Il ruolo predittivo della proteomica urinaria nella risposta della pressione arteriosa degli ipertesi obesi trattati con irbesartan o eplerenone.

Sfondo :

L’ipertensione rimane il fattore di rischio modificabile più diffuso associato a morbilità e mortalità cardiovascolare, tuttavia la prevalenza di ipertensione trattata in modo non ottimale rimane elevata in modo allarmante. La risposta pressoria variabile al trattamento farmacologico, l'inerzia del medico e la mancanza di compliance del paziente dovuta alla politerapia, sono le ragioni principali alla base del trattamento non ottimale della pressione arteriosa. La natura multifattoriale dell’ipertensione è stata a lungo descritta, con diversi fattori ambientali, genetici ed epigenetici coinvolti nella sua patogenesi e progressione. Pertanto, l’interesse scientifico sta iniziando a spostarsi verso la medicina di precisione, come modello medico per la prevenzione delle malattie e un trattamento su misura che incorpora la variabilità individuale, genetica, ambientale ed esperienziale. A tal fine, l'analisi proteomica è un rappresentante emergente nella ricerca di biomarcatori predittivi.

L'analisi proteomica consiste nell'analisi qualitativa e quantitativa delle proteine ​​finali presenti nei fluidi corporei. Un approccio semplificato prevede l'acquisizione del campione, l'estrazione e la separazione delle proteine ​​tramite elettroforesi ad alta risoluzione e tecniche basate sulla cromatografia, la determinazione della sequenza proteica con analisi basata sulla spettrometria di massa e l'identificazione delle proteine ​​con tecniche bioinformatiche in database di riferimento. Vari studi clinici su piccola scala hanno evidenziato il significato clinico dell'analisi proteomica, che spazia dall'identificazione di biomarcatori in grado di determinare la risposta pressoria in seguito al trattamento con spironolattone in pazienti con ipertensione resistente, alla previsione della preeclampsia attraverso il proteoma urinario anche nelle prime fasi della gestazione.

Obesità e ipertensione essenziale sono due entità patologiche che spesso coesistono. I dati dello studio Framingham suggeriscono un rischio doppio che i pazienti obesi sviluppino ipertensione rispetto a quelli sottopeso, mentre associazioni simili sono state descritte dagli studi NHANES III, MONICA e Health, Aging and Body Composition Study, tra aumenti della pressione sanguigna, come un risultato di aumenti rispettivamente del BMI, della circonferenza della vita e del grasso viscerale. I meccanismi attraverso i quali l'obesità porta allo sviluppo dell'ipertensione sono un fenomeno fisiopatologico complesso oggetto di costante ricerca e studio, tra cui l'attivazione del sistema nervoso simpatico, il disturbo dell'escrezione renale di sodio, l'eccessiva attivazione dell'asse renina-angiotensina-aldosterone e la disfunzione endoteliale. I bloccanti dei recettori dell’angiotensina 2 come l’irbesartan sono stati a lungo utilizzati come trattamento farmacologico di prima linea, tuttavia studi clinici tra cui ASPIRANT, PATHWAY-2 e lo studio RALES hanno evidenziato il ruolo dei bloccanti dei recettori dell’aldosterone nei pazienti ipertesi obesi. Lo spironolattone e l'eplerenone sono i principali rappresentanti orali di questo gruppo, quest'ultimo mostra effetti collaterali meno frequenti e una maggiore specificità di legame per il recettore dei mineralcorticoidi.

Scopo dello studio:

Lo scopo principale di questo studio è quello di indagare il potenziale ruolo predittivo della proteomica urinaria, nella risposta pressoria dei pazienti ipertesi obesi, dopo trattamento con irbesartan o eplerenone. Questa ipotesi potrebbe portare alla comparsa di biomarcatori urinari in grado di predire la risposta pressoria nei pazienti ipertesi obesi.

Progettazione dello studio:

In questo studio interventistico, i pazienti ipertesi obesi non trattati saranno randomizzati in due bracci di trattamento farmacologico. La risposta pressoria sarà valutata sulla base di una visita basale prima dell'inizio del trattamento farmacologico e di una visita di follow-up dopo un intervallo di 8 settimane. I pazienti verranno classificati come rispondenti o non rispondenti in base alle variazioni dei livelli di pressione sanguigna. L'analisi dei campioni urinari basali dei pazienti sarà condotta utilizzando la cromatografia liquida con spettrometria di massa tandem (LC-MS/MS). L'esame dei singoli peptidi urinari, insieme alla valutazione della risposta pressoria, sarà utilizzato per individuare distinte proteine ​​urinarie che possano fungere da indicatori predittivi della risposta alle alterazioni della pressione arteriosa dopo il trattamento farmacologico.

Metodi:

Un totale di 50 adulti ipertesi obesi non trattati saranno randomizzati a ricevere irbesartan 150 mg una volta al giorno o eplerenone 25 mg due volte al giorno.

I pazienti saranno sottoposti ad un dettagliato questionario anamnestico e ad un esame clinico-di laboratorio, al fine di garantire che i criteri di inclusione ed esclusione siano soddisfatti. Per l'inclusione nello studio sarà richiesto il consenso informato firmato, dopo un briefing dettagliato sulla procedura e sugli obiettivi dello studio, nonché sui potenziali rischi. L'approvazione etica è stata ottenuta dal comitato etico dell'ospedale.

I livelli di pressione arteriosa basale saranno determinati con la misurazione della pressione arteriosa ambulatoriale (ABPM), la misurazione della pressione arteriosa in ufficio (OBP) e la misurazione della pressione arteriosa domiciliare (HBP). Prima dell'inizio del trattamento, un campione urinario verrà raccolto e conservato in condizioni adeguate, fino al momento dell'analisi proteomica. I dati dei pazienti verranno registrati in forma anonima in un database elettronico, attraverso il quale verrà effettuata la randomizzazione dei pazienti. Dopo la randomizzazione, a ciascun paziente verranno somministrati farmaci opportunamente conservati in loco.

I partecipanti saranno sottoposti a una visita di follow-up dopo 8 settimane, dove la risposta alla pressione sanguigna sarà determinata con ABPM, OBP e HBP. L'aderenza al trattamento sarà determinata tramite un diario dei farmaci, fornito alla visita basale. I pazienti con una riduzione ≥ 5 mmHg dell'ABPM sistolico medio e/o una riduzione dell'OBP sistolico ≥ 10 mmHg saranno considerati rispondenti al trattamento corrispondente.

I campioni urinari conservati verranno sottoposti a cromatografia liquida con analisi di spettrometria di massa tandem (LC-MS/MS). I dati verranno elaborati e incrociati con software bioinformatici e database per l'identificazione delle proteine. Per stabilire la certezza del tasso di false scoperte (FDR) di identificazione delle proteine, la validazione sarà basata sul valore q, con FDR target: 0,05. Verrà valutata la distribuzione dell'intensità del peptide tra soggetti rispondenti e non rispondenti, per stabilire l'espressione differenziale in ciascun braccio. L'espressione differenziale sarà misurata in termini di fold change, come differenza relativa nell'abbondanza proteica tra le due condizioni. Verrà utilizzato il test t di Student o il test non parametrico di Mann Whitney.