A maturação in vitro dos oócitos é influenciada pela origem das gonadotrofinas usadas no meio de maturação: há diferença na eficiência ao usar o hormônio folículo estimulante produzido na urina versus o recombinante e a gonadotrofina coriônica humana (IVM-FSHhCG)

A maturação in vitro é uma opção válida para pacientes com PCO(S) na clínica diária de ART, no entanto, a maturação e o desenvolvimento embriológico ainda não correspondem aos níveis de eficiência obtidos pelo tratamento padrão de COS (Ho et al. 2019). Para melhorar ainda mais a qualidade do embrião após IVM, os meios e suplementos devem ser eficientes, seguros e puros. Foi descrito que um limiar de atividade de FSH é necessário para a maturação em IVM humana (Cadenas et al. 2021), mas hCG pode ser redundante (Ge et al 2008).

Até agora, os investigadores têm usado gonadotrofinas derivadas da urina altamente purificadas para complementar a mídia IVM. No entanto, nas últimas décadas, mais produtos recombinantes estão disponíveis e completamente caracterizados. Na ART, hormônios derivados da urina e produzidos recombinante são usados ​​para induzir o crescimento de múltiplos folículos e a ovulação em um ciclo de estimulação ovariana. Devido ao medo da transmissão de patógenos (embora ainda não documentada) e da intolerância causada por contaminantes, os produtos recombinantes são frequentemente preferidos na clínica, sem indicações de diferenças em eficácia e segurança (Nahuis 2009). Em um bioensaio in vitro, as proteínas contaminantes podem alterar as respostas biológicas com efeitos indesejados. uFSH está documentado para conter, e. Proteína 1 de ligação ao fator de crescimento semelhante à insulina (IGFBP7), que pode inibir a produção de estrogênio, e Neurotoxina Derivada de Eosinófilos (EDN), com efeitos inibidores conhecidos na maturação de oócitos de camundongos (Bassett 2009). Portanto, é importante em um sistema in vitro usar produtos com a mais alta pureza disponível.

Além disso, a sialilação de oligossacarídeos é diferente dependendo do método de produção, alterando a acidez e, portanto, a meia-vida no corpo, mas mais importante para um sistema in vitro, também a potência de ligação ao receptor (Bassett 2009, Riccetti 2017).

Portanto, antes de mudar nosso sistema padrão para uma alternativa teoricamente melhor, os pesquisadores precisam testar a eficiência dos hormônios recombinantes em comparação com os hormônios urinários usados ​​rotineiramente em termos de eficiência de maturação do oócito no sistema de maturação in vitro.

Pacientes com SOP elegíveis para um ciclo IVM para tratar a infertilidade serão incluídos. As pacientes receberão um protocolo leve de estimulação ovariana, idêntico ao nosso programa padrão de cuidados IVM.

Os investigadores realizarão um estudo de não inferioridade para eficiência de maturação oocitária com limite de 10%, nível de significância de 5% e poder de 80%, levando a um tamanho de amostra de 618 oócitos. Os investigadores estimam que isso será obtido se 35 pacientes forem incluídos no estudo.

Após a cirurgia, os fluidos foliculares contendo COC são filtrados em um filtro de malha de 70 µm para eliminar as células sanguíneas contaminantes e, assim, visualizar o COC. O primeiro COC detectado será transferido para uma gota de lavagem de uma placa de 4 poços, o segundo COC será mantido na segunda gota de lavagem da placa de 4 poços, ... De acordo com a lista de randomização, o COC na primeira gota de a placa de 4 poços será alocada para o IVM padrão ou experimental. A lista de randomização é gerada com www.sealedenvelope.com.

Os ovócitos maduros serão fertilizados por Injeção Intracitoplasmática de Espermatozoides (ICSI) e a fertilização e o desenvolvimento embriológico serão registrados. Embriões de qualidade suficiente no dia 3 serão vitrificados para uma transferência diferida de embriões vitrificados/aquecidos.