Statinok az oxidatív stresszhez és a mitokondriális funkcióhoz diabéteszes polineuropathiában

Bevezetés A cukorbetegek idegrendszeri működési zavara diabéteszes neuropátia néven ismert, és a legelterjedtebb mikrovaszkuláris szövődménynek számít – a 2-es típusú cukorbetegségben (T2DM) szenvedő betegek 60%-áig. A diabéteszes polyneuropathia (DPN) az összes eset ≈70%-át teszi ki. Diagnózisát a klinikai jellemzők és a kóros idegvezetési vizsgálatok (NCS) validált pontszámai alapján állapítják meg. A patofiziológiai leletek közé tartozik a multifokális és fokális idegrostok elvesztése az axonális degeneráció következtében, valamint a szegmentális demyelinizáció, alapvetően a krónikus hiperglikémia által kiváltott oxidatív stressz következtében, ami idegi apoptózishoz vezet. A perifériás idegsérülésben szerepet játszó másik mechanizmus a nitrogén-monoxid (NO) által kiváltott nitrozatív stressz.

Az ezetimib csökkenti a koleszterin-észter-tartalmat a kilomikronokban azáltal, hogy csökkenti a máj koleszterinfelvételét, ami ennek következtében növeli az LDL-felvételt és a plazma kiürülését; monoterápiaként 17%-kal csökkenti az LDL-C-t. Simvasztatinnal kombinálva potenciálisan fokozódik a koleszterinszint; továbbá a sztatinok pleiotróp hatásai közé tartozik a nukleáris faktor kappa B aktivitásának növekedése és a szuperoxid ionok javulása 12 hetes kezelés után. Egy másik hidroxi-metil-glutaril-koenzim-A-gátló, a rosuvastatin antioxidáns hatású azáltal, hogy szabad gyökös hordozóként működik, csökkentve a mitokondriális és celluláris lipid-peroxidáció (LPO) termelést.

Ezt a vizsgálatot az ezetimib/szimvasztatin és a rosuvastatin oxidatív stresszre gyakorolt ​​hatásának értékelésére végeztük DPN-ben szenvedő betegeknél.

Módszerek A vizsgálat felépítése Randomizált, kettős vak, placebo-kontrollos II. fázisú klinikai vizsgálatot végeztek a Guadalajara Egyetem Klinikai és Kísérleti Terápiás Intézetében, Mexikóban. Az alanyokat három csoportos kezelésre osztották be 1:1:1 párhuzamos szekvenciájú blokkban egy randomizált számítógépes listán keresztül, amelyet egy másik kutató állított össze, aki nem tudott a beadott gyógyszerekről. A betegeket a következőkre osztották: kontrollcsoport, amely napi egyszeri adagban placebót, ezetimibet/szimvasztatint és rozuvasztatint kapott 16 héten keresztül. A kiválasztási időszak 2012 februárjától 2013 januárjáig zajlott. 5 nem randomizált egészséges alanyt (HS) választottunk ki egy vérbankból, hogy összehasonlítsuk az oxidatív stressz állapotát.

Vizsgálati populáció A beválasztási kritériumok ≥18 évesek, T2DM az American Diabetes Association szerint és DPN Dyck et. al.3 kritérium, HbA1c <12%, és aláírt tájékozott beleegyezés. Vese- vagy májelégtelenség, terhesség vagy szoptatás, egyéb neuropátiák (alkohol által kiváltott, radikulopátia, autoimmun, rákkal kapcsolatos) esetén kizárásra kerültek, és a kezelés hiánya esetén (a gyógyszerbevitel <80%-a), súlyos gyógyszermellékhatás és/ vagy súlyos egészségügyi betegség. A betegeket meghívás alapján választották ki fórumokon; az alapellátási klinikákról toborzott járóbetegek; és az Intézetünk által korábban 2010 februárja és 2012 között gyűjtött adatbázis. A betegeket arra utasították, hogy csak este vegyék be gyógyszereiket minden nap ugyanabban az időben, a következők szerint: placebo 100 mg, ezetimib/simvastatin 10/20 mg és rosuvastatin 20 mg. Valamennyi gyógyszer hasonló volt a fizikai jellemzőket tekintve, és sötét fiolákban került forgalomba, amelyeket egy másik kutatócsoport gondosan megtöltött, és elhelyezte a megfelelő címkét a páciens kódjával. Ezenkívül a betegek naplót kaptak, amelybe feljegyezték a gyógyszer beadásának dátumát és időpontját, valamint az észlelt gyógyszermellékhatásokat. Az ilyen információkat 4 hetente gyűjtötték és regisztrálták. Az elsődleges eredmények az oxidatív stressz markerek LPO, NO és TAC voltak a 16 hetes beavatkozás előtt és után. A másodlagos kimenetelek klinikai, NCS és metabolikus [éhgyomri glükóz, HbA1c, összkoleszterin, magas és alacsony sűrűségű lipoproteinek (HDL, LDL) és trigliceridek] paraméterei voltak. A biztonságossági profilt a gyógyszermellékhatások, a vese (karbamid, kreatinin) és a máj [(alamin- és aszpartát-aminotranszferáz, gama-glutamiltranszferáz, bilirubinok és foszfokináz]) laboratóriumi változóival értékelték.

