皮膚リーシュマニア症の治療における制御された一酸化窒素放出パッチとメグルミンアンチモン酸塩の比較

バックグラウンド

皮膚リーシュマニア症 (CL) は、88 か国で流行している世界的な疾患です [1] 。 年間 150 万人が CL に苦しんでおり、3 億 5000 万人以上が感染の危険にさらされていると推定されています [2-4]。 アメリカでは、年間 60,000 例の CL の新規症例が報告されており [5]、22 か国のうち 20 か国とカリブ海の 2 つの島で流行しています [2]。 現在、CL はイラクで勤務する 500 人以上の米軍兵士に影響を与えています [6]。 アンデス地域では、リーシュマニア症の発生率が過去 20 年間で劇的に増加しています。 1996 年から 1998 年にかけて、年間 14,000 件以上の症例が報告されています [7]。 コロンビアでは、6,500 例が報告されています [8]。 コロンビアでの CL の報告例の増加は、移住、森林伐採、違法なプランテーションの増殖、武力による政治紛争、ベクターの行動の変化などの要因に関連しています。 コロンビアにおけるリーシュマニアの主な菌株は、L. パナメンシス、L. ブラジレンシス、L. インファンタム、L. ガイヤネンシスであり、主に農村地域を中心に、国土全体に分布しています [10]。 CL は、リーシュマニア属の細胞内原虫によって引き起こされ [1]、これまでに分類されたフレボトムスおよびルツォミヤ サシチョウバエのごく一部の種に刺されることでヒトに感染します [10]。 サシチョウバエの消化器系では、この二形性の寄生虫は、宿主の血液中に放出されると、マクロファージによって貪食され、その鞭毛を失い、無鞭毛虫になる [12]。 イヌ、齧歯類、ハダニは寄生虫の自然宿主であり、人は偶発的な宿主である[11]。 この人獣共通感染症は興味深い都市化現象に見舞われ、主に活動的な年齢の男性に影響を与える著名な農村部から、すべての人、特に子供に影響を与える病気に変化しています[8,9]。 この疾患の特徴的な病変は潰瘍であり、分離株に応じて 3 か月から 1 年かけて自然に治癒し、平らで萎縮した色素沈着した瘢痕を残す [13-15]。 CL、特に L. brazilensis によって生成されるものは、病変の変形特性のために予後が悪い粘膜皮膚リーシュマニア症 (MCL) に発展する可能性があります [16]。 これらの病変の自然治癒は、再感染に対する部分的な耐性の獲得を可能にし、これは、子供および若年成人集団で観察されるより高い病原性を説明することができます[9]. 以前の研究では、小児集団ではCLの発生率が高く、治療に対する反応が悪いことが示されています[17]。 コロンビアの疫学的警戒プログラムでは、CL の可能性がある症例 (潰瘍の特徴および患者の起源によって特定される) を、潰瘍から得られた分離サンプルの顕微鏡による直接検査によって確認し、これらが陰性の場合は、創傷の生検によって確認する必要があります。 . 確認されたら、臨床疫学的記録を使用して、地方保健長官に症例を通知する必要があります。 疫学的警戒を担当するこの機関は、感染源を研究し、影響を受けた人々に薬を配布します。 現在、CL を治療する際にはさまざまな側面が考慮されていますが、その中で MCL を発症するリスク、グレード、局在化、数、サイズ、進化、および病変の持続性が最も重要です [18]。 60 年以上にわたり、5 価のアンチモン化合物であるスチボグルコン酸ナトリウム (Glaxo-Wellcome 製の Pentostan®) およびアンチモン酸メグルミン (Sanofi-Aventis 製の Glucantime®) が、この疾患の最適な治療法と考えられてきました [19]。 ]。 コロンビアで行われた研究では、アンチモン酸メグルミンを使用して 85% の治癒率が報告されました [20,21]。 これらの薬物の有効性は高いという事実にもかかわらず、非経口投与などの多くの欠点、および吐き気、嘔吐、筋肉痛および腹痛、心臓の問題、肝アミノトランスフェラーゼ濃度の上昇などの可逆的な二次的影響、および化学性膵炎 [21,22]。 さらに、治療への遵守は、その期間 (数週間) とその分布の制限によるその利用可能性によって影響を受けます。 セカンドラインの代替治療法が提案されています。アムホテリシン B とペンタミジンは優れた結果で使用されてきましたが、それらの高コスト、入手可能性がほとんどないこと、投与のために患者を入院させる必要性、およびそれらの二次的影響の重症度がそれらの使用を制限しています [23,24]。 過去 10 年間で、メフロキン、イトラコナゾール、ミルテフォシン、パロモマイシン、ケトコナゾール、アロプリノール、ダプソンなどの経口薬を使用した CL の新しい治療法が開発されましたが、それらの有効性について十分な証拠は示されていません [19,21,25,26]。 ]。 CL の局所治療法を開発する努力の中で、パロモマイシンはさまざまな製剤で使用されてきました。 しかし、この薬で達成された治癒率は、プラセボと比較しても、従来の治療よりも高くはありません [27,28]。 in vitro および in vivo のいくつかの研究では、一酸化窒素 (NO) がアマスティゴット型のリーシュマニアのさまざまな菌株を除去するのに効果的であることが実証されています [29-35]。 誘導性一酸化窒素合成酵素 (iNOS) によって引き起こされる L-アルギニンの酸化による NO の生成は、マクロファージの最も重要な防御メカニズムの 1 つを構成し [36]、リーシュマニアに対する 2 つの酸化型防御が確認されています。 感染の第 1 段階では、食作用プロセスに応答して、NADPH オキシダーゼによって触媒されるプロセスであるスーパーオキシド イオンの放出により、一部のプロマスチゴートが除去されます [29]。 この防御機構を生き延びたプロマスティゴートはアマスティゴートに進化し、マクロファージでの IL-12 の産生を活性化し、リーシュマニア [29] の抗原の T ヘルパー 1 リンパ球への提示を促進します。 iNOS によって触媒される NO の産生を促進することにより、インターフェロン ガンマ (INFγ) および腫瘍壊死因子アルファ (TNFα) を介して寄生虫を駆除します [31-33]。 最近の研究では、CL に感染した被験者のマクロファージにおける iNOS のより高い活性が示されており、リーシュマニアに対する免疫活性における NO の重要な役割が示唆されています [34]。 L.メジャー、L.チャガシ、またはL.ドノバニが接種されたリーシュマニア感染（C57BL / 6）に耐性のあるげっ歯類を使用した研究では、NG-モノメチル-L-アルギニン（L-NMMA）などのiNOS阻害剤の適用により、マクロファージにおける寄生虫の生存率と病原性[33,35,37,38]。 リーシュマニア (BALB/C) に感染する遺伝的感受性を持つマウスに L. major を接種した後、iNOS の活性は観察されませんでした。 しかし、IL-12 の適用は、iNOS を活性化することによって感染を制御することができました [31]。 ヒトでは、NOドナーを含む局所治療でいくつかの臨床試験が実現しています[39,40]。 エクアドルで、私たちのグループは、S-ニトロソ-N-アセチルペニシラミン (SNAP) を使用した NO 生成局所クリームを開発し、テストしました。