토양 전염된 연충 P2의 치료를 위한 구충제의 효능 모니터링 (ConWorm)

기본 목표:

정보에 입각한 동의를 얻은 후, 대상 연령대 그룹의 학생을 모집하고 최근 대변 샘플(4시간 미만 간격)을 제공하도록 요청합니다. Helminths (STH) 존재. 초기 샘플링의 목표는 적어도 하나의 토양 전염성 기생충(STH)에 대해 적어도 250명의 감염된 어린이를 등록하는 것입니다. 이 샘플 크기는 실제 분변 난자 수(FEC) 데이터 세트 선택에서 분산-공분산 구조를 반영하는 상관된 과도하게 분산된 분변 난자 수 데이터의 무작위 시뮬레이션을 사용하여 연구력의 통계 분석을 기반으로 선택되었습니다. 이 분석은 최대 200명의 개인(α = 0.05, 검정력 = 80%)의 표본 크기가 ~80%(개인당 평균 백분율 FEC Δ)의 null 효능에서 10% 포인트 하락을 감지하는 데 필요하다고 제안했습니다. 다양한 감염 시나리오. 비율에 대한 표준 검정력 분석은 또한 무효 경화율에서 ~10% 포인트 감소를 감지하려면 최대 200개의 샘플 크기가 필요함을 나타냅니다(대략 50%의 무효 효율에서 이탈을 감지하는 데 가장 큰 샘플이 필요함). 25%의 예상 비순응률을 감안할 때, 250명의 감염된 피험자 샘플이 각 연구 현장에서 필요한 것으로 간주되었습니다.

대변 ​​샘플을 제공하는 모든 어린이는 감독(씹는 + 물) 하에 500mg의 메벤다졸(MBZ) 단일 테이블로 치료됩니다. 메벤다졸(MBZ)은 조정 그룹에서 (무료) 제공합니다. 치료 후 최대 7일에서 최대 14일(최대 간격) FEC를 다시 결정하기 위해 소아로부터 두 번째 대변 샘플을 수집합니다. 후속 조치에서 대변 샘플을 제공할 수 없거나 심각한 동시 의학적 상태를 경험하거나 첫 번째 샘플링 시점에 설사를 하는 피험자는 연구에서 제외됩니다.

보조 목표:

5개 연구 기관에서 100명의 감염된 피험자의 대변 샘플은 하나의 튜브(70% 에탄올 10ml에 1g)에 메벤다졸(MBZ)로 치료하기 전에 보존해야 합니다. 동일한 어린이의 샘플도 치료 후 하나의 튜브(70% 에탄올 10ml에 1g)에 다시 보관해야 합니다. 샘플은 겐트 대학의 기생충학 실험실로 보내졌습니다.

처리 전후에 수집된 샘플은 후속적으로 분자 분석에 의해 Necator americanus/Ancylostoma duodenal 발생 및 저항과 관련된 β-tubulin 돌연변이 발생에 대해 조사됩니다.

처리 전에 수집된 샘플은 이후에 분자 분석으로 검사되어 인간 토양 전염성 기생충(STH)의 저장소로서 동물의 역할을 평가합니다.

기생충학적 기술, 토양 전염성 연충(STH)의 분변 알 수 측정. A. lumbricoides, T. trichiura 및 십이지장충 감염의 검출 및 계수를 위해 McMaster 난자 계수 기술을 사용하여 모든 대변 샘플을 처리했습니다. 모든 연구 사이트는 기술에 익숙하며 McMaster 슬라이드는 이전에 제공되었습니다.

분자 분석(겐트 대학교 기생충학 연구소) 및 데옥시리보핵산(DNA) 추출.

Qiagen 미니 스툴 키트를 사용하여 에탄올 70%에 보존된 샘플에서 STH(Soil-Transmitted Helminths)의 DNA를 추출합니다.

토양 전파 연충(STH)의 분자 식별. 토양 전염된 연충 종: Ascaris(n=2), Trichuris(n=2) 및 hookworms(n=4)의 존재는 다른 분자 분석을 사용하여 평가됩니다. Trichuris 종의 감별을 위해 종 특이적 중합효소연쇄반응(PCR)을 적용할 예정이다. 회충과 송곳니 십이지장충의 감별을 위해 PCR-RFLP(PCR-Restriction Fragment Length Polymorphism)가 사용됩니다. 인간 구충의 경우 정량적 PCR이 적용됩니다.

메벤다졸(MBZ) 내성과 관련된 β-튜불린의 돌연변이 존재 이 특정 목적은 McGill University(캐나다)와 협력하여 수행될 것입니다.

통계 분석. 완치율(CR)과 분변 알 수 감소(FECR) 모두 토양 전염성 기생충에 대한 메벤다졸(MBZ)의 효능을 모니터링하는 것으로 간주됩니다. 통계 분석은 Vercruysse et al., 2011에 설명된 대로 평가됩니다.