Az oxidatív stressz és a mitokondriális funkció markereit az LPO-t a kit specifikációi szerint mértük (Oxford Biomedical Research Inc., FR12), 200 μl szérumot kromogén anyaggal dolgoztunk fel, amely malondialdehiddel (MDA) és 4-hidroxi-alkenálokkal (HNA) reagál, az 586 nm-en mért abszorbancia és az eredmények nmol/ml-ben kifejezve.

A minták korábbi deproteinizálása során 85 µl szérummal (Nitric Oxide Assay Kit, User Protocol 482650) kolorimetriás vizsgálatot végeztünk a NO koncentráció meghatározására, az eredményeket pmol/mL-ben fejeztük ki.

A teljes antioxidáns kapacitást (TAC) 200 µl szérummal realizáltuk, hogy megkapjuk a húgysav millimol (mM) ekvivalens értékét (Total Antioxidant Power Kit, No. 02090130, Oxford Biomedical Research®).

Klinikai és idegvezetési változók Neuropátiás tünetek (NSS) és rokkantsági pontszámok (NIS), amelyeket Dyck és et. al. fizikális vizsgálattal és anamnézissel szereztük be. Mértük a látenciát, az időtartamot, az amplitúdót és a motoros idegek vezetési sebességét a fibula, a tibia, a median és a ulnae idegeiből, valamint az érzékenységi paramétereket a suralis, median és ulnae idegekből, az American Association of Electrodiagnostic Medicine előírásai szerint.

Etikai megfontolások A tanulmányt a mexikói Guadalajara Egyetem Egészségtudományi Egyetemi Központjának Kutatási és Etikai Bizottsága hagyta jóvá. Minden résztvevőhöz azonosító kódokat rendeltek, hogy garantálják a betegek bizalmas kezelését, és a protokollba való belépés előtt aláírták a beleegyező nyilatkozatot a nemzeti és nemzetközi törvényeknek, valamint a Helsinki Nyilatkozatoknak megfelelően (http://www.wma.net/). es/30 kiadványok/ 10 policy/b3/17c.pdf, elérve 2011. január).

Statisztikai analízis A minta méretét egy klinikai vizsgálati képlet segítségével határoztuk meg, figyelembe véve az LPO 0,05 nmol/ml különbségét, 95%-os konfidencia intervallumot, 80%-os hatékonyságot és kétirányú p<0,05-et, ami 21-et eredményezett mindegyikre. csoport. A mennyiségi változókat átlag ± standard deviáció formájában fejeztük ki. Kolmogorov-Smirnov és Shapiro-Wilk teszteket végeztünk a változók nem paraméteres eloszlásának meghatározására. Friedman és Wilcoxon teszteket valósítottak meg a mérések előtt és után, Kruskal-Wallis teszteket Mann-Whitney U-vel post-hoc analízisként a csoportok közötti összehasonlításhoz. A minőségi változókat gyakoriságban és százalékban fejeztük ki. Chi-négyzet tesztet használtunk a dichotómia változók közötti különbségek értékelésére a kezelés előtt és után, a csoportok összehasonlítását Fisher-féle egzakt teszttel és szükség szerint χ2-vel határoztuk meg. A szignifikancia szintet p <0,05 értékkel állapítottuk meg.