乳児の再発性喘鳴：危険因子とプロバイオティクスによる予防。

目的

全般的

• プロバイオティクスの補給が乳児の喘鳴の再発頻度を減らすかどうかを評価します。

明確

• リスク要因を研究したサンプル中のプロバイオティクスの効果の主要な交絡因子として役立つ可能性がある、乳児の再発性喘鳴に対する環境的および遺伝的要因の存在を特定する。
• 幼児の喘鳴の再発としてプロバイオティクスの効果を確認してください。
• プロバイオティクスを使用した介入の前後で、IL-10、IL-12、およびインターフェロンγを測定することにより、乳児喘鳴の免疫応答に対するプロバイオティクスの影響を評価します。

デザインリサーチ

研究デザイン

• 推論的、縦断的、無作為化試験、二重盲検、並行、プラセボ対照試験の一種。

開催される介入:

• ペルナンブコ連邦大学の幼児病院に通う患者は臨床調査を受け、ベースライン検査の完了は、両親または保護者からのインフォームドコンセントの後、研究に参加する資格があります。 生後6か月から2歳の再発性喘鳴のある乳児は、2つのグループに分けられます.1つはプロバイオティクスを含む調合乳（治療グループ）と、同様の官能特性を持つ他の調合乳であるプラセボ（コントロールグループ）を受けます.

割付のフローチャート

• 適格性検証のために評価された患者は無作為化され、CONSORT フローチャート第 2 ガイド - 2011 に従います。

研究の実施

現地と調査期間

• Hospital das Clinicals、ペルナンブコ連邦大学 - UFPE、ブラジル。 期間は 2014 年 4 月から 2015 年 4 月まで。

人口調査

• サンプルの選択方法
• 幼児病院ダス クリニカズ UFPE に通院し、研究への参加資格があると見なされ、包含および除外の基準を満たす、喘鳴を繰り返す乳児のサンプル選択。 研究の対象として選択された喘鳴のある乳児は、吸入コルチコステロイドを使用しても喘鳴が続いた.

ランダム化および割り当てメカニズムのタイプ

• 患者の単純な無作為化は、1 ～ 60 の数字の抽選によるものです。

無作為化は、コンピューター上の無作為化プログラムを使用する第三者によって実行されました。

研究の主任研究者による介入への一連の乱数、募集および患者の割り当てが実施されます。

サンプルサイズ

• サンプル サイズの計算は、プロバイオティクスと喘息に関する 2 つの研究に基づいていますが、5% 未満のレベル、80% の検出力研究、最大 20% の許容誤差、60 人の患者の有意性は、乳児の喘鳴の望ましい効果評価を行い、帰無仮説を棄却または受け入れる。

運用化の手順

• 幼児は研究の資格があると見なされ、両親または保護者が署名した研究に参加するための自由でインフォームドコンセントを持っています。

これらの患者は最初に出席し、QE - EISL (両親または保護者との技術面接) および主要なエアロアレルゲンおよび食物アレルゲン (ダニ、猫および犬の上皮、カビ、羽毛、ゴキブリ、卵黄、卵白、牛乳タンパク質) 皮膚プリック テストと胸部 X 線撮影による。

プロバイオティクスまたはプラセボを開始する前の患者は、サイトカイン IL-10、IL-12 および INF-ガンマ、IgE および好酸球を投与します。

喘鳴のある乳児は、吸入コルチコステロイド ベクロメタゾン 50mcg - 1 日あたり 02 ジェット (100mcg - dia) を使用します。最小と見なされる用量で。

10 CFU (Colony Forming Unit)/g の乳酸桿菌、乳酸球菌、連鎖球菌、酵母、アセトバクター タイプのプロバイオティクス株のコンソーシアムを 1 グラムあたり適切な濃度で含むプロバイオティクスを含むフォーミュラ。 1日1回の朝の最初の食事で牛乳、ジュース、またはヨーグルトに加えて使用されるように、1gのプロバイオティクスを含む各サシェに凍結乾燥された形で供給されます. プラセボは、プロバイオティクスを含むフォーミュラと同じ官能特性を備えた同じ方法で供給されます。

この期間中、乳児の喘鳴の現在の危機、親または保護者は、喘鳴発作の日に注意し、標準化された形式で使用される公開回答付きの治療法を提供し、研究者と電話で連絡します。 親または保護者は、喘鳴発作の発生を評価するために、コントロールの毎日の記録を受け取ります。

プロバイオティクスを8週間使用した後、乳児はサイトカインIL-10、IL-12、およびインターフェロン-ガマの新しい測定を受け、両方のグループでプロバイオティクスの免疫応答を評価することを目的としています.

