Statiinit oksidatiiviseen stressiin ja mitokondrioiden toimintaan diabeettisessa polyneuropatiassa

Johdanto Diabetespotilaiden hermoston toimintahäiriö tunnetaan diabeettisena neuropatiana, ja sitä pidetään yleisimpana mikrovaskulaarisena komplikaationa - jopa 60 % tyypin 2 diabetesta (T2DM) sairastavilla potilailla. Diabeettinen polyneuropatia (DPN) muodostaa ≈70 % kaikista tapauksista. Sen diagnoosi vahvistetaan kliinisten ominaisuuksien ja epänormaalin hermojohdon tutkimuksiin (NCS) perustuvien validoitujen pisteiden avulla. Patofysiologisiin löydöksiin kuuluu multifokaalisten ja fokaalisten hermosäikeiden menetys aksonaalisen rappeutumisen seurauksena ja segmentaalinen demyelinisaatio, joka johtuu periaatteessa kroonisen hyperglykemian aiheuttamasta oksidatiivisesta stressistä, joka johtaa hermoston apoptoosiin. Muita perifeeristen hermovaurioiden mekanismeja ovat typpioksidin (NO) aiheuttama nitrosatiivinen stressi.

Etsetimibi vähentää kolesteroliesteripitoisuutta kylomikroneissa vähentämällä maksan kolesterolin saantia, mikä lisää LDL:n ottoa ja plasman poistumista; monoterapiana se alentaa LDL-kolesterolia 17 %. Yhdistettynä simvastatiinin kanssa kolesterolin aleneminen mahdollisesti lisääntyy; lisäksi statiinien pleiotrooppisiin vaikutuksiin kuuluu tumatekijä kappa B -aktiivisuuden lisääntyminen ja superoksidi-ionien paraneminen 12 viikon hoidon jälkeen. Toisella hydroksimetyyliglutaryylikoentsyymi A:n estäjällä, rosuvastatiinilla, on antioksidanttivaikutus toimimalla vapaiden radikaalien kantajana, joka vähentää mitokondrioiden ja solujen lipidiperoksidaatiota (LPO).

Teimme tämän tutkimuksen arvioidaksemme etsetimibin/simvastatiinin ja rosuvastatiinin vaikutusta oksidatiiviseen stressiin potilailla, joilla on DPN.

Menetelmät Tutkimussuunnitelma Satunnaistettu, kaksoissokkoutettu, lumekontrolloitu vaiheen II kliininen tutkimus suoritettiin Clinic and Experimental Therapeutics Institutessa, Guadalajaran yliopistossa, Meksikossa. Koehenkilöt jaettiin kolmeen ryhmähoitoon lohkoissa, joissa oli rinnakkainen sekvenssi 1:1:1 satunnaistetun tietokonepohjaisen luettelon kautta, jonka oli luonut eri tutkija, joka ei ollut tietoinen annetuista lääkkeistä. Potilaat jaettiin: kontrolliryhmään, joka sai lumelääkettä, etsetimibia/simvastatiinia ja rosuvastatiinia päivittäisenä kerta-annoksena 16 viikon ajan. Valintajakso suoritettiin helmikuusta 2012 tammikuuhun 2013. Valitsimme veripankista viisi ei-satunnaistettua tervettä henkilöä (HS) vertaillaksemme oksidatiivisen stressin tilaa.

Tutkimuspopulaatio Sisällyskriteerit olivat ≥18-vuotiaita, T2DM American Diabetes Associationin mukaan ja DPN, Dyck et. al.3 kriteerit, HbA1c <12 % ja tietoinen suostumus allekirjoitettu. Ne suljettiin pois munuaisten tai maksan vajaatoiminnasta, raskaana olevista tai imettävistä, muista neuropatioista (alkoholin aiheuttama, radikulopatia, autoimmuuni, syöpään liittyvä) ja eliminoitiin, jos hoitoon ei noudatettu (< 80 % lääkkeen ottamisesta), vakava haittavaikutus ja/ tai vakava sairaus. Potilaat valittiin kutsun perusteella foorumeilla; perusterveydenhuollon klinikoilta rekrytoidut avopotilaat; ja instituuttimme aiemmin keräämä tietokanta helmikuusta 2010 vuoteen 2012. Potilaita neuvottiin ottamaan lääkkeensä vain illalla samaan aikaan joka päivä seuraavasti: lumelääke 100 mg, etsetimibi/simvastatiini 10/20 mg ja rosuvastatiini 20 mg. Kaikki lääkkeet olivat fyysisiltä ominaisuuksiltaan samanlaisia ​​ja esiteltiin tummissa injektiopulloissa, jotka toinen ryhmätutkija täytti huolellisesti ja laittoi vastaavan lipun potilaskoodilla. Potilaille annettiin myös päiväkirja, johon he kirjoittivat lääkkeen antopäivämäärän ja -ajan sekä kokeneet lääkkeen haittavaikutukset. Tällaisia ​​tietoja kerättiin ja rekisteröitiin 4 viikon välein. Ensisijaiset tulokset olivat oksidatiiviset stressimarkkerit LPO, NO ja TAC ennen ja jälkeen 16 viikon interventiota. Toissijaiset tulokset olivat kliiniset, NCS- ja metaboliset [paastoglukoosi-, HbA1c-, kokonaiskolesteroli-, korkea- ja matalatiheyksiset lipoproteiinit (HDL, LDL) ja triglyseridit] parametrit. Turvallisuusprofiili arvioitiin lääkkeiden haittavaikutusten, munuaisten (urea, kreatiniini) ja maksan [(alamiini- ja aspartaattiaminotransferaasi, gama-glutamyylitransferaasi, bilirubiinit ja fosfokinaasi]) laboratoriomuuttujat.

