ブラジルの流行地域におけるマラリア診断のための RealAmp メソッドの検証

世界中で約 20 億人がマラリアのリスクのある地域に住んでおり、年間罹患者数は 2 億 5,000 万人を超え、約 80 万人が死亡しています。 ヒトへの感染を引き起こす 4 種のマラリア原虫のうち、重症マラリア症例の大部分は熱帯熱マラリア原虫が原因であり、次に三日熱マラリア原虫が続きます。 迅速かつ正確な治療には早期かつ正確な診断が不可欠であり、これにより死亡率を低下させ、感染を遮断することができます。 現在、マラリアを診断するための従来の方法には、薄い血液塗抹標本と厚い血液塗抹標本の顕微鏡検査および迅速診断検査（RDT）が含まれます。 実際の光学顕微鏡検査では、通常、100 個/μl という低量の寄生虫血症が検出され、種を識別できます。 顕微鏡検査の利点には、寄生虫血症を推定できること、生殖母細胞を含む寄生虫の段階を特定できる可能性、およびその低コストが含まれます。 ただし、この方法は労働集約的で標準化が難しく、十分な訓練を受けた顕微鏡技師を必要とします。 RDT の大部分は、熱帯熱マラリア原虫ヒスチジンリッチ タンパク質 2 (HRP-2) 抗原の検出に基づいており、すべてのマラリア種を検出できるわけではありません。 ラクトースデヒドロゲナーゼ（LDH）とアルドラーゼを検出するRDTは、一般に4種類のマラリア原虫すべてに広く反応するため、種を区別することはできませんが、種検出の性能を向上させる取り組みが進行中です。 複数のマラリア種が同時に循環している状況では、寄生虫血症の少ないマラリア原虫の種を正確に診断するには、顕微鏡検査や RDT よりも分子的手法の方が信頼性が高い可能性があります。 ただし、ネステッドポリメラーゼ連鎖反応 (ネステッド PCR) やリアルタイム PCR などの従来の分子法は、技術的に難しく、リソースを大量に消費するため、設備の整った検査室が必要なため、一般に参照検査室に限定されます。 最近、現場で使用できる新しい分子法が開発され、マラリア流行国でのマラリア診断のための分子ツールを探索する新たな機会が開かれました。 マラリア制御プログラムのための分子ツールの使用を促進することを目的として、米国アトランタにある疾病管理予防センター (CDC) のマラリア研究室は、リアルタイム蛍光ループ媒介等温増幅 (RealAmp) と呼ばれる単純な等温分子法を開発しました。 ）マラリアの診断のため。 現在、Plasmodium 属の検出と、熱帯熱マラリア原虫および三日熱マラリア原虫種の検出用の RealAmp プライマーが存在します。 RealAmp メソッドは、現場でのマラリア (および HIV や結核など、公衆衛生に大きな影響を与える他の感染症) の診断のための分子ツールとして大きな可能性を秘めています。 これは、臨床および運用プログラムで現場で使用される従来の PCR ベースの診断方法の代替手段を提供できます。 この提案の目的は、熱帯熱マラリア原虫と三日熱マラリア原虫が共存するブラジルの 2 つの流行州において、臨床的にマラリアと診断された患者の血液斑からマラリア原虫を検出するための RealAmp の感度を検証することです。 この評価では、RealAmp および顕微鏡検査を参照検査としてリアルタイム PCR 法と比較します。