Ismétlődő sípoló légzés csecsemőknél: kockázati tényezők és megelőzés probiotikumokkal.

CÉLKITŰZÉSEK

TÁBORNOK

• Mérje fel, hogy a probiotikum-kiegészítés csökkenti-e a csecsemőknél a visszatérő sípoló légzés gyakoriságát.

KÜLÖNLEGES

• Környezeti és genetikai tényezők jelenlétének azonosítása a csecsemők ismétlődő zihálásában, amelyek fő zavaró tényezőként szolgálhatnak a probiotikumok hatásában a vizsgált kockázati tényezőkben.
• Ellenőrizze a probiotikumok hatását, mint a csecsemők zihálásának kiújulását.
• Értékelje a probiotikumok hatását a csecsemő zihálásának immunválaszára az IL-10, IL-12 és az Interferon-gama mérésével a probiotikumok alkalmazásával végzett beavatkozás előtt és után.

TERVEZÉSI KUTATÁS

Dizájnt tanulni

• Következtető, a típusú longitudinális, randomizált vizsgálat, kettős vak, párhuzamos, placebo-kontrollos vizsgálat.

Megtartandó beavatkozás:

• A Pernambuco Szövetségi Egyetem csecsemőkórházában ápolt betegek klinikai vizsgálaton esnek át, és az alapszintű vizsgálatok elvégzése a szülők vagy gondviselők beleegyezése után jogosult a vizsgálatban való részvételre. A hat hónapostól két éves korig ismétlődő zihálásban szenvedő csecsemőket két csoportra osztják – az egyik probiotikumot tartalmazó tápszert kap (kezelési csoport), a másik pedig hasonló érzékszervi jellemzőkkel rendelkező tápszert, placebót (kontrollcsoport).

A véletlenszerűsítés folyamatábrája

• A jogosultság ellenőrzésére értékelt betegeket véletlenszerűen besorolják, és követik a CONSORT második folyamatábráját, Útmutató – 2011.

A KUTATÁS MEGVALÓSÍTÁSA

Helyi és felmérési időszak

• Hospital das Clinicals, Pernambuco Szövetségi Egyetem – UFPE, Brazília. 2014 áprilisa és 2015 áprilisa közötti időszak.

Népességkutatás

• A minta kiválasztásának módja
• A das Clinicas UFPE csecsemőkórházban ápolt, visszatérő sípoló csecsemőkből vett minta, hogy alkalmasnak tekintsék őket a vizsgálatba való felvételre, és megfeleljenek a felvételi és kizárási kritériumoknak. A vizsgálatban részt vevő sípoló csecsemők még az inhalációs kortikoszteroidok használata mellett is sípoló légzéssel maradtak fenn.

A véletlenszerűsítés és az elosztási mechanizmus típusa

• A betegek egyszerű randomizálása 1 és 60 közötti számok sorsolásával történik.

A véletlenszerűsítést egy harmadik személy hajtotta végre, aki egy randomizációs programot használt a számítógépen.

A véletlen számok sorrendjét, a betegek toborzását és a beavatkozáshoz való hozzárendelését a vizsgálat vezető kutatója végzi el.

Minta nagysága

• A mintanagyság számítása két probiotikummal és asztmával kapcsolatos vizsgálaton alapult, míg az 5%-nál kisebb szint, egy 80%-os teljesítményvizsgálat és egy legfeljebb 20%-os elfogadható hiba, 60 beteg szignifikancia elegendő lehet a betegek számának elemzéséhez. a csecsemők sípoló légzésének kívánt hatásának értékelése és a nullhipotézis elutasítása vagy elfogadása.

Operacionalizálási lépések

• A csecsemőket a vizsgálatban való részvételre jogosultnak tekintették, szüleik és/vagy gondviselőik aláírásával szabad és tájékozott beleegyezéssel kell részt venniük a vizsgálatban.

Ezeknek a betegeknek, akik eredetileg részt vettek a vizsgálatban, orvosi vizsgálati protokollon kell átesnie, amely kérdéseket és válaszokat tartalmaz QE - EISL (műszaki interjú a szülőkkel vagy gondviselőkkel), valamint azonnali bőrteszt érzékenység elérését a fő aeroallergénekkel és élelmiszer-allergénekkel (atkák, macska- és kutyahám, penészgombák, tollak, csótányok, tojássárgája, tojásfehérje és tehéntej fehérje) bőrszúrási teszten és mellkas röntgenvizsgálaton keresztül.

A probiotikumok vagy placebók kezelésének megkezdése előtt a betegeknek meg kell határozniuk az IL-10, IL-12 és INF-gamma citokinek, IgE és eozinofilek adagolását.

A sípoló csecsemők az inhalációs kortikoszteroidot beclomethasone 50 mcg - 02 jets per day (100 mcg - dia), ezt a gyógyszert ingyenesen találták, márkanév és specifikációk: Clenil HFA 50 mcg spray 200 adag a sípoló légzés kezdeti és alapvető kezelése ebben a korcsoportban, minimálisnak tartott adagokban.

A 10 CFU (telepképző egység)/g probiotikumot tartalmazó formula lactobacillusok, lactococcusok, streptococcusok, élesztőgombák és acetobacter típusú probiotikus törzsek konzorciuma grammonként megfelelő koncentrációban. Liofilizált formában, 1 g probiotikumot tartalmazó tasakban kerül forgalomba, amelyet a tej, gyümölcslé vagy joghurt mellett naponta egyszer, az első reggeli étkezés során kell használni. A placebót ugyanolyan érzékszervi jellemzőkkel látják el, mint a probiotikumokkal együtt.