Oksidatiivisen stressin ja mitokondrioiden toiminnan markkerit LPO mitattiin pakkauksen spesifikaatioiden mukaisesti (Oxford Biomedical Research Inc., FR12), 200 µl seerumia käsiteltiin kromogeeniaineella, joka reagoi malondialdehydin (MDA) ja 4-hydroksialkenaalien (HNA) kanssa. absorbanssi mitattuna aallonpituudella 586 nm ja tulokset ilmaistuna yksikkönä nmol/ml.

Aikaisemmin näytteiden proteiininpoisto suoritimme kolorimetrisen NO:n pitoisuuden määrittämiseksi 85 µl:lla seerumia (Nitric Oxide Assay Kit, User protocol 482650), tulokset ilmaistuina pmol/ml.

Kokonaisantioksidanttikapasiteetti (TAC) toteutettiin 200 ul:lla seerumia, jotta saatiin millimooliekvivalenttiarvot (mM) virtsahappoa (Total Antioxidant Power Kit, nro 02090130, Oxford Biomedical Research®).

Kliiniset ja hermojen johtumismuuttujat Neuropaattiset oireet (NSS) ja vammaisuuspisteet (NIS) ovat kuvanneet Dyck, et. al. saatu fyysisellä tutkimuksella ja anamneesilla. Mittasimme myös latenssin, keston, amplitudin ja motorisen hermon johtamisnopeuden pohjeluun, sääriluun, mediaani- ja kyynärluun hermoilta sekä herkkyysparametreja suraali-, mediaani- ja kyynärluuhermoilta, kuten American Association of Electrodiagnostic Medicine vaatii.

Eettiset näkökohdat Tutkimuksen hyväksyi Meksikon Guadalajaran yliopiston Health Science University Centerin tutkimus- ja etiikkakomitea. Jokaiselle osallistujalle annettiin tunnistekoodit potilaan luottamuksellisuuden takaamiseksi ja tietoinen suostumuslomake allekirjoitettiin ennen protokollaan kirjaamista kansallisten ja kansainvälisten lakien sekä Helsingin lausunnon (http://www.wma.net/) mukaisesti. es/30 Julkaisut/ 10 Policy/b3/17c.pdf, näytetty tammikuussa 2011).

Tilastollinen analyysi Näytteen koko saatiin kliinisen tutkimuksen suunnittelukaavalla, jossa otettiin huomioon eromuutos 0,05 nmol/ml LPO:ssa, 95 %:n luottamusväli, 80 %:n tehokkuus ja kaksisuuntainen p<0,05, mikä johti 21:een kullekin. ryhmä. Kvantitatiiviset muuttujat ilmaistiin keskiarvona ± standardipoikkeama. Kolmogorov-Smirnov- ja Shapiro-Wilk-testit suoritettiin muuttujien ei-parametrisen jakauman määrittämiseksi. Friedman- ja Wilcoxon-testit toteutettiin ennen ja jälkeen mittauksia ja Kruskal-Wallis Mann-Whitneyn U:lla post-hoc-analyysinä ryhmien välisiä vertailuja varten. Laadulliset muuttujat ilmaistiin frekvensseinä ja prosentteina. Chi-neliö-testiä käytettiin arvioimaan eroja dikotomiamuuttujissa ennen hoitoa ja sen jälkeen, ryhmien väliset vertailut määritettiin Fisherin eksaktilla testillä ja χ2 tarpeen mukaan. Merkitystaso määritettiin p-arvolla <0,05.