Przewidywalna rola proteomiki moczu w odpowiedzi ciśnienia krwi u otyłych pacjentów z nadciśnieniem leczonych irbesartanem lub eplerenonem.

Tło :

Nadciśnienie tętnicze pozostaje najczęstszym modyfikowalnym czynnikiem ryzyka związanym z zachorowalnością i śmiertelnością z przyczyn sercowo-naczyniowych, jednakże częstość występowania nadciśnienia tętniczego nieoptymalnie leczonego pozostaje niepokojąco wysoka. Zmienna reakcja ciśnienia krwi na leczenie farmakologiczne, inercja lekarza i brak przestrzegania zaleceń przez pacjenta z powodu polipragmazji to główne przyczyny nieoptymalnego leczenia ciśnienia krwi. Od dawna opisano wieloczynnikowy charakter nadciśnienia tętniczego, w którym w patogenezę i progresję zaangażowane są różne czynniki środowiskowe, genetyczne i epigenetyczne. Dlatego też zainteresowanie nauki zaczyna przesuwać się w stronę medycyny precyzyjnej, jako medycznego modelu zapobiegania chorobom i dostosowanego leczenia, uwzględniającego zmienność indywidualną, genetyczną, środowiskową i wynikającą z doświadczenia. W tym celu analiza proteomiczna jest wyłaniającym się przedstawicielem w badaniach predykcyjnych biomarkerów.

Analiza proteomiczna polega na jakościowej i ilościowej analizie końcowych białek w płynach ustrojowych. Uproszczone podejście obejmuje pobieranie próbek, ekstrakcję i rozdzielanie białek za pomocą technik elektroforezy i chromatografii o wysokiej rozdzielczości, określanie sekwencji białek za pomocą analizy opartej na spektrometrii mas oraz identyfikację białek za pomocą technik bioinformatycznych w referencyjnych bazach danych. Różne badania kliniczne na małą skalę podkreśliły znaczenie kliniczne analizy proteomicznej, począwszy od identyfikacji biomarkerów umożliwiających określenie odpowiedzi ciśnienia krwi po leczeniu spironolaktonem u pacjentek z opornym nadciśnieniem tętniczym, po przewidywanie stanu przedrzucawkowego na podstawie proteomu moczu nawet we wczesnych stadiach ciąży.

Otyłość i nadciśnienie pierwotne to dwie jednostki patologiczne, które często współistnieją. Dane z badania Framingham sugerują, że u otyłych pacjentów ryzyko rozwoju nadciśnienia tętniczego jest dwukrotnie większe w porównaniu z pacjentami z niedowagą, podczas gdy podobne powiązania zostały opisane w badaniach NHANES III, MONICA i Health, Aging and Body Composition Study, pomiędzy wzrostem ciśnienia krwi jako wynikiem wzrostu odpowiednio BMI, obwodu talii i trzewnej tkanki tłuszczowej. Mechanizmy, poprzez które otyłość prowadzi do rozwoju nadciśnienia tętniczego, są złożonym zjawiskiem patofizjologicznym będącym przedmiotem ciągłych badań i badań, obejmującym aktywację współczulnego układu nerwowego, zaburzenie nerkowego wydalania sodu, nadmierną aktywację osi renina-angiotensyna-aldosteron i dysfunkcję śródbłonka. Blokery receptora angiotensyny 2, takie jak irbesartan, są od dawna stosowane jako leczenie farmakologiczne pierwszego rzutu, jednak badania kliniczne, w tym badania ASPIRANT, PATHWAY-2 i RALES, podkreśliły rolę blokerów receptora aldosteronu u otyłych pacjentów z nadciśnieniem. Głównymi doustnymi przedstawicielami tej grupy są spironolakton i eplerenon, przy czym ten ostatni wykazuje rzadsze skutki uboczne oraz większą specyficzność wiązania z receptorem mineralokortykoidów.

Cel badania:

Głównym celem tego badania jest zbadanie potencjalnej predykcyjnej roli proteomiki moczu w odpowiedzi ciśnienia krwi u otyłych pacjentów z nadciśnieniem tętniczym po leczeniu irbesartanem lub eplerenonem. Hipoteza ta może prowadzić do pojawienia się biomarkerów w moczu, które będą w stanie przewidzieć reakcję ciśnienia krwi u otyłych pacjentów z nadciśnieniem.