各期間の前と終了時に、喘鳴発作の発生を評価するために、患者は身体検査を受け、親または保護者は面接を受けます。

これらのデータは、プロバイオティクスの補給が乳児の喘鳴の頻度を減らすかどうかを評価するために分析されます.

マスキングおよび割り当てメカニズム

研究の 3 番目のメンバーは、研究者と患者の知らないうちに、無作為化の数に従って、プロバイオティクスとプラセボのレシピエントに数を割り当てます。 容器は等しくなければならず、同じ官能特性の物質が含まれている必要があります。 コンテナーは、サービスおよび以前のランダム化として、番号順に提供されます。

機器の測定と評価

QE- EISL: 書面によるアンケート (乳児の喘鳴に関する国際研究) - 付録 01 を参照してください。これは、人口統計学的特徴、喘鳴およびその潜在的な危険因子に関する 45 の質問からなる手段です。 もともとスペイン語で開発され、ポルトガル語 (ブラジル) に翻訳され、検証されました。 このプロトコルは、研究者、両親または保護者が実施する技術面接を使用して、回答付きのクローズドクエスチョンで使用されます。

インフォームド コンセント フォーム (ICF) のステートメント - apêncice 02 を参照 - 子供を研究に参加させることの承認後。

コントロール プラグ - 臨床 - 付録 03 を参照: プロバイオティクスまたはプラセボ (08 週間) および 08 週間以上を使用している間、親または保護者が日付、「喘鳴」、および認識された治療の必要性を説明するために使用されます。

プリックテスト：標準抽出物ジヒクロラダヒスタミン（１０ｍｇ／ｍｌ）および０．９％生理食塩水（ＦＤＡ－Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ、リオデジャネイロ、ブラジル）を使用する。 抽出物を前腕の掌側表面に滴下し、滅菌ランセットで 1 回穿刺します。 陽性対照として、ヒスタミンおよび生理食塩水陰性対照を使用します。 各反応の直径は15分後に評価され、膨疹が3mm以上の陰性対照の場合、結果は陽性として表されます。

好酸球数および総血清 IgE 投与量: 7.0 ml の量で、認定された専門のラボを備えた末梢血採血管に保持されます。 基準値は、実験室の年齢と標準化に適しています。

胸部 X 線撮影: Hospital das Clinicals - UFPE の放射線科で実施されます。

IL-10、IL-12、およびインターフェロン-ガマの投与量: 5.0 ml の量で、認定された専門の検査室を備えた末梢血採血管に保持されます。 この血液は、Ageu Magalhães 研究所に運ばれ、遠心分離にかけられ、末梢血単核細胞 (PBMC) の上清、血清中のサイトカインのカウントによって実行されます。 次いで、これらの細胞を４８時間培養し、続いてサイトカインＩＬ－１０、ＩＬ－１２およびインターフェロン－ガマの計数を行う。

１×１０ ６ 細胞／ｍＬの濃度の末梢血単核細胞を治療群およびプラセボ群の患者から採取し、フィトヘマグルチニン（ＰＨＡ；１０μｇ／ｍｌ）と共に４８時間インキュベートする。 培養上清中のＩＬ－１０、ＩＬ－１２およびインターフェロン－ガマの産生は、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）キットを使用して分析される。 これらのサイトカインの検出限界は 5 μg/ml です。

統計分析

データ分析のための統計的方法

• 統計分析の場合 最初に、確率分布 (パーセント分析) が実行されます。 続いて、ShapiroWillks と bartlett によるそれぞれ正規分布と分散の均一性検定を適用して、独立したサンプルに対するパラメトリックなスチューデントの t 検定またはマニー ホイットニーの使用を特徴付けます。 カテゴリ変数については、Yates 補正との関連性に対するカイ 2 乗検定が使用されます。 データは、有意水準 p < 0.05 の平均および標準偏差 (パラメトリック検定) または中央値および標準誤差 (ノンパラメトリック検定) として表されます。 21 for Windows 2011 - 分析を生成するために、統計パッケージ SPSS が使用されます。