Prediktivní role močové proteomiky v reakci krevního tlaku u obézních hypertoniků léčených irbesartanem nebo eplerenonem.

Pozadí :

Hypertenze zůstává nejrozšířenějším ovlivnitelným rizikovým faktorem spojeným s kardiovaskulární morbiditou a mortalitou, nicméně prevalence neoptimálně léčené hypertenze zůstává znepokojivě vysoká. Variabilní odezva krevního tlaku na farmakologickou léčbu, setrvačnost lékaře a nedostatečná compliance pacienta v důsledku polyfarmacie jsou hlavními důvody neoptimální léčby krevního tlaku. Již dlouho byla popsána multifaktoriální povaha hypertenze, na její patogenezi a progresi se podílejí různé environmentální, genetické a epigenetické faktory. Vědecký zájem se proto začíná přesouvat k precizní medicíně jako lékařskému modelu prevence nemocí a léčby na míru, která zahrnuje individuální, genetickou, environmentální a zkušenostní variabilitu. Z tohoto důvodu je proteomická analýza novým zástupcem ve výzkumu prediktivních biomarkerů.

Proteomická analýza sestává z kvalitativní a kvantitativní analýzy finálních proteinů v tělních tekutinách. Zjednodušený přístup spočívá v získávání vzorků, extrakci a separaci proteinů pomocí elektroforézy s vysokým rozlišením a na chromatografii, stanovení proteinové sekvence analýzou založenou na hmotnostní spektrometrii a identifikaci proteinů pomocí bioinformatických technik v referenčních databázích. Různé klinické studie malého rozsahu zdůraznily klinický význam proteomické analýzy, od identifikace biomarkerů schopných určit odpověď krevního tlaku po léčbě spironolaktonem u pacientů s rezistentní hypertenzí, až po predikci preeklampsie prostřednictvím močového proteomu i v časných stádiích gestace.

Obezita a esenciální hypertenze jsou dvě patologické entity, které často koexistují. Údaje z Framinghamské studie naznačující dvojnásobné riziko rozvoje hypertenze u obézních pacientů ve srovnání s pacienty s podváhou, zatímco podobné souvislosti byly popsány ve studiích NHANES III, MONICA a Health, Aging and Body Composition Study mezi zvýšením krevního tlaku jako výsledkem zvýšení BMI, obvodu pasu a viscerálního tuku. Mechanismy, kterými obezita vede k rozvoji hypertenze, jsou komplexním patofyziologickým fenoménem pod neustálým výzkumem a studiem, včetně aktivace sympatického nervového systému, poruchy renálního vylučování sodíku, nadměrné aktivace renin-angiotenzin-aldosteronové osy a endoteliální dysfunkce. Blokátory receptoru pro angiotenzin 2, jako je Irbesartan, se již dlouho používají jako farmakologická léčba první volby, avšak klinické studie zahrnující studie ASPIRANT, PATHWAY-2 a RALES zdůraznily roli blokátorů receptoru aldosteronu u obézních hypertoniků. Spironolakton a eplerenon jsou hlavními perorálními zástupci této skupiny, přičemž eplerenon vykazuje méně časté vedlejší účinky a také vyšší vazebnou specificitu pro mineralokortikoidní receptor.

Cíl studie:

Hlavním účelem této studie je prozkoumat potenciální prediktivní roli močové proteomiky v reakci krevního tlaku u obézních hypertoniků po léčbě irbesartanem nebo eplerenonem. Tato hypotéza může vést ke vzniku močových biomarkerů schopných predikovat odpověď krevního tlaku u obézních hypertoniků.

Studovat design:

V této intervenční studii budou neléčení obézní hypertonici randomizováni do dvou ramen farmakologické léčby. Odpověď na krevní tlak bude hodnocena na základě základní návštěvy před zahájením farmakologické léčby a následné návštěvy po 8týdenním intervalu. Pacienti budou kategorizováni jako reagující nebo nereagující na základě změn v hladinách jejich krevního tlaku. Analýza výchozích vzorků moči pacientů bude provedena pomocí kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC-MS/MS). Vyšetření jednotlivých močových peptidů spolu s vyhodnocením odpovědi krevního tlaku bude využito k určení odlišných proteinů v moči, které mohou působit jako indikátory predikující odpověď na změny krevního tlaku po farmakologické léčbě.

Metody:

Celkem 50 neléčených obézních hypertoniků bude randomizováno k irbesartanu 150 mg jednou denně nebo eplerenonu 25 mg dvakrát denně.

Pacienti podstoupí podrobný dotazník o anamnéze a klinicko-laboratorní vyšetření, aby se zajistilo, že jsou splněna kritéria pro zařazení a vyloučení. Pro zařazení do studie bude vyžadován podepsaný informovaný souhlas po podrobné instruktáži o postupu a cílech studie, jakož i o potenciálních rizicích. Etický souhlas byl získán od rady etické komise nemocnice.

Základní hladiny krevního tlaku budou stanoveny ambulantním měřením krevního tlaku (ABPM), měřením krevního tlaku v kanceláři (OBP) a domácím měřením krevního tlaku (HBP). Před zahájením léčby bude odebrán vzorek moči a uložen za vhodných podmínek, dokud nebude podroben proteomické analýze. Údaje o pacientech budou anonymně zaznamenávány do elektronické databáze, jejímž prostřednictvím bude prováděna randomizace pacientů. Po randomizaci bude každému pacientovi podávána medikace uložená vhodně na místě.

Účastníci podstoupí kontrolní návštěvu po 8 týdnech, kde bude stanovena odpověď krevního tlaku pomocí ABPM, OBP a HBP. Dodržování léčby bude stanoveno pomocí lékového deníku poskytnutého při vstupní návštěvě. Pacienti se snížením středního systolického ABPM o ≥ 5 mmHg a/nebo snížením systolického OBP o ≥ 10 mm Hg budou považováni za pacienty odpovídající na odpovídající léčbu.

Uložené vzorky moči budou podrobeny kapalinové chromatografii s tandemovou hmotnostní spektrometrií (LC-MS/MS). Data budou zpracována a porovnána s bioinformatickým softwarem a databázemi pro identifikaci proteinů. Pro stanovení jistoty identifikace proteinů bude validace míry falešného objevu (FDR) založena na hodnotě q, s cílovou FDR: 0,05. Bude hodnocena peptidová distribuce intenzity mezi respondéry a nereagujícími osobami, aby se stanovila rozdílná exprese v každém rameni. Diferenciální exprese bude měřena v násobku změny, jako relativní rozdíl v množství proteinu mezi těmito dvěma podmínkami. Bude použit Studentův t-test nebo Mann Whitney neparametrický test.