これは、深刻な有害事象の報告がなく、このタイプの潰瘍の管理に有益な効果があることを証明しています。 それにもかかわらず、一酸化窒素の放出が不安定なため、クリームを頻繁に (1 日 4 回) 塗布する必要があり、治療の遵守が困難になりました [39]。 シリアでは、別のグループが L. tropica の局所治療にサリチル酸とアスコルビン酸で酸性化した硝酸カリウムを使用した [40]。 In vitro では、この NO 生成混合物は、リーシュマニアの無鞭毛型および前鞭毛型を破壊しました。しかし、in vivo では、40 人の患者の研究では一貫性のない結果が示され、被験者の 28% で潰瘍のサイズが縮小し、12% しか治癒しませんでした。 これらの結果の不一致は、NO を取得するために使用される手法によるものと考えられています。 亜硝酸塩の酸性化は、NO の瞬間的な爆発を生み出しますが、その放出は長期間にわたって維持されません [40]。 NO の放出を制御することの難しさは、NO の放出を制御するための新しい技術を探す必要性を生み出しました。 エレクトロスピニング技術によって生成されたナノファイバー ポリマーは、病巣で医薬品の一定の放出を保証するために研究されています。 エレクトロスピニング プロセスでは、高電圧を使用して帯電したポリマー溶液のジェットを生成し、これが乾燥して固化し、乾燥したポリマー ファイバーが残ります [41]。 このジェットが空気中を移動すると、溶媒が蒸発して帯電した繊維が残ります。この繊維は電気的に偏向され、金属スクリーン上に収集されます [42,43]。 さまざまな断面形状とサイズの繊維が、さまざまなポリマーから製造されます。 この技術により、いくつかの医薬品、酵素、およびタンパク質のカプセル化または閉じ込めが成功しています。 以前の研究では、ナノファイバー パッチは、テトラサイクリン塩酸塩の放出媒体として正常に使用されました。 テトラサイクリンの放出は 5 日間一定でした [41;43]。 同じモデルを使用して、亜硝酸塩がイオン交換樹脂 (DOWEX) に結合され、ポリウレタン ナノファイバー層にエレクトロスピニングされた多層経皮パッチが製造されました。 Waterlock® 超吸収剤とポリウレタンを含む溶液が、亜硝酸塩-DOWEX 層の上に電界紡糸されます。 ポリウレタン溶液に閉じ込められたアスコルビン酸は、3 番目の層にエレクトロスピンされ、Waterlock® 超吸収剤とポリウレタンの別の層が 4 番目の最後の層になります。 水和すると、この一酸化窒素放出パッチ (NOP) は、12 時間の間に 3.5 µmol の NO を安定して放出します [41,44,45]。 コロンビア、サンタンデールのランダズリで開発されたパイロット研究では、L. パナメンシスによって生じた 68 の潰瘍を呈した 35 人の患者を対象にプラセボ対照臨床試験が実施されました。NOP を使用すると、治療した潰瘍で 65% の改善が観察され、プラセボ群ではわずか 25% の改善でした (p=0.001)。 このパイロット研究では、記載されている固有の有害事象は、パッチが適用された領域の掻痒でした (未発表データ)。 CL の広い分布、その伝達形態の変化、および薬剤の入手可能性に関連する困難を考慮して、この研究は、エレクトロスピニングによって生成された NO ドナー経皮パッチが、少なくとも、 CLの治療のためのアンチモン酸メグルミンは、有害事象が少なく、コストが低いため、効果的な治療代替手段となります。 この研究で NOP の有効性が実証された場合、わが国で最も重要な公衆衛生問題の 1 つである、簡単にアクセスでき、遵守率が高い、新規で安全な代替治療法が利用可能になります。