Projekt badania:

W tym badaniu interwencyjnym nieleczeni, otyli pacjenci z nadciśnieniem tętniczym zostaną losowo przydzieleni do dwóch grup leczenia farmakologicznego. Odpowiedź ciśnienia krwi zostanie oceniona na podstawie wizyty początkowej przed rozpoczęciem leczenia farmakologicznego i wizyty kontrolnej po 8-tygodniowej przerwie. Pacjenci zostaną sklasyfikowani jako reagujący lub niereagujący na podstawie zmian w ich poziomach ciśnienia krwi. Analiza wyjściowych próbek moczu pacjentów zostanie przeprowadzona przy użyciu chromatografii cieczowej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS/MS). Badanie poszczególnych peptydów w moczu wraz z oceną odpowiedzi ciśnienia krwi zostanie wykorzystane do wskazania odrębnych białek w moczu, które mogą działać jako wskaźniki przewidujące reakcję na zmiany ciśnienia krwi po leczeniu farmakologicznym.

Metody:

Łącznie 50 nieleczonych, otyłych dorosłych z nadciśnieniem zostanie losowo przydzielonych do grupy otrzymującej irbesartan w dawce 150 mg raz na dobę lub eplerenon w dawce 25 mg dwa razy na dobę.

Pacjenci zostaną poddani szczegółowej ankiecie wywiadu oraz badaniu kliniczno-laboratoryjnym, w celu sprawdzenia spełnienia kryteriów włączenia i wyłączenia. Włączenie do badania wymagać będzie podpisanej świadomej zgody, po szczegółowym zapoznaniu się z procedurą i celami badania, a także potencjalnymi zagrożeniami. Uzyskano zgodę komisji etycznej szpitala.

Wyjściowe poziomy ciśnienia krwi zostaną określone za pomocą ambulatoryjnego pomiaru ciśnienia krwi (ABPM), pomiaru ciśnienia krwi w gabinecie (OBP) i pomiaru ciśnienia krwi w domu (HBP). Przed rozpoczęciem leczenia zostanie pobrana próbka moczu i przechowywana w odpowiednich warunkach do czasu poddania jej analizie proteomicznej. Dane pacjentów będą zapisywane anonimowo w elektronicznej bazie danych, za pośrednictwem której będzie prowadzona randomizacja pacjentów. Po randomizacji każdemu pacjentowi zostaną podane leki odpowiednio przechowywane na miejscu.

Po 8 tygodniach uczestnicy zostaną poddani wizycie kontrolnej, podczas której zostanie oznaczona reakcja ciśnienia krwi za pomocą ABPM, OBP i HBP. Przestrzeganie leczenia zostanie określone na podstawie dzienniczka leczenia, dostarczonego podczas wizyty początkowej. Pacjenci ze zmniejszeniem średniego skurczowego ABPM o ≥ 5 mmHg i/lub zmniejszeniem skurczowego OBP o ≥ 10 mmHg zostaną uznani za odpowiadających na odpowiednie leczenie.

Przechowywane próbki moczu zostaną poddane chromatografii cieczowej z analizą tandemowej spektrometrii mas (LC-MS/MS). Dane zostaną przetworzone i porównane z oprogramowaniem bioinformatycznym i bazami danych w celu identyfikacji białek. Aby ustalić pewność co do współczynnika fałszywego odkrycia identyfikacji białka (FDR), walidacja będzie oparta na wartości q, przy docelowym FDR: 0,05. Oceniany będzie rozkład intensywności peptydów pomiędzy odpowiadającymi i nie odpowiadającymi, w celu ustalenia zróżnicowanej ekspresji w każdym ramieniu. Różnicową ekspresję będzie się mierzyć jako krotność zmiany, jako względną różnicę w obfitości białka pomiędzy tymi dwoma warunkami. Wykorzystany zostanie test t-Studenta lub test nieparametryczny Manna Whitneya.