Влияет ли на созревание ооцитов in vitro происхождение гонадотропинов, используемых в среде созревания: есть ли разница в эффективности при использовании мочевого по сравнению с рекомбинантным фолликулостимулирующим гормоном и хорионическим гонадотропином человека (IVM-FSHhCG)

Созревание in vitro является подходящим вариантом для пациентов с поликистозом яичников (С) в ежедневной клинике ВРТ, однако созревание и эмбриологическое развитие еще не соответствуют уровням эффективности, достигаемым при стандартном лечении COS (Ho et al. 2019). Для дальнейшего повышения качества эмбрионов после IVM среды и добавки должны быть эффективными, безопасными и чистыми. Было описано, что порог активности ФСГ необходим для созревания IVM человека (Cadenas et al. 2021), но ХГЧ может быть избыточным (Ge et al 2008).

До сих пор исследователи использовали высокоочищенные гонадотропины, полученные из мочи, в качестве дополнения к средам IVM. Однако в последние десятилетия стало доступно и тщательно охарактеризовано больше рекомбинантных продуктов. В ВРТ как гормоны, полученные с мочой, так и рекомбинантные гормоны используются для индукции роста множественных фолликулов и овуляции в цикле стимуляции яичников. Из-за опасений передачи патогенов (хотя это еще не подтверждено документально) и непереносимости, вызванной контаминантами, в клинике часто отдают предпочтение рекомбинантным продуктам без каких-либо признаков различий в эффективности и безопасности (Nahuis 2009). В биоанализе in vitro загрязняющие белки могут изменить биологические реакции с нежелательными эффектами. Документально подтверждено, что uFSH содержит, например, Белок 1, связывающий инсулиноподобный фактор роста (IGFBP7), который может ингибировать выработку эстрогена, и нейротоксин эозинофильного происхождения (EDN) с известным ингибирующим действием на созревание ооцитов мыши (Bassett 2009). Следовательно, в системе in vitro важно использовать продукты с наивысшей доступной чистотой.

Кроме того, сиалирование олигосахаридов различается в зависимости от метода производства, изменяя кислотность и, таким образом, период полураспада в организме, но, что более важно для системы in vitro, также способность связывать рецепторы (Bassett 2009, Riccetti 2017).

Следовательно, прежде чем менять нашу стандартную систему на теоретически лучшую альтернативу, исследователи должны проверить эффективность рекомбинантных гормонов по сравнению с обычно используемыми мочевыми гормонами с точки зрения эффективности созревания ооцитов в системе созревания in vitro.

Пациенты с СПКЯ, имеющие право на цикл IVM для лечения бесплодия, будут включены. Пациенты получат протокол мягкой стимуляции яичников, идентичный нашей стандартной программе ухода за IVM.

Исследователи проведут исследование не меньшей эффективности для эффективности созревания ооцитов с пределом 10%, уровнем значимости 5% и мощностью 80%, что приведет к размеру выборки 618 ооцитов. По оценкам исследователей, это будет получено, если в исследование будет включено 35 пациентов.

После операционной жидкости фолликулов, содержащие КОК, фильтруют через сетчатый фильтр с размером ячеек 70 мкм, чтобы удалить загрязняющие клетки крови и тем самым визуализировать КОК. Первый обнаруженный КОК будет перенесен в промывную каплю 4-луночной чашки, второй КОК будет сохранен во второй промывной капле 4-луночной чашки, … Согласно списку рандомизации, КОК в первой капле блюдо с 4 лунками будет отнесено к стандартной или экспериментальной IVM. Список рандомизации генерируется на сайте www.sealedenvelope.com.

Зрелые ооциты будут оплодотворены с помощью интрацитоплазматической инъекции сперматозоидов (ИКСИ), а оплодотворение и эмбриологическое развитие будут зарегистрированы. Эмбрионы достаточного качества на 3-й день будут витрифицированы для отсроченного переноса витрифицированных/теплых эмбрионов.