目的

一般的な目的

CLの治療におけるNOPの有効性と安全性をアンチモン酸メグルミン（Glucantime®）と比較して評価すること。

具体的な目的

1. 厚生労働省が推奨するアンチモン酸メグルミンによる治療計画と比較して、NOP を使用した CL 潰瘍の治癒率を評価すること。
2. NOP の適用に関連する有害事象を特定し、アンチモン酸メグルミンによる治療によって生じる有害事象と比較すること。
3. NOP とアンチモン酸メグルミンの両方で発生する可能性がある再犯を特定して比較すること。
4. コロンビアにおけるCLの代替治療法の探索を進めること。

デザイン

一酸化窒素放出パッチとアンチモン酸メグルミンを比較する、二重盲検、ランダム化、二重マスク、プラセボ対照臨床試験。

サンプルサイズ

サンプルは、80% の検出力と 0.05% のタイプ 1 エラーを使用してアークコサインの公式に従って計算されました。 アンチモン酸メグルミンで 85%、NOP で 75% の成功率を割り当てると、558 人の患者が必要になります。 5% の損失率の調整後、募集しなければならない患者の総数は 620 人 (治療群あたり 310 人の患者) です。

人口

人口は、コロンビアの 2 つの地域から構成されます。 最初のものは、マグダレナ渓谷と東山脈の間に位置するコロンビアのサンタンデールの流行地帯で、ランダズリ、エル カルメン、サン ビセンテ、エル プレイヨン、リオネグロの自治体が含まれます。 2 番目の地域は、チャパラル、サン アントニオ、リバノ、ファラン、パロカビド、マリキータの自治体を含むノース トリマの流行地域です。

患者の選択

包含基準

1. 18～50歳の男女
2. 2週間以上進行した皮膚潰瘍
3. -CLの陽性の寄生虫診断
4. -研究への参加に自発的に同意し、インフォームドコンセントに署名する患者。
5. すべての訪問に時間厳守で出席する傾向がある（初回、治療、フォローアップ）
6. -研究中にCLの他の治療法を使用しないことの受け入れ

除外基準

1. 妊娠中の女性
2. -免疫学的に患者を危険にさらす状態または疾患の存在（つまり、 糖尿病、癌など）、または研究者の判断に基づいて、CLの経過を変える可能性のあるその他のもの。
3. びまん性CLまたは5つ以上の活動性病変。
4. 皮膚粘膜リーシュマニア症（鼻、泌尿生殖器、および/または肛門の粘膜から、または唇の端から2cm未満に病変があってはなりません）。
5. 内臓リーシュマニア症
6. -過去3か月間のアンチモン化合物による完全または不完全な治療。
7. -肝臓、腎臓または心血管疾患の病歴のある患者。
8. -研究への参加を承認するのにふさわしくないと見なされる精神障害または神経障害のある患者。

研究開発

物流フェーズ

このフェーズは 4 か月続き、次のアクティビティが含まれます。

1. 研究に参加する職員の訓練。
2. プロジェクトの開発に必要な資料の取得。
3. チラシ、販促資料、教育資料、手順書、症例報告書 (CRF) の作成。
4. 治療のランダム化。 治療の無作為化は、コロンビア心臓血管財団の疫学者によって実現されます。 この無作為化は、治療グループのサイズを同じに保ち、同じ治療の長いシーケンスを避け、可能な場合は単純な無作為化プロセスに固有のバイアスの一部のバランスを取るために、ブロックで行われます. さらに、このブロックでのランダム化により、中間分析の実行が容易になります。

採用段階

このフェーズには 22 か月かかります。 選択された自治体では、病院や保健センターで働く医療従事者が、病気や研究方法に関するトレーニングを受けます。 同時に、リーシュマニア症の可能性のある症例を募集するための戦略を開発する目的で、地域社会の指導者および医療従事者とともに疫学的焦点研究が行われ、地理的および人口統計学的条件が特定されます。 その後、CL の寄生虫学的確認の有無にかかわらず、2 週間以上の進化を伴う活動性潰瘍を示す被験者は、健康促進者によってスクリーニング訪問に参加するよう招待されます (表 1)。

スクリーニング訪問

この訪問中に、完全な病歴が精査され、リーシュマニア症の前例に関するデータが取得されます（投与された治療、局在化、病変の数など）。 普遍的に受け入れられている技術に基づいて、完全な医学的評価が実現されます。 包含/除外基準が適用され、選択された候補者は研究について通知された後、インフォームドコンセントに署名します。 寄生虫学的診断のない2週間以上の進化の潰瘍を有する対象については、寄生虫学者によって直接検査が行われる。 最初の直接検査が陰性の場合、それは最大 3 回繰り返されます。その後、結果が陰性の場合は生検が行われます。 リーシュマニア症が確認されない場合、患者は元のヘルスセンターに送られます。

