Meccanismi autoimmuni nella fibromialgia (FMIgG)

Visita 1 (durata ca. 2,5-4 ore)

Questionari: è stato effettuato un controllo dei criteri di inclusione ed esclusione, inclusa la palpazione dei tender point (criteri ACR 1990 FM). I soggetti hanno completato una serie di questionari convalidati relativi al dolore (valutazioni dell'intensità del dolore su scala analogica visiva (VAS), durata del dolore, disegno del dolore, forma abbreviata McGill), gravità della fibromialgia (questionario sull'impatto della fibromialgia, (FIQ)), sonno (Pittsburgh Sleep Inventory Questionnaire , (PSQI)), affaticamento (Multidimensional Fatigue Inventory (MFI-20)), depressione/ansia (Hospital Anxiety Depression Scale (HADS), Becks Depression Inventory (BDI), State Trait Anxiety Questionnaire (STAI)), coping del dolore (Coping Strategy Questionnaire (PCS)), accettazione e flessibilità (questionario di accettazione del dolore cronico (CPAQ-8), questionario di accettazione e azione (SAAQ)), Tampa Scale for Kinesiophobia (TSK) e qualità della vita correlata alla salute (EQ-5D).

Test sensoriali quantitativi: le soglie di percezione per il caldo/freddo non doloroso e doloroso sono state esaminate utilizzando un Thermotest. Un thermode (2x2 cm) è stato posizionato sulla pelle e la temperatura è stata modulata da un computer (0-50 gradi C). Il soggetto ha segnalato la rispettiva percezione premendo un pulsante, che ha terminato la stimolazione. I soggetti sono stati istruiti a premere il pulsante alla sensazione del minimo caldo/freddo e quando il caldo/freddo diventava doloroso. La sensibilità agli stimoli del dolore caldo/freddo sopra soglia è stata determinata chiedendo al soggetto di premere il pulsante quando avrebbe valutato un'intensità del dolore corrispondente a 4 e 7/10. La sensibilità al dolore alla pressione è stata valutata mediante algometria della pressione in 8 diversi siti del corpo. I soggetti sono stati istruiti a premere un pulsante di segnalazione quando la pressione si trasformava nella minima sensazione di dolore (soglia del dolore alla pressione) e quando il dolore corrispondeva rispettivamente a 4 e 7/10.

Analisi del sangue: sono stati eseguiti esami del sangue venoso (volume massimo 50 ml/individuo). I livelli di IgG umane che si legano alle cellule gliali satellite murine (SGC) saranno determinati come % di IgG umane che legano SGC. Inoltre, valuteremo anche la quantità di IgG che si legano a sezioni di DRG umano ed eventualmente anche a SGC umano (donatori post-mortem). I campioni di sangue saranno anche analizzati per sostanze algogeniche e infiammatorie, lipidi e metaboliti e attivazione delle cellule immunitarie, inclusa la selezione cellulare attivata dalla fluorescenza (FACS) (in un sottogruppo). Come estensione dello studio, gli anticorpi IgG saranno purificati per valutare l'effetto su colture cellulari e nel modello FM di roditore.

Biopsie cutanee: sono state eseguite due biopsie cutanee (4 mm di diametro) alla coscia. La pelle è stata sterilizzata e anestetizzata utilizzando un anestetico locale (Xylocaina 10 mg/ml con adrenalina). Se necessario è stato trattato con spongostan/BloodStop ed è stato sempre applicato un cerotto speciale (Steri-Strip) per 7-10 giorni. La pelle sarà analizzata per quanto riguarda i cambiamenti morfologici delle piccole fibre intradermiche e IENFD e saranno determinate le fibre mielinizzate spesse. Inoltre, l'attivazione delle cellule immunitarie sarà valutata utilizzando vari metodi.

Visita 2 (durata ca. 1,5 ore)

Imaging: ai soggetti è stato chiesto di fare una nuova valutazione del dolore (VAS). Hanno familiarizzato con lo stimolo del dolore evocato utilizzato nello scanner. Seguendo le routine di sicurezza per escludere controindicazioni per la scansione RM, i soggetti sono stati inseriti nello scanner. La valutazione è iniziata con scansioni strutturali (T1, T2), seguite da stato di riposo e spettroscopia RM (insula anteriore e posteriore) e infine un protocollo di dolore evocato utilizzando una serie di stimoli pressori dolorosi generati da un applicatore di pressione automatico alla gamba dei soggetti , corrispondenti rispettivamente a 150 e 300 kPa (dipendenti dal livello di ossigenazione del sangue, BOLD).

Obiettivi non specificati altrove:

1. Eseguire test volti a identificare l'antigene/antigeni e, in caso di successo, quantificare gli anticorpi specifici e metterli in relazione con la gravità della FM.
2. Per valutare se gli anticorpi IgG formano individui con FM grave attivano colture di cellule satellite per rilasciare sostanze pro-infiammatorie e algesiche in modo più efficiente rispetto agli anticorpi IgG da individui con FM meno grave.
3. Per indagare se ci sono anomalie nel numero, nelle caratteristiche o nell'attivazione delle cellule immunitarie nel sangue o nella pelle dei pazienti con FM rispetto all'HC.
4. Per valutare gli effetti di FM IgG su modelli animali.