Wird die in-vitro-Reifung von Oozyten durch den Ursprung der im Reifungsmedium verwendeten Gonadotropine beeinflusst: Gibt es einen Unterschied in der Effizienz bei der Verwendung von Urin- versus rekombinant produziertem follikelstimulierendem Hormon und humanem Choriongonadotropin? (IVM-FSHhCG)

Die In-vitro-Reifung ist eine gültige Option für PCO(S)-Patienten in der täglichen ART-Klinik, jedoch erreichen Reifung und embryologische Entwicklung noch nicht die Effizienzniveaus, die durch eine Standard-COS-Behandlung erreicht werden (Ho et al. 2019). Um die Embryoqualität nach IVM weiter zu verbessern, sollten Medien und Nahrungsergänzungsmittel effizient, sicher und rein sein. Es wurde beschrieben, dass eine Schwelle der FSH-Aktivität für die Reifung in menschlicher IVM erforderlich ist (Cadenas et al. 2021), hCG jedoch möglicherweise überflüssig ist (Ge et al. 2008).

Bisher haben die Forscher hochgereinigte, aus dem Urin stammende Gonadotropine verwendet, um IVM-Medien zu ergänzen. In den letzten Jahrzehnten sind jedoch mehr rekombinante Produkte verfügbar und gründlich charakterisiert worden. Bei der ART werden sowohl aus dem Urin stammende als auch rekombinant produzierte Hormone verwendet, um multiples Follikelwachstum und Ovulation in einem ovariellen Stimulationszyklus zu induzieren. Aus Angst vor Übertragung von Krankheitserregern (allerdings noch nicht dokumentiert) und Unverträglichkeiten durch Kontaminanten werden in der Klinik häufig rekombinante Produkte bevorzugt, ohne dass es Hinweise auf Unterschiede in Wirksamkeit und Sicherheit gibt (Nahuis 2009). In einem In-vitro-Bioassay können kontaminierende Proteine ​​biologische Reaktionen mit unerwünschten Wirkungen verändern. uFSH ist dokumentiert, um z.B. Insulin-like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP7), das die Östrogenproduktion hemmen kann, und Eosinophil Derived Neurotoxin (EDN) mit bekannten hemmenden Wirkungen auf die Oozytenreifung der Maus (Bassett 2009). Daher ist es in einem In-vitro-System wichtig, Produkte mit der höchsten verfügbaren Reinheit zu verwenden.

Darüber hinaus ist die Oligosaccharid-Sialylierung je nach Herstellungsverfahren unterschiedlich, was den Säuregehalt und damit die Halbwertszeit im Körper verändert, aber wichtiger für ein in vitro System auch die Rezeptorbindungsstärke (Bassett 2009, Riccetti 2017).

Daher müssen die Forscher, bevor sie unser Standardsystem gegen eine theoretisch bessere Alternative austauschen, die Effizienz rekombinanter Hormone im Vergleich zu den routinemäßig verwendeten Urinhormonen in Bezug auf die Oozytenreifungseffizienz im In-vitro-Reifungssystem testen.

PCOS-Patienten, die für einen IVM-Zyklus zur Behandlung von Unfruchtbarkeit in Frage kommen, werden eingeschlossen. Die Patientinnen erhalten ein mildes ovarielles Stimulationsprotokoll, das mit unserem Standard-IVM-Versorgungsprogramm identisch ist.

Die Prüfärzte werden eine Nichtunterlegenheitsstudie zur Oozytenreifungseffizienz mit einer Grenze von 10 %, einem Signifikanzniveau von 5 % und einer Power von 80 % durchführen, was zu einer Stichprobengröße von 618 Oozyten führt. Die Forscher schätzen, dass dies erreicht wird, wenn 35 Patienten in die Studie aufgenommen werden.

Nach dem OP werden Follikelflüssigkeiten, die COC enthalten, über einen 70-µm-Maschenfilter filtriert, um kontaminierende Blutzellen zu entfernen und dadurch das COC sichtbar zu machen. Das zuerst detektierte COC wird in einen Waschtropfen einer 4-Well-Schale überführt, das zweite COC wird im zweiten Waschtropfen der 4-Well-Schale aufbewahrt, … Laut Randomisierungsliste ist das COC im ersten Tropfen von die 4-Well-Schale wird dem Standard- oder experimentellen IVM zugeordnet. Die Randomisierungsliste wird mit www.sealedenvelope.com generiert.

Reife Eizellen werden durch intrazytoplasmatische Spermieninjektion (ICSI) befruchtet und die Befruchtung und embryologische Entwicklung werden aufgezeichnet. Embryonen von ausreichender Qualität an Tag 3 werden für einen verzögerten Transfer von vitrifizierten/erwärmten Embryonen vitrifiziert.