初診

含まれる患者は、2 つのグループのいずれかにランダムに割り当てられます。 Ｎｏｖｙ－Ｎｉｃｏｌｅ－ＭｃＮｅａｌ（ＮＮＮ）培地での培養物を菌株の同定のために採取し、肝臓酵素、クレアチニン、および膵臓アミラーゼ測定のために肘前静脈から血液サンプルを採取する。 この訪問中に、完全な医学的評価が行われ、潰瘍が測定され、写真が撮られます。 写真を撮る前に、参加者の識別コードと訪問日が記されたステッカーとともに、潰瘍の横に段階的なルールが配置されます。 最初の NOP (アクティブまたはプラセボ) を適用して病変を覆い、アンチモン酸メグルミン (アクティブまたはプラセボ) の最初のショットを投与します。 患者は、パッチを損傷しない方法と、有害事象を特定して報告する方法に関する情報を受け取ります。 患者がそうするのを助けるために、彼らは彼らを登録するための日記を受け取ります. ランダムに構成された 2 つのグループは、次のように分割されます。

グループ 1: 20 日間、このグループは筋肉内 (IM) アンチモン酸メグルミン (Glucantime® 20 mg/kg/日、1 日あたり最大用量 3 アンプル) を同時に受け取ります。そしてNOPプラセボ。

グループ 2: 20 日間、このグループは IM メグルミン アンチモン酸塩 (5-15cc/日) のプラセボとアクティブな NOP を同時に受け取ります。

治療訪問

患者は、NOP (プラセボまたはアクティブ) とアンチモン酸メグルミン (プラセボまたはアクティブ) の両方を受け取るために、20 日間毎日ヘルスセンターを訪れます。 毎日、被験者とその治療への順守が評価され、データが収集されます。 有害事象が検出された場合、患者は直ちに医療スタッフに紹介されます。医療スタッフは評価を行い、それを有害事象委員会に報告し、各ケースで最終決定を下します。

フォローアップ訪問

このフェーズは 10 か月続きます。 フォローアップ中、患者は研究グループによって4回の機会に見られます。 最初の訪問は、生化学的測定のために新しい血液サンプルが採取される治療終了の翌日（21日目）に行われます。 2 回目、3 回目、4 回目の訪問は、それぞれ 45 日目、90 日目、180 日目に実現されます。 これらの訪問中に、潰瘍の治癒過程、再犯および/または再感染の存在、および参加者の健康状態が評価されます。 潰瘍の進行を写真で記録します。

潰瘍の最大直径と最小直径は目盛定規を使用して測定し、硬結はボールペン技術を使用して測定します。 潰瘍と硬結の領域は別々に計算され、CRF に登録されます。 臨床反応の評価は、改善が最も少ない潰瘍に基づいて行われます。

1. 完全な臨床反応：潰瘍の完全な再上皮化および硬結の消失。
2. 臨床的改善: 最後の臨床評価と比較して、潰瘍および硬結領域の 50% 以上の減少。
3. 臨床反応の欠如: 最後の臨床評価と比較して、潰瘍および硬結領域の増加または減少が 50% 未満。

4. 治療失敗:

   1. 最後の臨床評価と比較して、潰瘍のサイズが50％以上増加している
   2. 治療開始から3ヶ月後の潰瘍の存在。
   3. 再活性化：完全な再上皮化の期間の後、寄生虫学的診断が陽性である瘢痕の端または中央に病変が出現すること。
   4. 粘膜への影響: 治療中、終了時、またはフォローアップの来院時に粘膜への影響の存在。
5. 再感染：元の病変とは異なる領域での潰瘍の活性化。

治療が失敗したと見なされた被験者については、コードが解読され、別の治療アプローチを探すために元のヘルスセンターに送られます。

手続き

身体検査

完全な身体検査が実現し、バイタルサインが測定されます。

採取された血液サンプル

血液サンプルは、次の生化学的分析を行うために肘前静脈から採取されます。

1. 分光測光法によるクレアチニン
2. 分光光度法によるアラニントランスアミナーゼ (ALT)
3. 分光光度法によるアスパラギン酸トランスアミナーゼ (AST)
4. 分光光度法による膵臓アミラーゼ