Ebben az időszakban, a csecsemő zihálás jelenkrízisében a szülők vagy gondviselők egységes formában, nyílt válaszokkal feljegyzik a zihálási rohamok napját és az alkalmazott kezelést, amelyet megadnak, és telefonon felveszik Önnel a kapcsolatot a kutatóval. A szülők vagy gyámok napi ellenőrzési jegyzőkönyvet kapnak, hogy felmérjék a zihálási rohamok előfordulását.

Nyolc hetes probiotikum-használat után a csecsemőknél új méréseket végeznek az IL-10, IL-12 és az Interferon-gama citokinek szintjén azzal a céllal, hogy mindkét csoportban értékeljék a probiotikumok immunválaszát.

Az egyes időszakok előtt és végén a pácienst fizikális vizsgálatnak vetik alá, a szülőket vagy gondviselőket pedig interjúra, hogy felmérjék a zihálási rohamok előfordulását.

Ezeket az adatokat elemezni fogják annak felmérésére, hogy a probiotikumokkal történő kiegészítés csökkenti-e a csecsemők ziháló légzésének gyakoriságát.

Maszkolási és allokációs mechanizmus

A vizsgálat harmadik tagja a probiotikumokat és a placebót kapó betegeket a véletlen besorolási számoknak megfelelően, a vizsgáló és a páciens tudta nélkül rendel számot. A tárolóedényeknek egyenlőnek kell lenniük, és azonos érzékszervi jellemzőkkel rendelkező anyagokat kell tartalmazniuk. A konténereket numerikus sorrendben, szolgáltatásként és korábbi véletlenszerűsítésként biztosítjuk.

Eszközök mérése és értékelése

QE-EISL: írásbeli kérdőív (International Study of Wheezing in Infants) – lásd a 01. számú mellékletet, amely 45 kérdésből álló eszköz a demográfiai jellemzőkről, a zihálásról és annak lehetséges kockázati tényezőiről. Eredetileg spanyolul fejlesztették ki, lefordították portugálra (brazil) és érvényesítették. Ezt a protokollt a kutató, a szülők vagy a gyámok által készített, zárt kérdések megválaszolásával, technikai interjú segítségével alkalmazzuk.

Tájékozott beleegyező nyilatkozat (ICF) – lásd apêncice 02 – annak jóváhagyását követően, hogy gyermekeik részt vegyenek a vizsgálatban.

Kontrolldugó – klinikai – lásd a 03. függeléket: a szülők vagy a gyámok fogják használni a dátum, a "zihálás" és az észlelt kezelési igény leírására probiotikum vagy placebo (08. hét) és további 08. hét esetén.

Prick teszt: standardizált dihiklorada hisztamin (10 mg/ml) és 0,9%-os sóoldat (FDA – Immunotech, Rio de Janeiro, Brazília) kivonatokat használunk. A kivonatokat az alkar voláris felületére csepegtetik, majd steril lándzsával egy szúrást végeznek. Pozitív kontrollként hisztamin és negatív sóoldat kontroll. Az egyes reakciók átmérőjét 15 perc elteltével értékeljük, és az eredményt pozitívnak fejezzük ki, ha a búza ≥ 3 mm negatív kontroll.

Eozinofil szám és teljes szérum IgE Adagolás: perifériás vérgyűjtő edényben, minősített professzionális laborban kerül tárolásra, 7,0 ml mennyiségben. A referenciaértékek megfelelnek az életkornak és a laboratórium szabványosításának.

Mellkas röntgenfelvétel: a Hospital das Clinicals - UFPE radiológiai osztályán.

IL-10, IL-12 és Interferon-gama adagja: 5,0 ml-es perifériás vérgyűjtő edényben, minősített professzionális laborban kerül tárolásra. Ezt a vért a Laboratory Ageu Magalhãesbe viszik, ahol centrifugálásnak vetik alá, és a perifériás vér mononukleáris sejtjeinek (PBMC) felülúszójával, a szérum citokinek számával elvégzik. Ezután ezeket a sejteket 48 órán keresztül tenyésztjük, majd megszámoljuk az IL-10, IL-12 és az Interferon-gama citokinszintjét.

A perifériás vér mononukleáris sejtjeit 1 x 106 sejt/ml koncentrációban összegyűjtjük a kezelt csoport és a placebo csoport betegeitől, és fitohemaglutininnel (PHA; 10 μg/ml) 48 órán keresztül inkubáljuk. Az IL-10, IL-12 és Interferon-gama termelődését a tenyészet felülúszójában enzim-linked immunosorbent assay (ELISA) kitekkel elemzik. Ezen citokinek kimutatási határa 5ρg/ml lesz.

STATISZTIKAI ANALÍZIS

Az adatelemzés statisztikai módszerei

• Statisztikai elemzéshez Kezdetben valószínűségi eloszlást (százalékos elemzést) hajtanak végre. Ezt követően a normál eloszlás és a variancia homogenitás technikáit ShapiroWillks, illetve bartlett tesztek segítségével fogják alkalmazni a parametrikus Student-féle t-tesztek vagy Manny Whitney független minták használatának jellemzésére. Kategorikus változók esetén a Yates korrekcióval való társítás khi-négyzet tesztjét kell használni. Az adatokat átlag és szórás (paraméteres teszt) vagy medián és standard hiba (nem paraméteres teszt) formájában fejezzük ki, p<0,05 szignifikanciaszinttel. 21 Windows 2011 esetén - az elemzések elkészítéséhez az SPSS statisztikai csomagot kell használni.