他汀类药物对糖尿病性多发性神经病氧化应激和线粒体功能的影响

简介 糖尿病患者的神经功能障碍系统被称为糖尿病性神经病变，被认为是 2 型糖尿病 (T2DM) 受试者中最普遍的微血管并发症——高达 60%。 糖尿病性多发性神经病 (DPN) 占所有病例的约 70%。 其诊断是通过基于临床特征和异常神经传导研究 (NCS) 的有效评分来确定的。 病理生理学发现包括继发于轴突变性和节段性脱髓鞘的多灶性和局灶性神经纤维丢失，主要是由于慢性高血糖引起的氧化应激，导致神经细胞凋亡。 周围神经损伤涉及的其他机制是由一氧化氮 (NO) 诱导的亚硝化应激。

依折麦布通过减少肝脏胆固醇的摄入来减少乳糜微粒中的胆固醇酯含量，从而增加低密度脂蛋白的摄取和血浆净化；作为单一疗法，它可将 LDL-C 降低 17%。 与辛伐他汀合用时，可能会增加胆固醇的降低；此外，他汀类药物的多效性作用包括在治疗 12 周后增加核因子 kappa B 活性和改善超氧离子。 另一种羟甲基戊二酰辅酶 A 抑制剂瑞舒伐他汀通过作为自由基载体减少线粒体和细胞脂质过氧化 (LPO) 的产生而具有抗氧化作用。

我们进行了这项研究，以评估依折麦布/辛伐他汀和瑞舒伐他汀对 DPN 患者氧化应激的影响。

方法 研究设计 一项随机、双盲、安慰剂对照的 II 期临床试验在墨西哥瓜达拉哈拉大学临床和实验治疗研究所进行。 通过基于计算机的随机列表，受试者被分配到三组治疗组中，平行顺序为 1:1:1，由不同的研究人员生成，不知道所给药物。 患者被分为：接受安慰剂、依折麦布/辛伐他汀和瑞舒伐他汀作为每日单剂量治疗 16 周的对照组。 评选时间为2012年2月至2013年1月。 我们从血库中选择了 5 名非随机健康受试者 (HS) 来比较氧化应激状态。

研究人群纳入标准为 ≥ 18 岁，根据美国糖尿病协会的 T2DM 和 Dyck 等人的 DPN。 al.3 标准，HbA1c <12%，并签署知情同意书。 如果肾功能衰竭或肝功能衰竭、怀孕或哺乳、其他神经病（酒精引起的、神经根病、自身免疫性、癌症相关），则将其排除，如果缺乏治疗依从性（<80% 的药物摄入量）、严重的药物不良反应和/或严重的健康疾病。 患者是通过论坛邀请选择的；从初级保健诊所招募的门诊病人；和我们研究所先前从 2010 年 2 月到 2012 年收集的数据库。 患者被告知仅在每天同一时间晚上服用药物，具体如下：安慰剂 100 mg、依折麦布/辛伐他汀 10/20 mg 和瑞舒伐他汀 20 mg。 所有药物的物理特性都相似，并装在深色小瓶中，由另一组研究人员仔细填充，他们在各自的标签上贴上患者代码。 此外，还为患者提供了一本日记，他们会在日记中写下给药的日期和时间，以及对药物不良反应的感受。 此类信息每 4 周收集和登记一次。 主要结果是 16 周干预前后的氧化应激标志物 LPO、NO 和 TAC。 次要结果是临床、NCS 和代谢[空腹血糖、HbA1c、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白（HDL、LDL）和甘油三酯]参数。 通过药物不良反应、肾脏（尿素、肌酸酐）和肝脏[（谷氨酰胺和天冬氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰转移酶、胆红素和磷酸激酶]实验室变量评估安全性。

氧化应激和线粒体功能标志物 LPO 是根据试剂盒规格（​​牛津生物医学研究公司，FR12）测量的，200 μL 血清用与丙二醛 (MDA) 和 4-羟基烯醛 (HNA) 反应的色原物质处理，在 586 nm 处测量吸光度，结果以 nmol/mL 表示。

之前对样品进行脱蛋白处理，我们用 85 µL 血清（一氧化氮测定试剂盒，用户协议 482650）进行了比色法以确定 NO 的浓度，结果表示为 pmol/mL。

使用 200 µL 血清实现总抗氧化能力 (TAC)，以获得相当于尿酸的毫摩尔 (mM) 值（总抗氧化能力套件，编号 02090130，Oxford Biomedical Research®）。

Dyck 等人描述的临床和神经传导变量 阿尔。通过体检和病史获得。 我们还根据美国电诊断医学协会的要求，测量了腓骨神经、胫神经、正中神经和尺神经的潜伏期、持续时间、振幅和运动神经传导速度，以及腓肠神经、正中神经和尺神经的敏感性参数。

伦理方面的考虑 该研究得到了墨西哥瓜达拉哈拉大学健康科学大学中心研究与伦理委员会的批准。 根据国家和国际法律以及赫尔辛基声明 (http://www.wma.net/ es/30 出版物/10 政策/b3/17c.pdf, 2011 年 1 月访问）。

统计分析 样本量是通过临床研究设计公式获得的，考虑到 LPO 中 0.05 nmol/mL 的差异变化、95% 置信区间、80% 效力和双尾 p<0.05，这导致每个 21团体。 定量变量表示为平均值±标准偏差。 执行 Kolmogorov-Smirnov 和 Shapiro-Wilk 检验以确定变量的非参数分布。 Friedman 和 Wilcoxon 检验用于测量前后，Kruskal-Wallis 和 Mann-Whitney's U 作为组间比较的事后分析。 定性变量表示为频率和百分比。 卡方检验用于评价治疗前后二分变量的差异，组间比较采用Fisher精确检验，必要时采用χ2。 显着性水平是根据 p 值 <0.05 确定的。