영아의 재발성 쌕쌕거림: 프로바이오틱스의 위험 요인 및 예방.

목표

일반적인

• 생균제 보충이 영아의 반복적인 천명 빈도를 감소시키는지 평가하십시오.

특정한

• 위험 요인을 연구한 샘플에서 프로바이오틱스 효과의 주요 교란 요인이 될 수 있는 영아의 반복적인 천명에 대한 환경적 및 유전적 요인의 존재를 식별합니다.
• 유아의 천명음 재발로 프로바이오틱스의 효과를 확인하십시오.
• 프로바이오틱스 사용 전후의 IL-10, IL-12 및 인터페론-가마 측정을 통해 영아 천명음의 면역 반응에 대한 프로바이오틱스의 영향을 평가합니다.

디자인 연구

연구 설계

• 추론, 유형 종단, 무작위 시험, 이중 맹검, 평행, 위약 대조 연구.

개최 예정 개입:

• Pernambuco 연방 대학의 유아 병원에 참석한 환자는 임상 조사를 받을 것이며 기본 검사 완료는 부모 또는 보호자의 사전 동의 후 연구에 참여할 자격이 있습니다. 6개월에서 2세 사이의 반복적인 천명음이 있는 영아는 두 그룹으로 나뉘는데, 하나는 프로바이오틱스를 함유한 분유를 받는 그룹(치료 그룹)과 유사한 관능 특성을 가진 다른 분유인 위약을 받는 그룹(대조 그룹)입니다.

무작위화 흐름도

• 적격성 확인을 위해 평가된 환자는 무작위 배정되며 CONSORT 순서도 두 번째 가이드 - 2011을 따릅니다.

연구의 이행

지역 및 조사 기간

• Hospital das Clinicals, Federal University of Pernambuco - UFPE, 브라질. 기간 2014년 4월 ~ 2015년 4월.

인구 조사

• 샘플의 선택 방법
• 유아 병원 das Clinicas UFPE에 참석한 반복되는 천명음 영아의 샘플 선택은 연구에 참여할 자격이 있고 포함 및 제외 기준을 충족하는 것으로 간주됩니다. 연구 대상자로 선정된 천명음 영아는 흡입 코르티코스테로이드를 사용해도 천명음이 지속되었습니다.

무작위화 및 할당 메커니즘의 유형

• 환자의 단순 무작위 배정은 숫자 1 - 60의 추첨에 의해 이루어집니다.

무작위화는 컴퓨터의 무작위화 프로그램을 사용한 제3자에 의해 수행되었습니다.

무작위 번호의 순서, 연구의 주임 조사관에 의한 개입에 대한 환자의 모집 및 할당이 수행될 것입니다.

표본의 크기

• 표본 크기 계산은 프로바이오틱스와 천식에 대한 2개의 연구를 기반으로 한 반면, 5% 미만의 수준, 80%의 검정력 연구 및 최대 20%의 허용 오차, 60명의 환자 유의성이면 충분할 수 있습니다. 유아의 천명에 대한 원하는 효과 평가 및 귀무 가설을 기각하거나 수락합니다.

운영 단계

• 유아는 연구에 적격한 것으로 간주되었으며, 부모 및/또는 보호자가 서명한 연구 참여에 대한 무료 및 정보에 입각한 동의를 받게 됩니다.

이 환자들은 초기에 참석했으며 QE - EISL(부모 또는 보호자와의 기술 면담) 및 주요 공기 알레르겐 및 식품 알레르겐(진드기, 고양이 및 개의 상피, 곰팡이, 깃털, 바퀴벌레, 달걀 노른자, 달걀 흰자 및 우유 단백질) 피부단자검사 및 흉부 방사선 촬영을 통해.

프로바이오틱스 또는 위약을 시작하기 전에 환자는 사이토카인 IL-10, IL-12 및 INF-감마, IgE 및 호산구의 용량을 투여받게 됩니다.

쌕쌕거리는 영아는 흡입용 코르티코스테로이드 베클로메타손 50mcg - 하루에 02제트(100mcg - dia)를 사용하게 됩니다. 최소한으로 간주되는 복용량에서.

10 CFU(Colony Forming Unit)/g의 락토바실리, 락토코커스, 연쇄상구균, 효모 및 아세토박터 유형의 프로바이오틱 균주 컨소시엄을 그램당 적절한 농도로 함유한 프로바이오틱스 포뮬러. 1일 1회 아침 첫 식사에 우유, 주스 또는 요거트와 함께 사용할 수 있도록 프로바이오틱스 1g을 함유한 동결건조 형태로 제공됩니다. 위약은 프로바이오틱스 포뮬러와 동일한 관능적 특성으로 동일한 방식으로 공급될 것입니다.

