土壌伝染性蠕虫の治療に対する駆虫薬の有効性のモニタリング P2 (ConWorm)

第一目的：

インフォームド コンセントを取得した後、対象年齢範囲グループの学童が募集され、最近の糞便サンプル (4 時間未満の間隔) を提供するよう求められます。これは、各土壌感染の糞便卵数 (FEC) を決定するために処理されます。蠕虫（STH）が存在します。 最初のサンプリングの目的は、少なくとも 250 人の感染した子供を少なくとも 1 つの土壌伝染性蠕虫 (STH) に登録することです。 このサンプル サイズは、実際の糞卵数 (FEC) データ セットの選択における分散共分散構造を反映する相関過剰分散糞卵数データのランダム シミュレーションを使用して、研究力の統計分析に基づいて選択されました。 この分析は、最大 200 人のサンプル サイズ (α = 0.05、検出力 = 80%) が、広い期間にわたって ~ 80% (個人あたりの FEC ∆ の平均パーセンテージ) の無効有効性から 10 パーセント ポイントの低下を検出するために必要であることを示唆しました。感染シナリオの範囲。 比率の標準検出力分析では、ヌル治癒率からの最大 10 パーセント ポイントの低下を検出するには、最大 200 のサンプル サイズが必要であることが示されました (約 50% のヌル効果からの逸脱を検出するには、最大のサンプルが必要です)。 したがって、25% の不遵守率が予想されることを考えると、各研究サイトで 250 人の感染した被験者のサンプルが必要であると考えられました。

糞便サンプルを提供するすべての子供は、監視下（咀嚼+水）で500mgのメベンダゾール（MBZ）単一テーブルで治療されます。 メベンダゾール (MBZ) は、調整グループによって (無料で) 提供されます。 治療の 7 日から 14 日後 (最大間隔) に、2 回目の糞便サンプルを子供から採取して、FEC を再度測定します。 フォローアップ時に便サンプルを提供できない被験者、または最初のサンプリング時に重度の併発病状を経験している被験者、または下痢を起こしている被験者は、研究から除外されます。

副次的な目的:

5 つの研究施設では、メベンダゾール (MBZ) で治療する前に、感染した 100 人の被験者の糞便サンプルを 1 本のチューブ (10 ml の 70% エタノールに 1 グラム) で保存する必要があります。 同じ子供のサンプルも、治療後に 1 本のチューブ (10 ml の 70% エタノール中 1 グラム) に再度保存する必要があります。 サンプルはゲント大学の寄生虫学研究所に送られました。

治療の前後に収集されたサンプルは、分子アッセイによって、Necator americanus/Acylostoma duodenal の発生、および耐性に関連する β-チューブリン変異の発生を調べます。

処理前に収集されたサンプルは、その後、分子アッセイによって調べられ、ヒトの土壌伝達蠕虫 (STH) の貯蔵庫としての動物の役割が評価されます。

寄生虫学的手法、土壌伝播蠕虫 (STH) の糞便卵数の測定。 すべての糞便サンプルは、A. lumbricoides、T. trichiura、および鉤虫による感染の検出と列挙のために McMaster 卵計数法を使用して処理されました。 すべての研究サイトは技術に精通しており、McMaster スライドは以前に提供されていました。

分子アッセイ (ゲント大学寄生虫学研究所) およびデオキシリボ核酸 (DNA) 抽出。

Qiagen ミニ便キットを使用して、エタノール 70% で保存されたサンプルから土壌伝染性蠕虫 (STH) の DNA を抽出します。

土壌伝播蠕虫 (STH) の分子同定。 土壌伝達蠕虫種の存在: 回虫 (n = 2)、鞭虫 (n = 2)、および鉤虫 (n = 4) は、異なる分子アッセイを使用して評価されます。 鞭虫種の識別には、種特異的なポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) が適用されます。 回虫と犬鉤虫の識別には、PCR-制限断片長多型 (PCR-RFLP) が使用されます。 人間の鉤虫については、定量的 PCR が適用されます。

メベンダゾール（MBZ）耐性に関連するβ-チューブリンの変異の存在 この特定の目的は、マギル大学（カナダ）と共同で実施されます。

統計分析。 治癒率 (CR) と糞便卵数減少 (FECR) の両方が、土壌伝播蠕虫に対するメベンダゾール (MBZ) の有効性を監視するために考慮されます。 統計分析は、Vercruysse et al., 2011 で説明されているように評価されます。