Overvågning af virkningen af ​​anthelmintika til behandling af jordoverførte helminths P2 (ConWorm)

Primært mål:

Efter at have indhentet informeret samtykke, vil skolebørn i målgruppen blive rekrutteret og bedt om at give en nylig afføringsprøve (et interval på mindre end 4 timer), som vil blive behandlet for at bestemme antallet af fækale æg (FEC) for hver jordoverført Helminths (STH) til stede. Til den indledende prøvetagning er målet at indskrive mindst 250 inficerede børn til mindst én af de jordoverførte helminths (STH). Denne stikprøvestørrelse blev udvalgt baseret på statistisk analyse af undersøgelsesstyrke ved hjælp af tilfældige simuleringer af korrelerede over-spredning af fækale ægtællingsdata, der afspejler varians-kovariansstrukturen i et udvalg af reelle fækale ægtællingsdatasæt (FEC). Denne analyse antydede, at en prøvestørrelse på op til 200 individer (α = 0,05, effekt = 80%) var påkrævet for at detektere et fald på 10 procentpoint fra en nul-effektivitet på ~ 80 % (gennemsnitlig procentdel FEC ∆ pr. individ) over en bred række infektionsscenarier. Standardeffektanalyser for proportioner indikerede også, at påvisningen af ​​et fald på ~10 procentpoint fra en nulhærdningshastighed krævede prøvestørrelser op til 200 (de største prøver kræves for at detektere afvigelser fra nul-effektiviteter på omkring 50%). Givet en forventet manglende overholdelsesrate på 25 %, blev en prøve på 250 inficerede forsøgspersoner derfor anset for nødvendig på hvert undersøgelsessted.

Alle børn, der giver afføringsprøver, vil blive behandlet med mebendazol (MBZ) enkeltbord på 500 mg under opsyn (tygge + vand). Mebendazolen (MBZ) vil blive leveret (gratis) af den koordinerende gruppe. Syv op til fjorten dage (maksimalt interval) efter behandlingen vil en anden fæcesprøve blive indsamlet fra børnene for igen at bestemme FEC. Forsøgspersoner, der ikke er i stand til at give en afføringsprøve ved opfølgning, eller som oplever en alvorlig samtidig medicinsk tilstand eller har diarré på tidspunktet for den første prøvetagning, vil blive udelukket fra undersøgelsen.

Sekundære mål:

På 5 undersøgelsessteder bør fæcesprøver fra 100 inficerede forsøgspersoner bevares før behandling med mebendazol (MBZ) i ét rør (1 gram i 10 ml 70 % ethanol). Prøver af de samme børn bør også opbevares igen i et glas (1 gram i 10 ml 70 % ethanol) efter behandling. Prøver skal sendes til Laboratory of Parasitology, Gent Universitet.

Prøverne, der indsamles før og efter behandling, vil efterfølgende blive undersøgt ved molekylære assays, forekomsten af ​​Necator americanus/Ancylostoma duodenal og forekomsten af ​​β-tubulin mutationer relateret til resistens.

Prøverne indsamlet før behandling vil efterfølgende blive undersøgt ved molekylære assays for at vurdere dyrs rolle som et reservoir for humane jordoverførte helminths (STH).

Parasitologiske teknikker, bestemmelse af fækalæg-tal af jordoverførte helminths (STH). Alle fækale prøver blev behandlet ved hjælp af McMaster-ægtælleteknikken til påvisning og optælling af infektioner med A. lumbricoides, T. trichiura og hageorm. Alle undersøgelsessteder er fortrolige med teknikken, og McMaster-dias blev leveret tidligere.

Molekylær assays (Laboratory of Parasitology, Gent University) og deoxyribonukleinsyre (DNA) ekstraktion.

DNA fra Soil-Transmitted Helminths (STH) vil blive ekstraheret fra prøverne konserveret i ethanol 70% ved hjælp af Qiagen mini afføringssæt.

Molekylær identifikation af jordoverførte helminths (STH). Tilstedeværelsen af ​​jordoverførte helminths-arter: Ascaris (n= 2), Trichuris (n = 2) og hageorm (n = 4) vil blive vurderet ved hjælp af forskellige molekylære assays. Til differentiering af Trichuris-arter vil artsspecifik polymerasekædereaktion (PCR) blive anvendt. Til differentiering af Ascaris og hundehageorme vil en PCR-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) blive brugt. For de humane hageorme vil der blive anvendt en kvantitativ PCR.

Tilstedeværelse af mutationer i β-tubulin relateret til mebendazol (MBZ) resistens Dette specifikke mål vil blive udført i samarbejde med McGill University (Canada).

Statistisk analyse. Både Cure Rate (CR) og Fæcal Egg Count Reduction (FECR) vil blive overvejet for at overvåge effekten af ​​mebendazol (MBZ) mod jordoverførte helminths. Den statistiske analyse vil blive vurderet som beskrevet af Vercruysse et al., 2011.