糖尿病性多発神経障害における酸化ストレスとミトコンドリア機能に対するスタチン

はじめに 糖尿病患者の神経機能障害システムは、糖尿病性神経障害として知られており、2 型糖尿病 (T2DM) 被験者で最も一般的な微小血管合併症 (最大 60%) と見なされています。 糖尿病性多発神経障害 (DPN) は、全症例の約 70% を占めています。 その診断は、臨床的特徴と異常な神経伝導検査 (NCS) に基づいて検証されたスコアによって確立されます。 病態生理学的所見には、主に神経アポトーシスにつながる慢性高血糖によって誘発される酸化ストレスによる、軸索変性および分節脱髄に続発する多発性および局所性神経線維の喪失が含まれます。 末梢神経損傷に関与する他のメカニズムは、一酸化窒素 (NO) によって誘発されるニトロソ化ストレスです。

エゼチミブは、肝臓のコレステロール摂取量を減少させることによりカイロミクロン中のコレステロールエステル含有量を減少させ、その結果、LDLの取り込みと血漿の浄化が増加します。単剤療法として、LDL-C を 17% 減少させます。 シンバスタチンと組み合わせると、コレステロールの減少が潜在的に増加します。さらに、スタチンの多面的効果には、12週間の治療後の核因子カッパB活性の増加とスーパーオキシドイオンの改善が含まれます。 別のヒドロキシ-メチル-グルタリル補酵素 A 阻害剤であるロスバスタチンは、ミトコンドリアおよび細胞の脂質過酸化 (LPO) 産生を減少させるフリーラジカル担体として作用することにより、抗酸化作用を持っています。

DPN患者の酸化ストレスに対するエゼチミブ/シンバスタチンおよびロスバスタチンの効果を評価するために、この研究を実施しました。

方法 研究デザイン 無作為二重盲検プラセボ対照第II相臨床試験が、メキシコのグアダラハラ大学のクリニックおよび実験治療学研究所で実施されました。 被験者は、与えられた薬を知らない別の研究者によって作成されたランダム化されたコンピューターベースのリストを介して、1:1:1 の並列シーケンスでブロック内の 3 つのグループ治療に割り当てられました。 患者は、プラセボ、エゼチミブ/シンバスタチン、およびロスバスタチンを 16 週間、1 日 1 回投与された対照群に分けられました。 選考期間は 2012 年 2 月から 2013 年 1 月まで行った。 酸化ストレス状態を比較するために、血液銀行から無作為化されていない5人の健康な被験者（HS）を選択しました。

研究対象集団 包含基準は 18 歳以上、米国糖尿病協会による T2DM、Dyck らによる DPN でした。 al.3 基準、HbA1c <12%、インフォームド コンセントに署名済み。 腎不全または肝不全、妊娠中または授乳中、その他の神経障害（アルコール誘発性、神経根障害、自己免疫、癌関連）の場合は除外され、治療アドヒアランスの欠如（薬物摂取の80％未満）、重度の副作用および/または深刻な病気。 患者はフォーラムへの招待によって選ばれました。プライマリケアクリニックから募集された外来患者。 2010年2月から2012年までに当研究所が以前に収集したデータベース。 患者は、プラセボ 100 mg、エゼチミブ/シンバスタチン 10/20 mg、およびロスバスタチン 20 mg のように、夜間のみ同じ時間に薬を服用するように指示されました。 すべての薬は物理的特性が類似しており、別のグループの研究者によって慎重に充填された暗いバイアルに入れられ、患者コードを含むそれぞれのタグが付けられました。 また、患者には、薬物投与の日付と時刻を書き留める日記が提供され、薬物の副作用が感じられました。 このような情報は、4 週間ごとに収集および登録されました。 主要なアウトカムは、16 週間の介入前後の酸化ストレス マーカー LPO、NO、および TAC でした。 副次評価項目は、臨床、NCS、および代謝 [空腹時血糖、HbA1c、総コレステロール、高密度および低密度リポタンパク質 (HDL、LDL)、およびトリグリセリド] パラメーターでした。 安全性プロファイルは、薬物有害反応、腎臓 (尿素、クレアチニン)、および肝臓 [(アラミンおよびアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、γ-グルタミルトランスフェラーゼ、ビリルビンおよびホスホキナーゼ] 実験変数) で評価されました。

酸化ストレスおよびミトコンドリア機能マーカー LPO は、キットの仕様 (Oxford Biomedical Research Inc.、FR12)、マロンジアルデヒド (MDA) および 4-ヒドロキシアルケナール (HNA) と反応する色素原物質で処理された 200 μL の血清に従って測定されました。吸光度は 586 nm で測定され、結果は nmol/mL で表されます。

サンプルの以前の除タンパクでは、85 μL の血清 (一酸化窒素アッセイ キット、ユーザー プロトコル 482650) を使用して NO の濃度を決定するための比色分析を実行し、結果は pmol/mL として表されました。

総抗酸化能 (TAC) は 200 μL の血清で実現され、尿酸に相当するミリモル (mM) の値が得られました (Total Antioxidant Power Kit、No. 02090130、Oxford Biomedical Research®)。

臨床的および神経伝導変数 神経因性症状 (NSS) および障害スコア (NIS) アル。身体検査と既往歴によって得られた。 また、米国電気診断医学会の要求に従って、腓骨、脛骨、正中および尺骨神経からの潜時、持続時間、振幅および運動神経伝導速度、ならびに腓腹神経、正中および尺骨神経からの感度パラメータも測定しました。

倫理的考慮事項 この研究は、メキシコのグアダラハラ大学健康科学大学センターの研究倫理委員会によって承認されました。 患者の機密性を保証するために各参加者に識別コードが割り当てられ、プロトコルに入る前に、国内法および国際法に従って、またヘルシンキ声明 (http://www.wma.net/ es/30 出版物/ 10 ポリシー/b3/17c.pdf、 2011 年 1 月にアクセス）。

統計解析 サンプルサイズは、LPO の差変化 0.05 nmol/mL、信頼区間 95%、効力 80%、両側 p<0.05 を考慮した臨床試験デザイン式によって得られ、それぞれ 21 でした。グループ。 量的変数は、平均±標準偏差として表されました。 Kolmogorov-Smirnov および Shapiro-Wilk 検定を実行して、変数のノンパラメトリック分布を決定しました。 フリードマン検定とウィルコクソン検定は、測定の前後で実現され、クラスカル・ウォリスは、グループ間の比較のための事後分析として、マン・ホイットニーの U を使用して実現されました。 質的変数は、頻度とパーセンテージとして表されました。 カイ二乗検定を使用して、治療前後の二分変数の違いを評価しました。グループ間の比較は、必要に応じてフィッシャーの正確検定とχ2によって決定されました。 有意水準はp値<0.05で確立されました。