이 기간 동안 영아의 쌕쌕거림의 현재 위기, 부모 또는 보호자는 쌕쌕거림 발작 및 치료가 제공된 공개 답변과 함께 표준화된 형식으로 사용된 날짜를 기록하고 연구원과 전화로 연락할 것입니다. 부모나 보호자는 쌕쌕거림 발작의 발생을 평가하기 위해 일일 통제 기록을 받게 됩니다.

프로바이오틱스를 사용한 지 8주 후 유아는 두 그룹에서 프로바이오틱스의 면역 반응을 평가하기 위한 목적으로 사이토카인 IL-10, IL-12 및 인터페론-가마의 새로운 측정을 받게 됩니다.

각 기간 전후에 환자는 천명 발작의 발생을 평가하기 위해 신체 검사와 부모 또는 보호자와의 면담을 받게 됩니다.

이 데이터를 분석하여 프로바이오틱스 보충이 유아의 천명 빈도를 줄이는지 여부를 평가할 것입니다.

마스킹 및 할당 메커니즘

연구의 세 번째 구성원은 조사자와 환자 모르게 무작위 수에 따라 프로바이오틱스와 위약 수용자에게 번호를 할당합니다. 용기는 동일해야 하며 동일한 관능적 특성을 가진 물질을 포함해야 합니다. 용기는 번호순으로 서비스 및 이전 무작위 배정으로 제공됩니다.

기기 측정 및 평가

QE-EISL: 서면 설문지(영아의 천명에 대한 국제 연구) - 부록 01을 참조하십시오. 부록 01은 인구학적 특성, 천명 및 잠재적 위험 요인에 대한 45개의 질문으로 구성된 도구입니다. 원래 스페인어로 개발되었으며 포르투갈어(브라질)로 번역되어 검증되었습니다. 이 프로토콜은 연구원, 부모 또는 보호자가 수행하는 기술 인터뷰를 사용하여 답변이 있는 폐쇄형 질문과 함께 사용됩니다.

사전 동의서 양식(ICF) - apêncice 02 참조 - 자녀가 연구에 참여하도록 승인한 후.

제어 플러그 - 임상 - 부록 03 참조: 프로바이오틱 또는 위약(08주) 및 08주 이상을 사용하는 동안 부모 또는 보호자가 날짜, "쌕쌕거림" 및 인지된 치료 필요성을 설명하는 데 사용됩니다.

찌름 시험: 표준화된 추출물 디히클로라다 히스타민(10mg/ml) 및 0.9% 식염수(FDA - Immunotech, Rio de Janeiro, Brazil)가 사용됩니다. 추출물을 팔뚝의 손바닥 표면에 떨어뜨린 다음 멸균 란셋으로 한 번 천자합니다. 양성 대조군으로서 우리는 히스타민 및 음성 식염수 대조군입니다. 각 반응의 직경은 15분 후에 평가되며 결과는 팽진이 ≥ 3mm인 경우 양성으로 표시됩니다.

호산구 수 및 총 혈청 IgE 투여량: 자격을 갖춘 전문 검사실에서 7.0ml의 양으로 말초 혈액 수집 용기에 담습니다. 기준값은 실험실의 나이와 표준화에 적합합니다.

흉부 방사선 촬영: Hospital das Clinicals - UFPE의 방사선과에서 실시.

IL - 10 , IL - 12 및 인터페론 감마의 용량: 자격을 갖춘 전문 검사실에서 5.0ml 양의 말초 혈액 수집 용기에 담습니다. 이 혈액은 Ageu Magalhães 실험실로 옮겨져 원심분리되고 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)의 상청액, 혈청 내 사이토카인 수에 의해 수행됩니다. 그런 다음 이들 세포를 48시간 동안 배양한 후 사이토카인 IL-10, IL-12 및 인터페론-가마의 계수를 수행합니다.

치료군과 위약군의 환자로부터 1 x 106 cells/mL 농도의 말초혈액 단핵세포를 채취하여 피토헤마글루티닌(PHA ; 10μg/ml)과 함께 48시간 동안 배양한다. 배양 상청액에서 IL-10, IL-12 및 인터페론-감마의 생성은 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay) 키트를 사용하여 분석할 것이다. 이러한 사이토카인의 검출 한계는 5μg/ml입니다.

통계 분석

데이터 분석을 위한 통계적 방법

• 통계 분석을 위해 처음에는 확률 분포(백분율 분석)가 수행됩니다. 그 후, 각각 ShapiroWillks 및 bartlett 테스트에 의한 분산의 정규 분포 및 균질성 기술을 적용하여 독립 샘플에 대한 파라메트릭 스튜던트 t 테스트 또는 Manny Whitney의 사용을 특성화합니다. 범주형 변수의 경우 Yates 보정과의 연관성에 대한 카이제곱 테스트가 사용됩니다. 데이터는 p < 0.05의 유의 수준으로 평균 및 표준 편차(모수 검정) 또는 중앙값 및 표준 오차(비모수 검정)로 표시됩니다. Windows 2011의 경우 21 - 분석을 생성하기 위해 통계 패키지 SPSS가 사용됩니다.