Statiner til oxidativ stress og mitokondriel funktion ved diabetisk polyneuropati

Introduktion Nervedysfunktion hos patienter med diabetes er kendt som diabetisk neuropati og anses for at være den mest udbredte mikrovaskulære komplikation - op til 60 % - hos type 2-diabetes mellitus (T2DM) personer. Diabetisk polyneuropati (DPN) udgør ≈70% af alle tilfælde. Dens diagnose er etableret ved hjælp af validerede score baseret på kliniske træk og unormale nerveledningsundersøgelser (NCS). Patofysiologiske fund inkluderer tab af multifokale og fokale nervefibre sekundært til aksonal degeneration og segmentel demyelinisering, grundlæggende på grund af oxidativ stress induceret af kronisk hyperglykæmi, som fører til neural apoptose. Andre mekanismer involveret i perifer nerveskade er nitrosativ stress induceret af nitrogenoxid (NO).

Ezetimibe mindsker indholdet af kolesterolestere i chylomikroner ved at reducere leverens kolesterolindtag, hvilket som følge heraf øger LDL-optagelsen og plasmaudskillelsen; som monoterapi reducerer det LDL-C med 17 %. Når det kombineres med simvastatin, er kolesterolreduktion potentielt øget; endvidere omfatter pleiotropiske virkninger af statiner en stigning i nuklear faktor kappa B-aktivitet og forbedring af superoxidioner efter 12 ugers behandling. En anden hydroxy-methyl-glutaryl coenzym A-hæmmer, rosuvastatin, har en antioxidant virkning ved at fungere som fri radikal-bærer, der mindsker mitokondriel og cellulær lipidperoxidation (LPO) produktion.

Vi udførte denne undersøgelse for at evaluere effekten af ​​ezetimib/simvastatin og rosuvastatin på oxidativt stress hos patienter med DPN.

Metoder Undersøgelsesdesign Et randomiseret, dobbeltblindet, placebokontrolleret fase II klinisk forsøg blev udført i Clinic and Experimental Therapeutics Institute, University of Guadalajara, Mexico. Forsøgspersonerne blev tildelt tre gruppebehandlinger i blokke med en parallel sekvens 1:1:1 gennem en randomiseret computerbaseret liste, genereret af en anden forsker uvidende om givet lægemidler. Patienterne blev inddelt i: kontrolgruppe, der fik placebo, ezetimib/simvastatin og rosuvastatin som en daglig enkeltdosis i 16 uger. Udvælgelsesperioden blev udført fra februar 2012 til januar 2013. Vi udvalgte 5 ikke-randomiserede raske forsøgspersoner (HS) fra en blodbank for at sammenligne den oxidative stress-status.

Undersøgelsespopulationens inklusionskriterier var ≥18 år gamle, T2DM ifølge American Diabetes Association og DPN af Dyck et. al.3 kriterier, HbA1c <12%, og informeret samtykke underskrevet. De blev udelukket, hvis nyre- eller leversvigt, gravid eller ammende, andre neuropatier (alkohol-induceret, radikulopati, autoimmun, kræft-relateret), og elimineret, hvis man mangler behandlingsadhærens (<80 % af lægemiddelindtaget), alvorlige bivirkninger og/ eller alvorlig helbredssygdom. Patienter blev udvalgt efter invitation i fora; ambulante patienter rekrutteret fra primære klinikker; og database indsamlet tidligere af vores institut fra februar 2010 til 2012. Patienterne blev instrueret i kun at tage deres lægemidler om natten på samme tidspunkt hver dag, som følger: placebo 100 mg, ezetimib/simvastatin 10/20 mg og rosuvastatin 20 mg. Alle lægemidler var ens i fysiske egenskaber og præsenteret i mørke hætteglas, omhyggeligt fyldt af en anden gruppeforsker, som anbragte en respektive tag med patientkoden. Patienterne blev også forsynet med en dagbog, hvor de kunne skrive dato og klokkeslæt for lægemiddeladministration, og de mærkede lægemiddelbivirkninger. Sådanne oplysninger blev indsamlet og registreret hver 4. uge. Primære resultater var oxidative stressmarkører LPO, NO og TAC før og efter 16 ugers intervention. Sekundære resultater var kliniske, NCS og metaboliske [fastende glukose, HbA1c, total kolesterol, høj- og lavdensitetslipoproteiner (HDL, LDL) og triglycerider] parametre. Sikkerhedsprofilen blev vurderet med lægemiddelbivirkninger, nyre- (urinstof, kreatinin) og hepatiske [(alamin- og aspartat-aminotransferase, gama-glutamyltransferase, bilirubin og phosphokinase] laboratorievariabler.

Oxidativt stress og mitokondrielle funktionsmarkører LPO blev målt i henhold til kitspecifikationerne (Oxford Biomedical Research Inc., FR12), 200 μL serum, hvor behandlet med et kromogen stof, der reagerer med malondialdehyd (MDA) og 4-hydroxy-alkenaler (HNA), absorbansen målt ved 586 nm, og resultaterne udtrykt i nmol/ml.

Tidligere deproteinisering af prøverne udførte vi en kolorimetri til bestemmelse af koncentrationen af ​​NO med 85 µL serum (Nitric Oxide Assay Kit, brugerprotokol 482650), med resultater udtrykt som pmol/ml.

Total antioxidantkapacitet (TAC) blev realiseret med 200 µL serum for at opnå værdier af millimol (mM) ækvivalent urinsyre (Total Antioxidant Power Kit, nr. 02090130, Oxford Biomedical Research®).

Kliniske og nerveledningsvariable Neuropatiske symptomer (NSS) og handicapscore (NIS) beskrevet af Dyck, et. al. blev opnået ved fysisk undersøgelse og anamnese. Vi målte også latens, varighed, amplitude og motorisk nerveledningshastighed fra fibula-, tibial-, median- og ulnae-nerver og følsomhedsparametre fra sural-, median- og ulnae-nerver, som krævet af American Association of Electrodiagnostic Medicine.

Etiske overvejelser Undersøgelsen blev godkendt af forsknings- og etikkomitéen ved Health Science University Center, University of Guadalajara, Mexico. Identifikationskoder blev tildelt hver deltager for at garantere patientens fortrolighed, og en informeret samtykkeformular blev underskrevet, inden protokollen gik ind i overensstemmelse med national og international lovgivning, og også som fastsat i Helsinki-erklæringerne (http://www.wma.net/ es/30 publikationer/ 10 politikker/b3/17c.pdf, tilgået januar 2011).

Statistisk analyse Prøvestørrelsen blev opnået ved en klinisk undersøgelsesdesignformel, der tog højde for en forskelsændring på 0,05 nmol/mL i LPO, 95 % konfidensinterval, 80 % styrke og to-halet p<0,05, hvilket resulterede i 21 for hver gruppe. Kvantitative variable blev udtrykt som middel ± standardafvigelse. Kolmogorov-Smirnov og Shapiro-Wilk test blev udført for at bestemme den ikke-parametriske fordeling af variable. Friedman og Wilcoxon tests blev udført for før og efter målinger, og Kruskal-Wallis med Mann-Whitneys U som post-hoc analyse for sammenligninger mellem grupper. Kvalitative variable blev udtrykt som frekvenser og procenter. Chi square test blev brugt til at evaluere forskelle i dikotomivariabler før og efter behandling, mellem gruppesammenligninger blev bestemt ved Fishers eksakte test og χ2 efter behov. Signifikansniveau blev etableret med p-værdi <0,05.