CL の直接テストのためのサンプリング手法

真皮の擦過片にアマスティゴットを含む細胞が存在することを確認するために、直接検査が行われます[46,47]。サンプルには、可能な限り、血液、細胞の破片、または膿がないようにする必要があります。 患者が複数の病変を示す場合、サンプルは、展開時間が最も短く、最大の硬化領域および/または化膿性分泌物が最も少ないものから採取する必要があります。 病変にかさぶたがある場合は、サンプルの品質を向上させるためにそれを取り除く必要があります。 サンプルは、潰瘍の活動的な端または底部から採取できます。 アクティブ エッジからサンプルを採取するときは、70% のアルコールで無菌状態にする必要があります。サンプルに血液が含まれていないことを確認するために、人差し指と人差し指を使用して止血を行います。 長さと深さが約 3 mm の小さな切開が、潰瘍の端に平行な活動端にメスで行われます。 メスの鋭い側で、切開部の真皮壁をこすり、組織を採取します。 抽出された材料は、2 つの顕微鏡スライドに拡張されます。 サンプルを室温で乾燥させた後、メタノールで固定し、ギムザ、ライトまたはフィールドで染色します。 液浸油を使用して、100X レンズを備えた顕微鏡下でサンプルを観察し、リーシュマニアのアマスティゴットの存在を評価し、それらの構造を検証します (核、キネトプラスト、細胞膜)。 病変の中心からサンプルを採取する場合は、同じ止血技術を使用し、かさぶたを取り除き、メスの鋭い側を使用して潰瘍の底をよく洗浄して、細胞の破片や化膿性物質の存在を防ぎます。 . この手順は、肉芽腫が底に見えるまで続けなければなりません。 アクティブ エッジからサンプルを処理するために使用される同じ技術を使用して、リーシュマニアのアマスティゴットの存在が検証されます。

文化のサンプリングのための技術

培養用のサンプルは、潰瘍の活性端を吸引するか、または組織の断片を抽出し、抗生物質 (cc あたり 1000 UI の結晶性ペニシリン) を含むリン酸緩衝生理食塩水 (PBS) で浸軟することによって得られます。培地に入れます。 吸引法では、抗生物質を含む 0.3 cc の PBS 溶液を含む、細い針 (26G) を備えたツベルクリン注射器を使用します。 潰瘍を 70% のアルコールで無菌状態にした後、針を真皮に挿入し、回転運動によって約 1 分間針のベベルで少量の組織を浸軟させ、その後注射器に吸引します。 サンプルを無菌状態で NNN 培地に入れ、26℃で 4 週間培養します [46,47]。 毎週、培養液から一滴を抽出し、2枚のスライドの間に置いて顕微鏡で観察します。 プロマスティゴートが見つからない場合、培養物は陰性として拒否されます [46]。 菌株は、Dr. Diane Mc Mahon Pratt によって開発されたモノクローナル抗体を使用して種によって識別されます [48,49]。

有害事象の評価と管理

治療中およびフォローアップの訪問中に、患者は有害事象について尋ねられます。 各有害事象は、医師によって重篤または非重篤に分類されます (表 2 および 3)。 重大な有害事象は、次の基準の 1 つ以上を満たす必要があります。

1. 死
2. 生命を脅かす（つまり、即死のリスク）
3. 入院または既存の入院の延長
4. 持続的または重大な障害/無能力 患者の生命を危険にさらす、および/または緊急の医学的または外科的処置を必要とする深刻な有害事象の存在は、治療の中止と患者の適切な医学的管理の開始を必要とします。 治験責任医師は、重大な有害事象を知ってから 24 時間以内に FCV の有害事象委員会 (AEC) に通知します。

重篤でない有害事象は、次のように分類されます。

1. 軽度: 患者は自分の症状および/または徴候を認識していますが、それらは許容可能です。 医療介入や特別な治療は必要ありません。
2. 中程度: 患者は、日常生活に支障をきたすような問題を抱えています。 彼らは医学的介入または特定の治療を必要とします。
3. 重度：患者は仕事ができず、日常生活にも参加できません。 彼らは医学的介入または特定の治療を必要とします。

