetti indesiderati. uFSH è documentato per contenere ad es. Proteina 1 legante il fattore di crescita insulino-simile (IGFBP7), che può inibire la produzione di estrogeni, e neurotossina derivata da eosinofili (EDN), con noti effetti inibitori sulla maturazione degli ovociti di topo (Bassett 2009). Pertanto è importante in un sistema in vitro utilizzare prodotti con la massima purezza disponibile.

Inoltre la sialilazione degli oligosaccaridi è diversa a seconda del metodo di produzione, alterando l'acidità e quindi l'emivita nel corpo, ma soprattutto per un sistema in vitro, anche la potenza di legame del recettore (Bassett 2009, Riccetti 2017).

Quindi, prima di cambiare il nostro sistema standard per un'alternativa teoricamente migliore, i ricercatori devono testare l'efficienza degli ormoni ricombinanti rispetto agli ormoni urinari usati abitualmente in termini di efficienza di maturazione degli ovociti nel sistema di maturazione in vitro.

Saranno inclusi i pazienti con PCOS idonei per un ciclo IVM per il trattamento dell'infertilità. Le pazienti riceveranno un protocollo di stimolazione ovarica lieve, identico al nostro programma di cura IVM standard.

Gli investigatori condurranno uno studio di non inferiorità per l'efficienza di maturazione degli ovociti con un limite del 10%, un livello di significatività del 5% e una potenza dell'80%, portando a una dimensione del campione di 618 ovociti. I ricercatori stimano che ciò si otterrà se 35 pazienti saranno inclusi nello studio.

Dopo la sala operatoria, i fluidi follicolari contenenti COC vengono filtrati su un filtro a rete da 70 µm per eliminare le cellule del sangue contaminanti e quindi visualizzare il COC. Il primo COC rilevato sarà trasferito in una goccia di lavaggio di una piastra a 4 pozzetti, il secondo COC sarà conservato nella seconda goccia di lavaggio della piastra a 4 pozzetti, … Secondo l'elenco di randomizzazione, il COC nella prima goccia di la piastra a 4 pozzetti sarà assegnata all'IVM standard o sperimentale. L'elenco di randomizzazione è generato con www.sealedenvelope.com.

Gli ovociti maturi saranno fecondati mediante Intracytoplasmic Sperm Injection (ICSI) e la fecondazione e lo sviluppo embriologico saranno registrati. Gli embrioni di qualità sufficiente il giorno 3 saranno vetrificati per un trasferimento embrionale vetrificato/riscaldato differito.