Återkommande väsande andning hos spädbarn: riskfaktorer och förebyggande med probiotika.

MÅL

ALLMÄN

• Bedöm om probiotikatillskott minskar frekvensen av återkommande väsande andning hos spädbarn.

SPECIFIK

• Identifiera förekomsten av miljömässiga och genetiska faktorer till återkommande väsande andning hos spädbarn, vilket kan fungera som stor förvirring av effekten av probiotika i provet studerade riskfaktorer.
• Kontrollera effekten av probiotika som återkommande väsande andning hos spädbarn.
• Utvärdera effekterna av probiotika på immunsvaret hos spädbarns väsande andning, genom mätning av IL-10, IL-12 och Interferon-gama före och efter intervention med användning av probiotika.

DESIGN FORSKNING

Studera design

• Inferential, typen longitudinell, randomiserad studie, dubbelblind, parallell, placebokontrollerad studie.

Intervention som ska hållas:

• Patienter som besöks på spädbarnssjukhuset vid Federal University of Pernambuco kommer att genomgå klinisk undersökning och slutförande av baslinjeundersökningar är berättigade att delta i studien efter informerat samtycke från föräldrar eller vårdnadshavare. Spädbarn med återkommande väsande andning, sex månader till två år gamla, kommer att delas in i två grupper - en som får formeln med probiotika (behandlingsgrupp) och den andra formeln med liknande organoleptiska egenskaper, placebo (kontrollgrupp).

Flödesschema över randomisering

• Patienter som utvärderas för kvalificeringsverifiering kommer att randomiseras och följa CONSORT-flödesschemats andra guide - 2011.

GENOMFÖRANDE AV FORSKNING

Lokal och undersökningsperiod

• Hospital das Clinicals, Federal University of Pernambuco - UFPE, Brasilien. Perioden april 2014 till april 2015.

Befolkningsforskning

• Metod för urval av prov
• Provurval av återkommande väsande spädbarn som besöktes på Infant Hospital das Clinicas UFPE, för att anses kvalificerade för antagning till studien och uppfylla kriterierna för inkludering och exkludering. De väsande spädbarn som valts ut som kvalificerade för studien förblev väsande även när de använde inhalerade kortikosteroider.

Typ av randomiserings- och tilldelningsmekanism

• En enkel randomisering av patienterna kommer att ske genom dragning av nummer 1 - 60.

Randomisering utfördes av en tredje person som använde ett randomiseringsprogram på datorn.

Sekvensen av slumpmässiga siffror, rekrytering och allokering av patienter till interventionen av studiens huvudutredare kommer att genomföras.

Provstorlek

• Beräkningen av provstorleken baserades på två studier på probiotika och astma, medan en nivå på mindre än 5 %, en effektstudie på 80 % och ett acceptabelt fel på upp till 20 %, kan 60 patienters signifikans vara tillräckligt för att analysera antalet önskad effekt utvärdering av väsande andning hos spädbarn och förkasta eller acceptera nollhypotesen.

Operationaliseringssteg

• Spädbarnen ansågs vara kvalificerade för studien, kommer att ha det fria och informerade samtycket att delta i studien undertecknad av deras föräldrar och/eller vårdnadshavare.

Dessa patienter som initialt deltog, ska genomgå ett läkarundersökningsprotokoll med frågor och svar QE - EISL (teknisk intervju med föräldrar eller vårdnadshavare) och uppnående av omedelbar hudtestkänslighet för stora aeroallergener och livsmedelsallergener (kvalster, katt- och hundepitel, mögel, fjädrar, kackerlackor, äggula, äggvita och komjölksproteiner) genom hudpricktest och röntgen av bröstet.

Patienter innan de påbörjar probiotika eller placebo kommer att dosera cytokinerna IL-10, IL-12 och INF-gamma, IgE och eosinofiler.

De väsande spädbarnen kommer att använda den inhalerade kortikosteroiden beklometason 50mcg - 02 jets per dag (100mcg - dia), hittade denna medicin gratis, varumärke och specifikationer: Clenil HFA 50mcg spray 200 doser som initial och grundläggande behandling för väsande andning i denna åldersgrupp, vid doser som anses vara minimala.

Formeln med probiotika innehållande 10 CFU (Colony Forming Unit)/g konsortium av probiotiska stammar av laktobaciller, laktokocker, streptokocker, jästsvampar och typ acetobacter i lämpliga koncentrationer per gram. Det kommer att tillhandahållas i frystorkad form, i varje dospåse innehållande 1 g av probiotikan, för att användas tillsammans med mjölk, juice eller yoghurt i den första morgonmåltiden en gång dagligen. Placebo kommer att tillföras på samma sätt med samma organoleptiska egenskaper som formel med probiotika.