有害事象と試験された薬物との間の可能な関係は、治験責任医師の臨床的判断および以下の定義に基づいて治験責任医師によって分類されます。

1. 確実に関連: 事象は、テストされた薬物の投与によって完全に説明できます。
2. おそらく関連がある：イベントは、他の薬や患者の臨床状態ではなく、テストされた薬の投与によって説明される可能性が最も高い.
3. 関連性の可能性: 事象は、検査された薬剤または他の薬剤の投与、または患者の臨床状態によって説明される場合があります。
4. 関連なし: イベントは、検査されたものではなく、患者の臨床状態または他の薬によって説明される可能性が最も高い.

すべてのイベントはAECに報告され、その基準に応じて、研究からの患者の継続または中止、したがってコードの破りが決定されます.

プロジェクトは固有のリスクを最小限に抑えるように設計されていますが、治験薬に関連する有害事象は AEC によって慎重に評価され、必要な治療によって発生する費用は治験によってカバーされます。

データ分析フェーズ

このフェーズは 6 か月続きます。 CFRへのすべてのデータ入力が完了すると、結果が監査され、検出されたエラーが評価され、担当者によって修正されます。 情報は 2 人の異なる人物によって 2 つの異なるデータベースに入力され、記録が比較されて不一致が検出されます。 元の CFR を使用して、データベースの誤りを修正します。

統計分析には、Stata 8.0 が使用されます。 記述的分析は、変数の性質に応じた中央値と比率で構成され、それぞれの 95% 信頼区間があります。 分散測定として、標準偏差が計算されます。 変数の分布は、Shapiro-Wilk 検定を使用して調査されます。 グループ間の違いを検出するために、その分布に従って T 検定または Wilcoxon 検定が実行されます。 カテゴリ変数は、Chi2 検定または正確なフィッシャーの検定を使用して比較されます。 必要に応じて、複数のロジスティック回帰のモデルまたは共分散分析が行われます。

計算されたサンプルの 35% と 70% が収集された時点で、治療間の有効性と安全性の違いを判断する目的で、2 つの中間分析が実行されます。

エンドポイント

研究の終わりに、2 つのエンドポイントが評価されます。

1. 成功した治療:

   1. 治療開始から 3 か月後に再上皮化を完了します。
   2. 研究の6ヶ月間、粘膜の再活性化および影響の欠如。

2. 治療失敗:

   1. 治療開始から3か月後の不完全な再上皮化。
   2. 最後の臨床評価と比較して、潰瘍のサイズが50％以上増加している
   3. -6か月間の研究中の粘膜の再活性化および/または影響。

最終報告書

研究の最後に、結果が評価され、議論され、プロジェクトを後援している組織である COLCIENCIAS に最終報告書が提出されます。 関連する結果は、国内外のジャーナルに掲載され、会議や科学会議で発表されます。

倫理的側面

この研究は、ヘルシンキ宣言およびコロンビアの法律に従って、保健省の決議 8430/93 に従って実施されます。 研究の患者の入院前に、目的と方法論が説明され、インフォームドコンセントが得られます。 この研究は、コロンビア心臓血管財団の研究倫理委員会によって承認されました (Act# 105/2005 年 1 月 28 日)。 患者の秘密保持の権利は、研究のすべての段階で維持されます。

競合する利益

非金銭的競合利益

この原稿の著者は、政治的、個人的、宗教的、イデオロギー的、学術的、知的、またはその他の競合する利益を含め、競合する利益がないことを宣言します。

金銭的な利益相反

過去 5 年間、現在または将来、この原稿の発行によって何らかの形で利益または損失を被る可能性のある組織から、払い戻し、料金、資金、または給与を受け取っていません。 私たちは、現在または将来、原稿の出版によって何らかの形で金銭的に利益または損失を被る可能性のある組織の株または株式を保有していません。 私たちは、原稿の内容に関連する特許を保有しておらず、現在申請中です。 私たちは、原稿の内容に関連する特許を保有または申請している組織から、払い戻し、料金、資金、または給与を受け取っていません。