Tilbakevendende hvesing hos spedbarn: risikofaktorer og forebygging med probiotika.

MÅL

GENERELL

• Vurder om probiotisk tilskudd reduserer hyppigheten av tilbakevendende hvesing hos spedbarn.

SPESIFIKK

• Identifisering av tilstedeværelsen av miljømessige og genetiske faktorer til tilbakevendende hvesing hos spedbarn, som kan tjene som store forstyrrelser av effekten av probiotika i prøven studerte risikofaktorer.
• Sjekk effekten av probiotika som tilbakefall av hvesing hos spedbarn.
• Evaluer effekten av probiotika på immunresponsen til spedbarns tungpustethet, gjennom måling av IL-10, IL-12 og Interferon-gama før og etter intervensjon med bruk av probiotika.

DESIGNFORSKNING

Studere design

• Inferensiell, typen longitudinell, randomisert studie, dobbeltblind, parallell, placebokontrollert studie.

Intervensjon som skal holdes:

• Pasienter som besøkes ved spedbarnssykehuset ved Federal University of Pernambuco vil gjennomgå klinisk undersøkelse og fullføring av baseline-undersøkelser er kvalifisert til å delta i studien etter informert samtykke fra foreldre eller foresatte. Spedbarn med tilbakevendende hvesing, seks måneder til to år, vil bli delt inn i to grupper - en som får formelen med probiotika (behandlingsgruppe) og den andre formelen med lignende organoleptiske egenskaper, placebo (kontrollgruppe).

Flytskjema for randomisering

• Pasienter som vurderes for kvalifikasjonsbekreftelse vil bli randomisert og følge CONSORT-flytskjemaet andre veiledning - 2011.

IMPLEMENTERING AV FORSKNING

Lokal- og undersøkelsesperiode

• Hospital das Clinicals, Federal University of Pernambuco - UFPE, Brasil. Periode april 2014 til april 2015.

Befolkningsforskning

• Metode for valg av prøve
• Prøveutvalg av spedbarn med tungpustethet som ble besøkt ved Infant Hospital das Clinicas UFPE, for å bli vurdert som kvalifisert for opptak til studien og oppfylle kriteriene for inkludering og ekskludering. Spedbarnet med tungpustethet som ble valgt som kvalifisert for studien forble med hvesing selv ved bruk av inhalerte kortikosteroider.

Type randomiserings- og tildelingsmekanisme

• En enkel randomisering av pasienter vil være ved trekning av tallene 1 - 60.

Randomisering ble utført av en tredje person som brukte et randomiseringsprogram på datamaskinen.

Sekvensen av tilfeldige tall, rekruttering og allokering av pasienter til intervensjonen av hovedetterforskeren av studien vil bli utført.

Prøvestørrelse

• Prøvestørrelsesberegningen var basert på to studier på probiotika og astma, mens et nivå på mindre enn 5 %, en effektstudie på 80 % og en akseptabel feil på opptil 20 %, kan 60 pasienters betydning være tilstrekkelig til å analysere antall ønsket effektevaluering av hvesing hos spedbarn og avvise eller akseptere nullhypotesen.

Operasjonaliseringstrinn

• Spedbarnet ble ansett som kvalifisert for studien, vil ha det fritt og informerte samtykket til å delta i studien signert av foreldrene og/eller foresatte.

Disse pasientene som først deltok, skal gjennomgå en medisinsk undersøkelsesprotokoll med spørsmål og svar QE - EISL (teknisk intervju med foreldre eller foresatte) og oppnåelse av umiddelbar hudtestfølsomhet for store aeroallergener og matallergener (midd, katte- og hundeepitel, muggsopp, fjær, kakerlakker, eggeplomme, eggehvite og kumelkproteiner) gjennom hudstikkprøven og røntgen av brystet.

Pasienter før oppstart av probiotika eller placebo, vil dosen av cytokinene IL-10, IL-12 og INF-gamma, IgE og eosinofiler.

De tungpustede spedbarnene vil bruke det inhalerte kortikosteroidet beklometason 50mcg - 02 dyser per dag (100mcg - dia), fant denne medisinen gratis, merkenavn og spesifikasjoner: Clenil HFA 50mcg spray 200 doser som innledende og grunnleggende behandling for hvesing denne aldersgruppen, ved doser som anses som minimale.

Formelen med probiotika som inneholder 10 CFU (Colony Forming Unit)/g konsortium av probiotiske stammer av lactobacilli, lactococcus, streptokokker, gjær og acetobacter type i passende konsentrasjoner per gram. Det vil bli levert i frysetørket form, i hver pose som inneholder 1 g av probiotika, som skal brukes i tillegg til melk, juice eller yoghurt i det første morgenmåltidet én gang daglig. Placeboen vil bli tilført på samme måte med de samme organoleptiske egenskapene til formel med probiotika.

