Vaikuttaako munasolujen in vitro -kypsymiseen kypsytysväliaineessa käytettyjen gonadotropiinien alkuperä: onko tehokkuudessa eroa, kun käytetään virtsan ja yhdistelmä-DNA-tekniikalla tuotettua follikkelia stimuloivaa hormonia ja ihmisen koriongonadotropiinia (IVM-FSHhCG)

In vitro -kypsytys on kelvollinen vaihtoehto PCO(S)-potilaille päivittäisessä ART-klinikalla, mutta kypsyminen ja alkion kehitys eivät vielä vastaa normaalilla COS-hoidolla saavutettuja tehokkuustasoja (Ho et al. 2019). Alkion laadun parantamiseksi edelleen IVM:n jälkeen elatusaineiden ja lisäravinteiden tulee olla tehokkaita, turvallisia ja puhtaita. On kuvattu, että FSH-aktiivisuuden kynnys on välttämätön kypsymiselle ihmisen IVM:ssä (Cadenas et al. 2021), mutta hCG saattaa olla tarpeeton (Ge et al 2008).

Tähän asti tutkijat ovat käyttäneet erittäin puhdistettuja virtsasta peräisin olevia gonadotropiineja täydentämään IVM-alustaa. Viime vuosikymmeninä on kuitenkin saatavilla enemmän rekombinanttituotteita, jotka on karakterisoitu perusteellisesti. ART:ssa sekä virtsasta peräisin olevia että yhdistelmä-DNA-tekniikalla tuotettuja hormoneja käytetään useiden follikkelien kasvun ja ovulaation indusoimiseen munasarjojen stimulaatiosyklissä. Patogeenien leviämisen (vaikkakaan ei vielä dokumentoitu) ja kontaminanttien aiheuttaman intoleranssin pelon vuoksi klinikalla suositaan usein yhdistelmä-DNA-tekniikalla valmistettuja tuotteita, joilla ei ole viitteitä tehokkuuden ja turvallisuuden eroista (Nahuis 2009). In vitro -biomäärityksessä kontaminoivat proteiinit voivat muuttaa biologisia vasteita ja aiheuttaa ei-toivottuja vaikutuksia. uFSH:n on dokumentoitu sisältävän mm. Insuliinin kaltainen kasvutekijää sitova proteiini 1 (IGFBP7), joka voi estää estrogeenin tuotantoa, ja eosinofiilistä johdettu neurotoksiini (EDN), jolla on tunnetusti estäviä vaikutuksia hiiren munasolujen kypsymiseen (Bassett 2009). Tästä syystä in vitro -järjestelmässä on tärkeää käyttää tuotteita, joiden puhtausaste on korkein saatavilla.

Lisäksi oligosakkaridien sialylaatio on erilaista tuotantomenetelmästä riippuen, mikä muuttaa happamuutta ja siten puoliintumisaikaa kehossa, mutta mikä tärkeämpää in vitro -järjestelmälle, myös reseptorisitoutumiskykyä (Bassett 2009, Riccetti 2017).

Siksi, ennen kuin muutamme standardijärjestelmäämme teoreettisesti parempaan vaihtoehtoon, tutkijoiden on testattava rekombinanttihormonien tehokkuutta verrattuna rutiininomaisesti käytettyihin virtsahormoneihin munasolujen kypsymistehokkuuden suhteen in vitro -kypsymisjärjestelmässä.

PCOS-potilaat, jotka ovat kelvollisia IVM-sykliin lapsettomuuden hoitoon, otetaan mukaan. Potilaat saavat lievän munasarjojen stimulaatioprotokollan, joka on identtinen tavallisen IVM-hoito-ohjelman kanssa.

Tutkijat tekevät non-inferiority-tutkimuksen munasolujen kypsymistehokkuudesta rajalla 10 %, merkitsevyystasolla 5 % ja teholla 80 %, jolloin näytteen koko on 618 munasolua. Tutkijat arvioivat, että tämä saadaan, jos 35 potilasta otetaan mukaan tutkimukseen.

OR:n jälkeen COC:tä sisältävät follikkelien nesteet suodatetaan 70 µm mesh-suodattimen läpi kontaminoituvien verisolujen poistamiseksi ja siten COC:n visualisoimiseksi. Ensimmäinen havaittu COC siirretään 4-kuoppaisen maljan pesupisaraan, toinen COC säilytetään 4-kuoppaisen maljan toisessa pesupisarassa, … Satunnaistusluettelon mukaan COC:n ensimmäisessä pisarassa. 4-kuoppainen malja osoitetaan standardi- tai kokeelliselle IVM:lle. Satunnaistuslista luodaan osoitteessa www.sealedenvelope.com.

Kypsät munasolut hedelmöitetään intrasytoplasmisella siittiöinjektiolla (ICSI) ja hedelmöitys ja alkion kehitys kirjataan. Riittävän laadukkaat alkiot päivänä 3 lasitetaan lykättyä lasitettua/lämmitettyä alkionsiirtoa varten.