Under denna period, spädbarnet väsande väsande nuvarande kris, kommer föräldrar eller vårdnadshavare att notera dagen för väsande attacker och behandling som används i en standardiserad form med öppna svar, som kommer att tillhandahållas, och kommer att kontakta dig per telefon, med forskaren. Föräldrar eller vårdnadshavare kommer att få ett dagligt register över kontroll, för att bedöma förekomsten av väsande attacker.

Efter åtta veckors användning av probiotika kommer spädbarn att genomgå nya mätningar av cytokinerna IL-10, IL-12 och Interferon-gama, med målet att utvärdera immunsvaret av probiotika i båda grupperna.

Före och i slutet av varje period kommer patienten att genomgå fysisk undersökning och föräldrar eller vårdnadshavare till en intervju för att bedöma förekomsten av väsande attacker.

Dessa data kommer att analyseras för att bedöma om tillskott med probiotika minskar frekvensen av väsande andning hos spädbarn.

Maskerings- och tilldelningsmekanism

En tredje medlem av studien kommer att tilldela ett nummer till mottagare av probiotika och placebo i enlighet med antalet randomiseringar, utan utredarens och patientens vetskap. Behållare bör vara lika och innehålla ämnen med samma organoleptiska egenskaper. Behållarna kommer att tillhandahållas i numerisk ordning, som service och tidigare randomisering.

Instrumentmätning och bedömningar

QE- EISL: skriftligt frågeformulär (International Study of Wheezing in Infants) - se bilaga 01, som är ett instrument som består av 45 frågor om demografiska egenskaper, väsande andning och dess potentiella riskfaktorer. Ursprungligen utvecklad på spanska, översattes till portugisiska (brasilianska) och validerades. Detta protokoll kommer att användas med slutna frågor med svar, med hjälp av den tekniska intervjun, genomförd av forskaren, föräldrarna eller vårdnadshavare.

Statement of Informed Consent Form (ICF) - se apêncice 02 - efter godkännande därav genom att låta sina barn delta i studien.

Kontrollplugg - klinisk - se bilaga 03: kommer att användas av föräldrar eller vårdnadshavare för att beskriva datum, "väsande andning" och upplevt behandlingsbehov, vid användning av probiotika eller placebo (08 veckor) och 08 veckor till.

Pricktest: standardiserade extrakt dihiclorada histamin (10mg/ml) och 0,9% koksaltlösning (FDA - Immunotech, Rio de Janeiro, Brasilien) kommer att användas. Extrakten kommer att droppas på underarmens volaryta och sedan utföras en punktering med steril lansett. Som en positiv kontroll kontrollerar vi histamin och negativ saltlösning. Diametern för varje reaktion kommer att utvärderas efter 15 minuter och resultatet uttrycks som positivt om wheal ≥ 3 mm negativ kontroll.

Antal eosinofiler och totalt serum IgE Dosering: kommer att hållas i perifert bloduppsamlingskärl med kvalificerat professionellt labb, i mängden 7,0 ml. Referensvärdena är lämpliga för ålder och standardisering av laboratoriet.

Bröströntgen: hålls på röntgenavdelningen på Hospital das Clinicals - UFPE.

Dos av IL - 10 , IL - 12 och Interferon-gama: kommer att hållas i perifert bloduppsamlingskärl med kvalificerat professionellt labb i mängden 5,0 ml. Detta blod kommer att tas till Laboratory Ageu Magalhães, som kommer att centrifugeras och utföras av supernatanten av perifera mononukleära blodceller (PBMC), antalet cytokiner i serum. Därefter utförs odling av dessa celler under 48 timmar och efterföljande räkning av cytokin IL-10, IL-12 och Interferon-gama.

De perifera mononukleära blodcellerna i en koncentration av 1 x 106 celler/ml samlas in från patienterna i behandlingsgruppen och placebogruppen och inkuberas med fytohemaglutinin (PHA; 10 μg/ml) i 48 timmar. Produktionen av IL - 10, IL - 12 och Interferon - gama i odlingssupernatant kommer att analyseras med hjälp av enzymkopplade immunosorbentanalyssatser (ELISA). Detektionsgränsen för dessa cytokiner kommer att vara 5ρg/ml.

STATISTISK ANALYS

Statistiska metoder för dataanalys

• För statistisk analys Inledningsvis görs en sannolikhetsfördelning (procentanalys). Därefter kommer teknikerna för normalfördelning och homogenitet av varianser med hjälp av ShapiroWillks respektive bartlett, tester att tillämpas för att karakterisera användningen av de parametriska Students t-testen eller Manny Whitney för oberoende prover. För kategoriska variabler kommer chi-kvadrattestet för association med Yates-korrigering att användas. Data uttrycks som medelvärde och standardavvikelse (parametriskt test) eller median- och standardfel (icke-parametriskt test) med en signifikansnivå på p < 0,05. 21 för Windows 2011 - för att generera analyserna kommer statistikpaketet SPSS att användas.