I løpet av denne perioden, spedbarnet hvesende nåværende krise, vil foreldre eller foresatte notere dagen for hvesende anfall og behandling brukt i en standardisert form med åpne svar, som vil bli gitt, og vil kontakte deg på telefon, med forskeren. Foreldre eller foresatte vil motta en daglig oversikt over kontroll, for å vurdere forekomsten av hvesende anfall.

Etter åtte ukers bruk av probiotika vil spedbarn gjennomgå ny måling av cytokinene IL - 10 , IL - 12 og Interferon - gama, med mål om å evaluere immunresponsen til probiotika i begge grupper.

Før og ved slutten av hver periode vil pasienten gjennomgå fysisk undersøkelse og foreldre eller foresatte til intervju, for å vurdere forekomsten av hvesende anfall.

Disse dataene vil bli analysert for å vurdere om tilskudd med probiotika reduserer hyppigheten av hvesing hos spedbarn.

Maskerings- og tildelingsmekanisme

Et tredje medlem av studien vil tildele et nummer til mottakere av probiotika og placebo i samsvar med antallet randomiseringer, uten etterforskerens og pasientens viten. Beholdere bør være like og inneholde stoffer med samme organoleptiske egenskaper. Beholderne vil bli gitt i numerisk rekkefølge, som service og tidligere randomisering.

Instrumentmåling og vurderinger

QE- EISL: skriftlig spørreskjema (International Study of Wheezing in Infants) - se vedlegg 01, som er et instrument som består av 45 spørsmål om demografiske egenskaper, hvesing og dets potensielle risikofaktorer. Opprinnelig utviklet på spansk, ble oversatt til portugisisk (brasiliansk) og validert. Denne protokollen vil bli brukt med lukkede spørsmål med svar, ved hjelp av det tekniske intervjuet, utført av forskeren, foreldrene eller foresatte.

Form for erklæring om informert samtykke (ICF) - se apêncice 02 - etter godkjenning av dette ved å la barna deres delta i studien.

Kontrollplugg - klinisk - se vedlegg 03: vil bli brukt av foreldre eller foresatte for å beskrive datoen, "wheezing" og opplevd behandlingsbehov, mens du bruker probiotika eller placebo (08 uker) og 08 uker til.

Prikktest: standardiserte ekstrakter dihiclorada histamin (10mg/ml) og 0,9% saltvann (FDA - Immunotech, Rio de Janeiro, Brasil) vil bli brukt. Ekstraktene vil dryppes på underarmens volare overflate og deretter utføres én punktering med steril lansett. Som en positiv kontroll kontrollerer vi histamin og negativ saltvann. Diameteren til hver reaksjon vil bli evaluert etter 15 minutter og resultatet uttrykt som positivt hvis wheal ≥ 3 mm negativ kontroll.

Eosinofiltall og total serum IgE Dosering: vil bli holdt i perifert blodprøvetakerkar med kvalifisert profesjonelt laboratorium, i mengden 7,0 ml. Referanseverdiene er passende for alder og standardisering av laboratoriet.

Røntgen av brystet: holdt ved radiologiavdelingen til Hospital das Clinicals - UFPE.

Dose av IL - 10 , IL - 12 og Interferon-gama: vil bli holdt i perifert blodoppsamlingskar med kvalifisert profesjonelt laboratorium i mengden 5,0 ml. Dette blodet vil bli ført til Laboratory Ageu Magalhães, som vil bli sendt til sentrifugering og utført av supernatanten av perifere mononukleære blodceller (PBMC), tellingen av cytokiner i serum. Deretter utføres dyrking av disse cellene i 48 timer og påfølgende telling av cytokin IL - 10 , IL - 12 og Interferon - gama.

De perifere mononukleære blodcellene i en konsentrasjon på 1 x 106 celler/ml samles inn fra pasientene i behandlingsgruppen og placebogruppen og inkuberes med fytohemaglutinin (PHA; 10μg/ml) i 48 timer. Produksjon av IL - 10, IL - 12 og Interferon - gama i kultursupernatant vil bli analysert ved bruk av enzymkoblede immunsorbentanalysesett (ELISA). Deteksjonsgrensen for disse cytokinene vil være 5ρg/ml.

STATISTISK ANALYSE

Statistiske metoder for dataanalyse

• For statistisk analyse Innledningsvis utføres en sannsynlighetsfordeling (prosentanalyse). Deretter vil teknikkene for normalfordeling og homogenitet av varianser ved hjelp av henholdsvis ShapiroWillks og bartlett, tester bli brukt for å karakterisere bruken av de parametriske Student's t-testene eller Manny Whitney for uavhengige prøver. For kategoriske variabler vil chi-kvadrat-testen for assosiasjon med Yates-korreksjon bli brukt. Data er uttrykt som gjennomsnitt og standardavvik (parametrisk test) eller median og standardfeil (ikke-parametrisk test) med et signifikansnivå på p < 0,05. 21 for Windows 2011 - for å generere analysene vil statistikkpakken SPSS bli brukt.